Wnt-β-catenin通路在結腸癌血管生成擬態(tài)形成中的作用.pdf

1、天津醫(yī)科大學博士學位論文Wnt/β--catenin通路在結腸癌血管生成擬態(tài)形成中的作用姓名：齊麗莎申請學位級別：博士專業(yè)：臨床醫(yī)學；腫瘤學指導教師：孫保存2012-05天津醫(yī)科大學博士學位論文6 ) 體外三維培養(yǎng)( t h r e e d i m e n s i o n a lc u l t u r e ，3 D ) 觀察D k k l 對結腸癌細胞管狀結構形成能力的影響。7 ) 檢測D k k l 過表達后E M T 相關蛋白、V

2、M 形成相關蛋白及結腸癌干樣細胞相關蛋白表達情況，探討w 州1 3 ．c a t e m n 信號通路調控結腸癌細胞V M 形成的分子機制。8 ) 將穩(wěn)定過表達D k k l 的H C T l l 6 細胞接種到裸鼠體內，觀察D k k l 在體內對結腸癌細胞增殖、侵襲能力的影響，免疫組化檢測腫瘤組織內E M T 相關蛋白的表達和V M 形成情況，進一步明確在結腸癌中抑制W n t ／B ．c a t e m n 信號通路對V M 形成

3、的影響。結果：1 ) 人結腸癌組織中存在V M ，且存在V M 的腫瘤組織分化較差、臨床分期高并易發(fā)生轉移、復發(fā)( P < O ．0 5 ) ；2 ) 存在V M 的結腸癌組織中腫瘤細胞高表達V i m e n t i n ，低表達E ．c a d h e r i n ( P < 0 ．0 5 ) ，提示存在V M 的結腸癌組織中腫瘤細胞多發(fā)生E M T ；W n t ／1 3 。c a t e n i n 信號通路活化的腫

4、瘤細胞更易發(fā)生E M T ；存在V M 的結腸癌組織中0 ．c a t e n i n 核表達較高，而D k k l 表達相對較低( 尸< O ．0 5 ) ，提示W(wǎng) n t ／D ．c a t e m n 信號通路活化的結腸癌組織更易發(fā)生V M 。3 ) 轉染D k k l 的H C T l l 6 細胞D l d < l 表達增加，c ．m y c 和c y c l i n D l 表達降低。4 ) D k k l 過表

5、達抑制H C T l l 6 細胞的增殖( P < O ．0 5 ) 。5 ) D k k l 過表達的H C T l l 6 細胞修復劃痕能力明顯減弱( P < o ．0 5 ) ，粘附能力明顯增加儼< 0 ．0 5 ) ，侵襲能力明顯減弱妒< O ．0 5 ) 。6 ) D k k l 過表達的H C T l l 6 細胞形成管狀結構能力比對照組細胞明顯減弱。7 ) D k k l 過表達的H C T l 1

6、6 細胞與對照組細胞相比E ．c a d h e r i n 、K e r a t i n l 8 表達升高，V i m e n t i n ，F(xiàn) i b r o n e c t i n ，1 3 ．c a t e m n ，S n a i l ，T w i s t ，V E —c a d h e r i n ，L g r 5 ，C D l 3 3 表達降低。8 ) 接種了D k k l 過表達H C T l l 6 細胞的小鼠與對照組