IrrE基因轉化甘藍型油菜及其對NaC1脅迫耐受性應答的研究.pdf

1、甘藍型油菜(Brassica napus L.)屬于十字花科蕓薹屬植物，是全世界較為重要的一種油料栽培作物，在整個生長發(fā)育期中對鹽脅迫都很敏感。為了增強油菜的鹽耐受性，我們以來源于耐輻射異常球菌的IrrE基因為外源基因，下胚軸為外植體，采用農桿菌介導的遺傳轉化方法，對甘藍型油菜進行轉化，獲得轉IrrE基因的油菜。結果表明：
　　 1、轉IrrE基因油菜能忍受350mmol/L NaCl高鹽脅迫，并能正常生長發(fā)育，當然有些相關的農

2、藝性狀發(fā)生了一定的變化，主要表現(xiàn)在株高、主花序長度、全株有效角果數(shù)差異極顯著，而野生型油菜在相同的脅迫下處理48h后就會死亡。
　　 2、轉基因油菜幼苗和野生型油菜幼苗在200mmol/L NaCl脅迫48之間，隨著脅迫時間的延長，轉IrrE基因和野生型油菜的CAT、SOD、POD三種抗氧化酶活性均增加，其中野生型油菜的三種抗氧化酶在24h后達到峰值，隨后逐漸下降，而轉IrrE基因油菜的三種抗氧化酶活性卻持續(xù)增加，并在相同的脅迫

3、時間內均高于野生型油菜的酶活性。說明了IrrE基因通過提高轉IrrE基因油菜的抗氧化酶活性來增加植物的抗鹽性。
　　 3、與野生型油菜相比，轉基因油菜MDA的含量低，在200mmol/L濃度的NaCl脅迫處理48小時后野生型油菜MDA含量是0.75umol/L，而轉基因MDA含量是0.6umol/L。說明IrrE基因表達產物調控了高鹽帶來的膜脂過氧化過程，從而穩(wěn)定了細胞膜的基本結構，減少了高鹽對植物的傷害。
　　 4、2

4、00mmol/L濃度的NaCl脅迫處理48小時，轉基因油菜中脯氨酸含量提高了9倍，而野生型植株基本沒有變化。此外，與野生型油菜相比轉基因油菜種可溶性蛋白濃度較高，在200mmol/L濃度的NaCl脅迫處理48小時后轉基因油菜可溶性蛋白濃度是250ug/ul，而非轉基因可溶性蛋白含量是210ug/ul。說明IrrE基因表達產物影響了氨基酸的合成與分解，對高鹽所帶來的對氨基酸的破壞起到有效的保護作用。
　　 5、通過酵母雙雜交技術，