氨基葡萄糖及殼寡糖對(duì)小鼠免疫功能的影響.pdf

1、免疫系統(tǒng)是人體抵抗疾病，特別是抵抗感染性疾病的完整的組織系統(tǒng)，它由免疫組織、免疫器官、免疫細(xì)胞以及免疫分子四部分組成。各層次不同類型的免疫組織和細(xì)胞在體內(nèi)發(fā)揮不同的功能，通過淋巴細(xì)胞再循環(huán)和各種免疫分子將各部分的功能協(xié)調(diào)統(tǒng)一起來。各種免疫細(xì)胞能及時(shí)清除自身體內(nèi)的一些異常細(xì)胞和代謝物，消除其對(duì)機(jī)體正常生理功能的影響，維持自身內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)的發(fā)展，人們認(rèn)識(shí)到許多疾病的發(fā)生、人體衰老及老年人的多發(fā)病都與免

2、疫系統(tǒng)的紊亂有密切關(guān)系。研究開發(fā)具有促進(jìn)機(jī)體免疫力的功能性食品、藥品，越來越受到研究者的關(guān)注。 殼聚糖及其衍生物具有廣泛的生物學(xué)功能，在抗菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫、傷口愈合、減肥、降血脂及生物材料中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。殼寡糖(chito-oligo-saccharide，COS)及其單糖衍生物一氨基葡萄糖(glucosamine，GlcNH<,2>)在體內(nèi)由于具有易被吸收、轉(zhuǎn)化和利用等特點(diǎn)，較殼聚糖能夠發(fā)揮更重要的生物學(xué)功能，有關(guān)COS

3、和GlcNH<,2>增強(qiáng)免疫功能方面的研究，除殼寡糖有少量文章報(bào)道外，GlcNH<,2>在國內(nèi)外尚未見詳細(xì)報(bào)道。 本研究利用酶水解法制備、純化了COS和GlcNH<,2>，并對(duì)其各項(xiàng)理化性質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。通過體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)方法研究了COS和GlcNH<,2>對(duì)免疫功能的影響。實(shí)驗(yàn)以昆明種小鼠為研究對(duì)象，用體外實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定COS和GlcNH<,2>對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響以及對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞(peritoneal m

4、acrophage，PMO)增殖能力、吞噬中性紅能力、分泌細(xì)胞因子(NO和IL-1)功能的影響。將細(xì)胞分別與10、100、500、1000μg／ml GleNH<,2>進(jìn)行共培養(yǎng)，測(cè)定其對(duì)細(xì)胞增殖能力、PMφ吞噬中性紅能力、PMφ分泌NO和IL-1能力的影響。為研究COS和GlcNH<,2>對(duì)體內(nèi)非特異性免疫功能和體液免疫、細(xì)胞免疫的影響，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行分組，實(shí)驗(yàn)組每天分別灌服不同劑量的COS和GleNH<,2>·HCl溶液(125、2

5、50、500 mg/kg bw)，連續(xù)20天，然后對(duì)免疫功能指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，主要包括單核巨噬細(xì)胞吞噬功能(碳粒廓清法)，綿羊紅細(xì)胞所致小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)(足跖增厚法)，抗體生成能力(半數(shù)溶血值法)，以及小鼠免疫器官指數(shù)(脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù))。 GlcNH<,2>體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：GlcNH<,2>能顯著促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖，在500ug/ml時(shí)，促進(jìn)能力最強(qiáng)(P<0.05)；不同濃度的GIcNH2與PMO共同培養(yǎng)24 h后，細(xì)胞

6、對(duì)中性紅的吞噬量都有所增加，且具有濃度依賴關(guān)系；GlcNH<,2>能夠促進(jìn)PMφ產(chǎn)生NO，在100ug／ml時(shí)，促進(jìn)效果最明顯，與對(duì)照組相比具有極顯著差異(p<0.01)；不同濃度的GlcNH<,2>都可以增加PMφ的IL．1誘生量，且與對(duì)照組相比具有極顯著差異(P<0.01)。 GlcNH<,2>HCl體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：給小鼠灌服不同劑量的GlcNH<,2>-HCl，能夠提高其碳廓清指數(shù)，增強(qiáng)體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能；不同劑

7、量的GlcNH<,2>HCl均可顯著提高小鼠血清中溶血素的含量，且劑量越高，作用效果越顯著，表明GleNH<,2>HCl能夠提高小鼠血清中的抗體水平，促進(jìn)其特異性體液免疫功能；GlcNH<,2>HCl可以增強(qiáng)小鼠的遲發(fā)型超敏反應(yīng)，與對(duì)照組比較，125mg／KG bw劑量組具有極顯著差異(P<0.01)，說明GleNH<,2>HCI能夠提高二次致敏后機(jī)體的免疫力，增強(qiáng)其細(xì)胞免疫功能；GleNH<,2>HCl還能夠增加小鼠的脾臟和胸腺重量，

8、與對(duì)照組比較，具有顯著差異(P<0.05)。 COS實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：COS在體內(nèi)促免疫功能效果顯著。給小鼠灌服不同劑量的COS，均可提高體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞的碳廓清指數(shù)，增加小鼠血清中溶血素的含量，增強(qiáng)小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)程度，以及提高小鼠的脾臟和胸腺指數(shù)，并且隨著COS劑量的升高，功能越顯著，500 mg／kg bw劑量組與對(duì)照組比較，均具有顯著差異(P<0.05)。表明COS能夠提高小鼠的非特異性免疫功能，促進(jìn)其特異性體液免疫功能和