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文檔簡介
1、鄭州大學碩士學位論文銀屑病角質(zhì)形成細胞微衛(wèi)星雜合性缺失的實驗研究姓名:雍磊申請學位級別:碩士專業(yè):皮膚性病學指導教師:王詩淇;李紅文20030506鄭州大學2 0 0 3 屆碩士畢業(yè)論文 銀屑病角質(zhì)形成細胞微衛(wèi)星雜合性缺失的實驗研究本實驗選取2 3 例進行期銀屑病患者,其中男1 4 例,女9 例:年齡1 2 .6 7 歲,平均年齡4 4 0 9 士90 1 歲;其中有家族史者1 3 例,無家族史者1 0 例;早發(fā)型和晚發(fā)型者分別為1 6
2、 例和7 例:尋常型銀屑病患者1 7 例,其它臨床類型者6 例。分別取同一患者的皮損和非皮損區(qū)表皮,進行體外原代細胞培養(yǎng)獲得角質(zhì)形成細胞,經(jīng)蛋白酶k 消化后,采用酚、氯仿法提取角質(zhì)形成細胞的基因組D N A 。應用多聚酶鏈式反應( p o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n ,P C R ) 擴增微衛(wèi)星D N A 片段, 擴增產(chǎn)物經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳( p o l y a c r y l
3、 a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s ,P A G E ) 后,用銀染技術進行顯色。結(jié)果1 .2 3 例銀屑病患者皮損區(qū)角質(zhì)形成細胞中在D 9 s 1 6 0 4 位點發(fā)現(xiàn)1 0 例,在D 9 s 1 7 1位點發(fā)現(xiàn)5 例存在L O H ;在非皮損區(qū)的D 9 s 1 6 0 4 位點發(fā)現(xiàn)3 例,在D 9 s 1 7 1 位點發(fā)現(xiàn)2 例存在L O H ,兩個位點間比較L O H 發(fā)生頻率
4、無顯著性差異( P > o .0 5 ) ;但皮損區(qū)的角質(zhì)形成細胞在微衛(wèi)星位點D 9 s 1 6 0 4 ,L O H 發(fā)生頻率明顯高于非皮損區(qū)( P0 .0 5 ) 。4 .尋常型銀屑病患者皮損區(qū)角質(zhì)形成細胞中D 9 s 1 6 0 4 和D 9 s 1 7 1 兩個位點L O H發(fā)生頻率分別為4 7 .1 %( 8 /1 7 ) 和2 3 .5 %( 4 /1 7 ) ,其它臨床類型者分別為3 3 .3 %( 2 /6 ) 齊
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