警報(bào)素HMGB1在腦出血大鼠血腫周邊區(qū)的表達(dá)與神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的：探討腦出血大鼠血腫周邊區(qū)HMGB1的表達(dá)與神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系。
　　方法：采用IV型膠原酶/低分子肝素法制作大鼠腦出血模型，96只健康雄性SD大鼠，體重200～250g,隨機(jī)分成假手術(shù)組和腦出血模型組，每組又分為術(shù)后6h，12h，24h，3d，5d，7d共7個時相點(diǎn)。在不同時間點(diǎn)觀察其行為學(xué)改變，評定方法包括：神經(jīng)功能缺損評分和運(yùn)動功能評分（平衡木行走試驗(yàn)、網(wǎng)屏試驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)）。免疫組織化學(xué)方法檢測HMGB1蛋白的表達(dá)，RT

2、-PCR方法檢測HMGB1mRNA的表達(dá)，Elisa法檢測TNF-α、IL-6蛋白的表達(dá)及TUNEL法檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡，并對HMGB1的表達(dá)及與TNF-α、IL-6和神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：1．神經(jīng)功能缺損評分：ICH24h時達(dá)到高峰，直至術(shù)后7d恢復(fù)到假手術(shù)組水平；運(yùn)動功能評分（平衡木行走試驗(yàn)、網(wǎng)屏試驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)）：ICH后24h時達(dá)到高峰，然后逐漸下降，直至術(shù)后7d恢復(fù)到假手術(shù)組水平。神經(jīng)功能缺損評分和運(yùn)動功能

3、評分與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　2．假手術(shù)組未見HMGB1mRNA表達(dá)和蛋白陽性細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)mRNA表達(dá)和大量棕黃色的HMGB1蛋白陽性細(xì)胞，于6h開始出現(xiàn)HMGB1mRNA表達(dá)和蛋白陽性細(xì)胞，24h達(dá)高峰，3d開始下降，5d再次升高，7d達(dá)到第二個高峰。實(shí)驗(yàn)組HMGB1mRNA表達(dá)和IRS評分與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　3．TNF-α、IL-6于腦出血后6h就達(dá)到表達(dá)高峰，隨

4、后逐漸下降，至7d接近假手術(shù)組水平。
　　4．凋亡檢測結(jié)果：TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)在ICH24h達(dá)高峰，自3d開始逐漸下降，至7d仍維持在高水平，實(shí)驗(yàn)組TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)與假手術(shù)組有顯著性差異(P＜0.01)；ICH后24h與同一組內(nèi)其他時間點(diǎn)比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　5．大鼠腦出血后HMGB1蛋白的表達(dá)與神經(jīng)細(xì)胞凋亡呈顯著正相關(guān)(P＜0.01，r=0.32）。
　　結(jié)論：1．大鼠腦出血后HMGB1表達(dá)升