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1、化學發(fā)光技術綜述化學發(fā)光技術綜述化學發(fā)光免疫測定(CLIA)是將抗原與抗體特異性反應與敏感性的化學發(fā)光反應相結合而建立的一種免疫檢測技術。(一)原理化學發(fā)光免疫測定(CLIA)屬于標記抗體技術的一種,它以化學發(fā)光劑、催化發(fā)光酶或產(chǎn)物間接參與發(fā)光反應的物質等標記抗體或抗原,當標記抗體或標記抗原與相應抗原或抗體結合后,發(fā)光底物受發(fā)光劑、催化酶或參與產(chǎn)物作用,發(fā)生氧化還原反應,反應中釋放可見光或者該反應激發(fā)熒光物質發(fā)光,最后用發(fā)光光度計進行檢
2、測。(二)特點特異性高、敏感性高、分離簡便、快速、試劑無毒、安全穩(wěn)定、可自動化。(三)分類1、從反應原理上,化學發(fā)光免疫技術主要分為直接化學發(fā)光和酶促反應化學發(fā)光。1.1直接化學發(fā)光化學發(fā)光劑在發(fā)光免疫分析過程中不需酶的催化作用,直接參與發(fā)光反應,它們在化學結構上有產(chǎn)生發(fā)光的特有基團,可直接標記抗原③光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強度大;④易于與蛋白質聯(lián)結且聯(lián)結后光子產(chǎn)率不減少;⑤標記物穩(wěn)定(在28℃下可保存數(shù)月之久)。1.1.2.三
3、聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕[RU(bpy)3]2是電化學發(fā)光劑,它和電子供體三丙胺(TPA)在陽電極表面可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反應。1.2酶促反應化學發(fā)光是利用標記酶的催化作用,使發(fā)光劑(底物)發(fā)光,這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑稱為酶促反應發(fā)光劑。酶促化學發(fā)光靈敏度高,但速度慢,酶活性容易受外界影響,其代表性的發(fā)光物質有魯米諾及其衍生物、AMPPD1.2.1.魯米諾及其衍生物(HRP)激活酶為辣根過氧化物酶(HRP),魯米諾體系的發(fā)光基本
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