骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)全層皮膚缺損創(chuàng)面的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為種子細(xì)胞修復(fù)皮膚缺損創(chuàng)面重建表皮的可能性,為組織工程化皮膚提供新的種子細(xì)胞來源.方法:1、選用家兔20只,抽取骨髓,分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,傳代擴(kuò)增,原位雜交檢測培養(yǎng)細(xì)胞的CD44鑒定其為MSCs.2、于兔背部兩側(cè)制造全層皮膚缺損創(chuàng)面,即以Ⅰ型膠原為載體,將已用5-溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標(biāo)記的自體MSCs植入左側(cè)創(chuàng)面(治療組),右側(cè)創(chuàng)面僅植以Ⅰ型

2、膠原作為對照組.于術(shù)后6、12天觀察創(chuàng)面收縮率,記錄其愈合時(shí)間,術(shù)后第4周、第5周切取創(chuàng)面中央再生皮膚組織,行常規(guī)病理和BrdU免疫組織化學(xué)染色檢測,進(jìn)行對比研究.結(jié)果:1、原位雜交檢測CD44結(jié)果為陽性,證實(shí)我們分離、培養(yǎng)的細(xì)胞為MSCs.2、創(chuàng)面收縮率,治療組〉對照組(P<0.05);愈合時(shí)間,治療組<對照組(P<0.05).常規(guī)病理檢測治療組再生皮膚表皮層明顯增厚,細(xì)胞數(shù)目明顯增多;免疫組化檢測,在治療組再生皮膚附件毛囊內(nèi)層以及表