簡(jiǎn)介：目的利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞293T細(xì)胞表達(dá)含有西尼羅病毒W(wǎng)NVPRME的蛋白，自我組裝成病毒樣顆粒VIRUSLIKEPARTICLES，VLPS，改進(jìn)優(yōu)化轉(zhuǎn)染等條件實(shí)現(xiàn)大規(guī)模轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，獲得大量的純化蛋白，以此蛋白作為抗原研制檢測(cè)西尼羅病毒抗體的ELISA試劑盒，用試劑盒來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)我國(guó)出入境人員的血清進(jìn)行調(diào)查。方法篩選典型西尼羅病毒株，構(gòu)建重組質(zhì)粒，大規(guī)模轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，優(yōu)化轉(zhuǎn)染的條件和方法，表達(dá)西尼羅病毒PRME蛋白，獲得大量的表達(dá)重組蛋白，通過(guò)間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證表達(dá)抗原的完整性和特異性，純化西尼羅病毒PRME蛋白抗原，ELISA對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行鑒定制成大規(guī)模的檢測(cè)試劑盒采用蔗糖梯度離心1060％結(jié)合超速離心純化表達(dá)產(chǎn)物將純化的表達(dá)產(chǎn)物包被子聚苯乙烯微量反應(yīng)板，與待檢血清中抗WNV抗體反應(yīng)后，經(jīng)洗滌，再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗人IGG與之結(jié)合，然后用TMB作用顯色，建立間接ELISA方法，評(píng)價(jià)建立的間接ELISA方法對(duì)我國(guó)入境人員血清進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后產(chǎn)生病毒樣顆粒VIRUSLIKEPARTICLESVLPS，優(yōu)化轉(zhuǎn)染的條件和方法，從轉(zhuǎn)染的293T細(xì)胞從細(xì)胞的上清液中和細(xì)胞中的表達(dá)的蛋白的的純化物中獲得大規(guī)模的重組蛋白，通過(guò)間接免疫熒光試驗(yàn)表明，表達(dá)的病毒樣顆粒蛋白具有良好的抗原性間接ELISA證實(shí)，重組蛋白可以作為抗原用于檢測(cè)患者血清特異性抗體純化得到的大量的蛋白包被成ELISA試劑盒，通過(guò)對(duì)來(lái)自西尼羅疫區(qū)的286份我國(guó)入境人員血清檢測(cè)，與金標(biāo)準(zhǔn)美國(guó)FOCUS的WNVIGG檢測(cè)試劑盒比較，ELISALAB陽(yáng)性檢出率為356％，F(xiàn)OCUSWNVIGG檢測(cè)試劑盒則為325％，兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異X2305，P0078＞005KAPPA值為08372，兩者具有良好的一致性，其中兩者的陽(yáng)性檢出符合率為9118％，陰性符合率為9534％，總符合率為9266％。結(jié)論在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的西尼羅病毒樣顆粒具有良好的抗原性以西尼羅病毒樣顆粒為抗原建立檢測(cè)WNV抗體的間接ELISA方法，檢測(cè)效果不亞于進(jìn)口試劑盒，大規(guī)模轉(zhuǎn)染細(xì)胞所純化的西尼羅病毒的重組蛋白可以實(shí)現(xiàn)制成大規(guī)模商品化的試劑盒，可以以此試劑盒來(lái)對(duì)我國(guó)出入境人員進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多pXZ208-EGFP-HO-1慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文單純皰疹病毒胸苷激酶基因聯(lián)合內(nèi)皮抑素基因治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名邵俊偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)普通外科學(xué)指導(dǎo)教師易繼林20040401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文自殺基因SUICIDEGENE是指可引起細(xì)胞死亡的基因，即將某些細(xì)菌、病毒和真菌中特有的藥物敏感基因?qū)肽[瘤細(xì)胞，通過(guò)此基因編碼的特異性酶類(lèi)將原先對(duì)細(xì)胞無(wú)毒或毒性極低的藥物前體在腫瘤細(xì)胞內(nèi)代謝成有毒性的產(chǎn)物，以達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的，也稱(chēng)藥物敏感基因。HSKTK基因是最有特點(diǎn)的自殺基因，它編碼胸苷激酶，該酶可將核瞢類(lèi)似物NA代謝為二磷酸化物，后者在細(xì)胞內(nèi)酶的作用下成為有毒性的三磷酸化物而發(fā)揮抗腫瘤作用。病毒源性的TK基因與哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的TK基因在生化性質(zhì)上有著很大的差異，細(xì)胞TK所催化的反應(yīng)特異性較強(qiáng)，只能催化脫氧胸苷酸，而HSVTK除有此功能外，還能催化抗病毒核苷類(lèi)似物ACYCLOVIRACV，GANCICLOVIRGCV，BROMOVINYDEOXYURIDINEBDVDU，這些前藥不能在細(xì)胞TK的作用下磷酸化，因而其本身對(duì)細(xì)胞無(wú)毒或毒性很低，但HSVTK基因?qū)爰?xì)胞并表達(dá)后，生成特定的酶，這些酶將這些前藥三磷酸化，轉(zhuǎn)換成毒性產(chǎn)物，阻斷核酸代謝途徑，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。正常人體的血管內(nèi)皮細(xì)胞倍增時(shí)間為一年，而實(shí)體瘤組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞的倍增時(shí)間僅4天。血管是腫瘤生長(zhǎng)的“糧草”，又是腫瘤細(xì)胞的溫床，血管的“瘋長(zhǎng)”支持和幫助了腫瘤的瘋長(zhǎng)，也為腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散提供了前提。因此，抑制血管生成可能是治療腫瘤的有效方法。FOLKMAN早在1971年就提出了抑制腫瘤血管生成，使腫瘤細(xì)胞因缺血缺氧而部分死亡從而達(dá)到治療腫瘤的目的，但是直到最近五年，這方面的研究才受到人們的重視，但是現(xiàn)有的一般抗血管形成藥物只能使腫瘤生長(zhǎng)減緩，而不能使之完全消除，從腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)的血管形成抑制因子，包括血管抑素ANGIOSTATIN、內(nèi)皮抑素ENDOSTATIN，它們對(duì)血管生成抑制作用更強(qiáng)。ENDOSTATIN為膠原蛋白XVIII的C端球形末端部分片段或其類(lèi)似物。內(nèi)皮抑素在體外及小鼠中已證實(shí)能對(duì)多種移植的實(shí)體腫瘤及其轉(zhuǎn)移物有完全抑制作用，而且FOLKMAN發(fā)現(xiàn)在經(jīng)過(guò)6輪重復(fù)治療后，腫瘤對(duì)之仍然敏感，不產(chǎn)生耐藥性?？傊紤]到此二者所具有的抑制腫瘤的不同特性，實(shí)驗(yàn)中通過(guò)對(duì)HSVTK和ENDOSTATIN基因抑制腫瘤生長(zhǎng)作用加以證實(shí)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究此兩者聯(lián)合使用下對(duì)肝癌的治療是否有協(xié)同作用，為肝癌的基因治療打下一定的基礎(chǔ)，為此，我們進(jìn)行了以下的實(shí)驗(yàn)研究。2

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)R733密級(jí)公開(kāi)UDC616006編號(hào)2011213186廣州醫(yī)科大學(xué)廣州醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文碩士研究生學(xué)位論文USP22SHRNA慢病毒載體的構(gòu)建及慢病毒載體的構(gòu)建及其干擾其干擾人鼻咽癌細(xì)胞鼻咽癌細(xì)胞CNE2的研究的研究研究生研究生余宏偉余宏偉導(dǎo)師師周同沖周同沖教授教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別臨床醫(yī)學(xué)碩士年級(jí)級(jí)二零一一級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)業(yè)腫瘤學(xué)研究方向研究方向腫瘤放射治療論文提交日期論文提交日期2014年5月論文答辯日期論文答辯日期2014年5月學(xué)位類(lèi)型型臨床型學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位廣州醫(yī)科大學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席評(píng)議人人二零一四二零一四年五月目錄中文摘要1英文摘要3主要符號(hào)表5前言6材料與方法9結(jié)果24討論31結(jié)論33參考文獻(xiàn)34綜述37攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果43致謝43學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明45學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明45關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說(shuō)明45

簡(jiǎn)介：東南大學(xué)碩士學(xué)位論文乙型肝炎病毒宮內(nèi)感染危險(xiǎn)因素分析及嬰兒聯(lián)合免疫失敗的預(yù)測(cè)姓名許傳露申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師韓國(guó)萙20120623東南人學(xué)碩1學(xué)位論文分析顯示產(chǎn)前出血、羊水污染、羊水過(guò)少是宮內(nèi)感染的危險(xiǎn)因素，多因素LOGISTIC回歸分析顯示母親分娩前高載量HBVDNA是宮內(nèi)感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素OR892，95％CI67L一1624。2在251例母嬰感染組中，61例嬰兒聯(lián)合免疫失敗，免疫失敗率為243％61／251。通過(guò)單因素分析比較，對(duì)于出生時(shí)HBSAG嬰兒，出生時(shí)HBVDNA陽(yáng)性宮內(nèi)感染率明顯高于出生時(shí)HBVDNA陰性的嬰兒。發(fā)生宮內(nèi)感染嬰兒出生時(shí)HBSAG、HBEAG和HBVDNA水平均相對(duì)高于未發(fā)生宮內(nèi)感染嬰兒，在1月齡時(shí)HBSAG、HBEAG及HBVDNA水平明顯高于出生時(shí)P，6LOGL0CP／ML母親發(fā)生宮內(nèi)感染。產(chǎn)前出血，羊水污染，羊水過(guò)少是宮內(nèi)感染的危險(xiǎn)因素，母親分娩前高載量HBVDNA是宮內(nèi)感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。2出生時(shí)血清HBSAG的嬰兒聯(lián)合免疫失敗率為243％，出生時(shí)HBSAGRHBVDNA陽(yáng)性，出生時(shí)相對(duì)高HBSAG、HBEAG、HBVDNA水平和1月齡時(shí)高HBSAG、HBEAG、HBVDNA水平，低HBSAB水平是預(yù)測(cè)聯(lián)合免疫失敗的危險(xiǎn)指標(biāo)。關(guān)鍵詞肝炎病毒，乙型；宮內(nèi)感染；疾病傳播，垂直；聯(lián)合免疫失敗

簡(jiǎn)介：目的評(píng)估不同濃度目安眼膏對(duì)實(shí)驗(yàn)性家兔單純皰疹性角膜炎的療效。方法將實(shí)驗(yàn)性單純皰疹性角膜炎家兔分為4組，觀察組分別用Ⅰ號(hào)眼膏5％目安眼膏、Ⅱ號(hào)眼膏1O％目安眼膏、對(duì)照組用Ⅳ號(hào)眼膏3％無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷、Ⅴ眼膏基質(zhì)，觀察角膜病變并評(píng)分，同時(shí)進(jìn)行兔結(jié)膜囊淚液膜病毒分離并計(jì)算病毒滴度。結(jié)果5％目安眼膏在治療過(guò)程中角膜潰瘍范圍較3％ACV眼膏對(duì)照組明顯縮小，病毒滴度高峰時(shí)平均病毒滴度也較低，均有顯著性差異，而10％目安眼膏與3％ACV比較統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差異。結(jié)論5％和10％目安眼膏對(duì)治療實(shí)驗(yàn)性家兔單純皰疹性角膜炎有明顯療效，且5％目安眼膏療效優(yōu)于3％無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷眼膏，1O％目安眼膏療效與3％無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷眼膏相同。

簡(jiǎn)介：目的采用分子流行病學(xué)的方法，通過(guò)漢坦病毒核酸RTPCR分型及部分?jǐn)U增片段的序列分析，研究河南省不同地區(qū)嚙齒類(lèi)動(dòng)物攜帶腎綜合征出血熱病毒狀況和病毒型別，了解其基因型的分布、變異、新型別存在與否，并對(duì)其系統(tǒng)發(fā)生及進(jìn)化關(guān)系加以分系，為腎綜合征出血熱防治研究提供科學(xué)依據(jù)。方法籠捕法捕鼠，計(jì)算鼠密度，確定鼠種構(gòu)成。用直接免疫熒光法檢測(cè)動(dòng)物肺組織切片，應(yīng)用漢坦病毒型特異性引物以RTPCR方法對(duì)抗原檢測(cè)陽(yáng)性的鼠肺標(biāo)本擴(kuò)增M和S基因片段上的特異核苷酸序列并測(cè)序，將擴(kuò)增片段的核苷酸序列與已知病毒序列進(jìn)行比較，用PHYLIP軟件對(duì)得到的序列繪制系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)，了解其進(jìn)化關(guān)系，以明確基因亞型及其地理分布情況。結(jié)果在河南省不同生境的7個(gè)縣市區(qū)中共布鼠籠4720個(gè)，捕獲嚙齒類(lèi)動(dòng)物695只，褐家鼠為優(yōu)勢(shì)鼠種，占3353％。其次為黃胸鼠，占1841％。應(yīng)用直接免疫熒光法檢測(cè)全部鼠肺，其中陽(yáng)性肺組織切片95份，陽(yáng)性率為1367％。陽(yáng)性切片中，褐家鼠和倉(cāng)鼠分別占470％和2632％。陽(yáng)性標(biāo)本并用RTPCR反應(yīng)擴(kuò)增并電泳檢測(cè)。對(duì)3份M片段、S片段均擴(kuò)增陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行序列測(cè)定，并對(duì)其核苷酸序列進(jìn)行分析顯示，均為漢城型SEO漢坦病毒，與漢坦病毒R22株、L99株、HB55株、HB86株、SR11株分別屬相同亞型。同一地區(qū)的漢坦病毒其核苷酸序列同源性較為接近，表明不同亞型間有著明顯的地理聚集現(xiàn)象。在研究中無(wú)新的型別出現(xiàn)。結(jié)論河南省不同地區(qū)出血熱病毒的主要宿主動(dòng)物是褐家鼠，不同宿主動(dòng)物攜帶的漢坦病毒之間的核苷酸序列同源性較高，但也存在一定的差異。這種差異形成的原因有待進(jìn)一步研究。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)R749R749密級(jí)一般密級(jí)一般ＵＤＣＵＤＣ6168961689編號(hào)編號(hào)20092121762009212176廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文多個(gè)多個(gè)GABAAGABAA受體亞基基因與雙相障礙受體亞基基因與雙相障礙I型及其認(rèn)知功能的關(guān)聯(lián)研究及其認(rèn)知功能的關(guān)聯(lián)研究研究生研究生關(guān)力杰關(guān)力杰導(dǎo)師師曹莉萍曹莉萍教授教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別醫(yī)學(xué)碩士醫(yī)學(xué)碩士年級(jí)二零零九級(jí)二零零九級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)精神病精神衛(wèi)生學(xué)精神病精神衛(wèi)生學(xué)研究方研究方向生物精神病學(xué)生物精神病學(xué)論文提交日期論文提交日期20122012年5月論文答辯日期論文答辯日期20122012年5月學(xué)位類(lèi)學(xué)位類(lèi)型醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)學(xué)位醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位廣州醫(yī)學(xué)院廣州醫(yī)學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席評(píng)議評(píng)議人20122012年5月目錄主要縮略詞表主要縮略詞表1中文摘要中文摘要2英文摘要英文摘要6前言1010材料與方法材料與方法1414結(jié)果2323討論3434結(jié)論4242參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)4343綜述4646致謝5353原創(chuàng)性聲明原創(chuàng)性聲明5454知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明知識(shí)產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明5454學(xué)問(wèn)論文使用授權(quán)說(shuō)明學(xué)問(wèn)論文使用授權(quán)說(shuō)明5454

簡(jiǎn)介：四川大學(xué)博士學(xué)位論文包載反義RNA重組腺病毒微球的制備及逆轉(zhuǎn)肝細(xì)胞癌MRP的研究姓名余少鴻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師嚴(yán)律南20040422包載反義RNA重組腺病毒微球的制備及逆轉(zhuǎn)肝細(xì)胞癌MRP的研究研究生余少鴻導(dǎo)師嚴(yán)律南摘要目的構(gòu)建攜帶反義多藥耐藥相關(guān)蛋白NAP基因的重組腺病毒微球并轉(zhuǎn)染人肝癌耐藥細(xì)胞株，并進(jìn)行肝動(dòng)脈栓塞治療，了解包載反義RNA重組腺病毒微球逆轉(zhuǎn)肝細(xì)胞癌MRP的治療效果，為高分子化學(xué)與基因治療的結(jié)合提供臨床應(yīng)用的理論基礎(chǔ)。方法采用可降解的生物材料聚乳酸一聚乙烯醇PELA包被攜帶反義MRP基因的重組腺病毒制成微球，體外測(cè)定微球的粒徑、載病毒量、包封率及釋放規(guī)律，并用其轉(zhuǎn)染人肝癌耐藥細(xì)胞株HEPG2/ADM,48H及120H后檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞熒光強(qiáng)度。MTT法檢測(cè)耐藥細(xì)胞的阿霉素半數(shù)致死量ICSO流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)紅色熒光強(qiáng)度，以熒光指數(shù)FL代表DNR濃度以0ACTIN為內(nèi)參照，以RTPCR法觀察轉(zhuǎn)染48H及120H后耐藥細(xì)胞MRPMRNA的表達(dá)量高低，比較MRP的逆轉(zhuǎn)情況及反義基因表達(dá)的特異性及作用的時(shí)效關(guān)系。設(shè)不做任何處理組，生理鹽水組，空白微球組，攜帶反義MRP的重組腺病毒組為對(duì)照，觀察經(jīng)肝動(dòng)脈注射RADV微球的靶向性效果動(dòng)態(tài)測(cè)定RADV微球在肝癌組織及癌旁組織，腎肺組織內(nèi)的分布，觀測(cè)腫瘤體積大小、腫瘤生長(zhǎng)率及平均生存時(shí)間。結(jié)果成功地構(gòu)建了攜帶反義MRP基因的重組腺病毒微球，直徑約

簡(jiǎn)介：ACOGNITIVESTUDYONENGLISHAFFECTIVE●●TNLNESELEARNERSATHESISSUBMITTEDINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTEROFARTSINSCH001OFFOREIGNLANGUAGESANDCULTURESOFNANJINGNORMALUNIVERSITYBYYINZEJINUNDERTHESUPERVISION0FPROFNICHUANBINNANJINGNORMALUNIVERSITYNANJING，CHINAMAY，2014摘要關(guān)于情緒和記憶之間的關(guān)系，在語(yǔ)言學(xué)、心理學(xué)、認(rèn)知科學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域已有大量研究佐證。其中，關(guān)于情感性詞匯記憶與檢索的研究，已取得了令人矚目的進(jìn)展。情緒性詞匯意指詞匯中包含了情感因素的詞匯。與“高興”，“生氣”，“傷心”等詞面上即刻表達(dá)情緒的詞匯不同，它們?cè)谠~義中隱含了情感狀態(tài)，如“圣誕節(jié)”、“巧克力”、“考試”等。在已有的研究中，大都基于被試對(duì)母語(yǔ)情緒性詞匯的判斷開(kāi)展研究，而對(duì)二語(yǔ)習(xí)得者二語(yǔ)情緒性詞匯判斷的研究，近幾年才開(kāi)始出現(xiàn)。盡管有相關(guān)研究證明二語(yǔ)習(xí)得者對(duì)習(xí)得語(yǔ)中的情緒性詞匯的認(rèn)知與記憶，與其母語(yǔ)中的情緒性詞匯表現(xiàn)出了相同的認(rèn)知和記憶趨勢(shì)，但是，在國(guó)外針對(duì)母語(yǔ)是漢語(yǔ)，二語(yǔ)是英語(yǔ)的習(xí)得者，相應(yīng)的研究并不多見(jiàn)。在國(guó)內(nèi)，已有的研究?jī)H也僅局限于母語(yǔ)為漢語(yǔ)的被試對(duì)情緒性詞匯的認(rèn)知與記憶。因此，本論文基于已有的理論研究框架，擬探討母語(yǔ)為漢語(yǔ)，二語(yǔ)為英語(yǔ)的習(xí)得者對(duì)英語(yǔ)情感性詞匯的認(rèn)知與記憶。具體講，本文將開(kāi)展研究如下三個(gè)問(wèn)題1母語(yǔ)為漢語(yǔ)，二語(yǔ)為英語(yǔ)的習(xí)得者對(duì)英語(yǔ)情緒性詞匯的判斷與母語(yǔ)為英語(yǔ)的使用者是否一致2如果研究問(wèn)題一成立，母語(yǔ)為漢語(yǔ)，二語(yǔ)為英語(yǔ)的習(xí)得者對(duì)英語(yǔ)情緒性詞匯的記憶與喚醒是否先于母語(yǔ)3母語(yǔ)為漢語(yǔ)，二語(yǔ)為英語(yǔ)的習(xí)得者對(duì)英語(yǔ)情緒性詞匯的記憶與喚醒在短時(shí)記憶和長(zhǎng)時(shí)記憶中是否有差異針對(duì)以上三個(gè)研究問(wèn)題，本文采用問(wèn)卷調(diào)查與記憶判斷的研究范式，以江蘇某高中的160名學(xué)生己學(xué)完牛津英語(yǔ)9B為被試，進(jìn)行了數(shù)據(jù)的采集，并對(duì)采集到的數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS進(jìn)行了詳細(xì)的數(shù)據(jù)分析。其結(jié)果表明母語(yǔ)為漢語(yǔ)，二語(yǔ)為英語(yǔ)的習(xí)得者對(duì)英語(yǔ)情緒性詞匯的判斷與母語(yǔ)為英語(yǔ)的使用者一致；他們對(duì)英語(yǔ)情緒性詞匯的儲(chǔ)存與提取，明顯優(yōu)先于中性詞匯這種記憶的優(yōu)先性同時(shí)存在與長(zhǎng)BTIG憶與短時(shí)記憶中。中國(guó)存在著數(shù)量非常龐大的英語(yǔ)學(xué)習(xí)者以及英語(yǔ)教育工作者，本文開(kāi)展的的研究，將對(duì)教材編寫(xiě)、提高英語(yǔ)學(xué)習(xí)效率等提供極有價(jià)值的參考。關(guān)鍵詞情感性詞匯；二語(yǔ)；情感判斷；記憶；喚醒度

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌病毒抗原表達(dá)與相關(guān)因素實(shí)驗(yàn)研究姓名史光軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師陳孝平20060401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博十畢業(yè)論文基因水平來(lái)認(rèn)識(shí)，似乎可認(rèn)為肝纖維化是一種繼發(fā)性基因調(diào)控失衡肝病。IⅡ型前膠原作為M型膠原的前體主要在活化的肝星狀細(xì)胞內(nèi)被合成和釋放，在細(xì)胞外其N(xiāo)端與C端肽同時(shí)被肽內(nèi)切酶剪切下來(lái)，被降解的N端肽即為PⅡINP。由于PIILNP和IIL型膠原以等摩爾形成并進(jìn)入血循環(huán)，故血清PIIINP水平可反映III型膠原的合成情況，且與病理改變有較好的平行。HA主要有肝內(nèi)皮細(xì)胞攝取分解，少量小分子由腎小球?yàn)V過(guò)。血清HA升高主要是由于肝臟內(nèi)皮細(xì)胞攝取與降解HA的功能下降，當(dāng)肝纖維化或肝硬變是造成肝損害，間接地影響內(nèi)皮細(xì)胞功能所致。Ⅳ一C是基膜網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的主要組成部分，在細(xì)胞內(nèi)合成后直接以前膠原形式參與細(xì)胞外間質(zhì)的構(gòu)成。血清ⅣC被認(rèn)為反映膠原的合成，與纖維化程度成正相關(guān)?？梢宰鳛闄z查肝纖維化的進(jìn)展指標(biāo)。LN是細(xì)胞外間質(zhì)中的一種非膠原性結(jié)構(gòu)糖蛋白，是基底膜的一種主要成分。LN水平能反映肝臟的損害和肝組織病變的活動(dòng)進(jìn)程。對(duì)預(yù)示肝纖維化的發(fā)生和肝硬化的診斷具有重要價(jià)值。人體的免疫狀態(tài)和腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系，在抗腫瘤的免疫反應(yīng)中，淋巴細(xì)胞具有極其重要的作用。T淋巴細(xì)胞由2個(gè)主要亞群組成，即CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞，前者稱(chēng)輔助性或誘導(dǎo)性T淋巴細(xì)胞，具有輔助和誘導(dǎo)靜止細(xì)胞活化功能，對(duì)防御腫瘤有重要意義；后者稱(chēng)為抑制性或細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，具有負(fù)調(diào)節(jié)效應(yīng)，能抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體。CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞之間相互作用和制約對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)和維持免疫平衡有重要作用。當(dāng)機(jī)體CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞發(fā)生變化時(shí)，可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂，從而削弱了機(jī)體抗腫瘤的能力。NK是一種非特異性免疫活性細(xì)胞，無(wú)需抗原的事先致敏，具有非抗體依賴(lài)性溶細(xì)胞毒性，也是構(gòu)成細(xì)胞免疫系統(tǒng)的主要成分。對(duì)肝癌患者進(jìn)行T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞活性的測(cè)定，可基本反映機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，對(duì)于判斷預(yù)后具有重要參考價(jià)值。甲胎蛋白AFP是肝癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中表達(dá)的蛋白質(zhì)，被認(rèn)為是標(biāo)志性蛋白而用于肝癌的早期診斷。原發(fā)性肝癌與HBV、HCV感染的相關(guān)性已得到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的一致認(rèn)同，且己證實(shí)HBV、HCV與原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。目前國(guó)內(nèi)外的研究多局限于肝癌組織和血清學(xué)各自的病毒表達(dá)，而對(duì)肝癌組織本身HBV、HCV感染背景及其與肝組織活動(dòng)指數(shù)、肝組織纖維化分期、血清肝纖維化標(biāo)志物等臨床及2

簡(jiǎn)介：背景血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTOTVEGF也稱(chēng)血管調(diào)理素VUTOTROPIN和血管通透因子VULARPERMEALILITYFACTVPF是FERRARA等在1989年從牛垂體濾泡星狀細(xì)胞的條件培養(yǎng)基中純化出來(lái)的一種具有肝素結(jié)合活性的生長(zhǎng)因子是在胚胎發(fā)生和創(chuàng)傷愈合過(guò)程中啟動(dòng)血管形成的一個(gè)高度特異性的有絲分裂原能特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖1加速新生血管形成并增加血管通透性2。促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞間質(zhì)的膠原酶表達(dá)促進(jìn)血漿纖維蛋白原的外滲導(dǎo)致纖維蛋白原的沉積。VEGF已應(yīng)用于治療缺血性疾病如修改人體神經(jīng)干細(xì)胞基因充分表達(dá)VEGF治療大腦內(nèi)出血中風(fēng)3并且移植脂肪源性干細(xì)胞促進(jìn)VEGF合成促進(jìn)腦缺血疾病的血管再通4。VEGF在臨床的應(yīng)用有著更廣闊的前景。目的1構(gòu)建攜帶VEGF基因ADEASY復(fù)制缺陷型重組腺病毒載體系統(tǒng)。2大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)。3觀察RADVEGF轉(zhuǎn)染大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞BMSCS后VEGF的表達(dá)情況。方法1從PCR21VEGF質(zhì)粒中克隆出VEGFA基因的編碼序列。2VEGFA基因插入腺病毒系統(tǒng)的穿梭載體PADTRACKCMV中。3在含有腺病毒骨架載體PADEASY1的大腸桿菌BJ5183中進(jìn)行同源重組獲得重組子PADEASY1VEGF。4鑒定PADEASY1VEGF將PADEASY1VEGF轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞AD293A細(xì)胞獲得含VEGF基因的重組腺病毒RADVEGF熒光顯微鏡觀測(cè)綠色熒光蛋白GFP的表達(dá)。5反復(fù)感染HEK293A細(xì)胞擴(kuò)增腺病毒50％組織培養(yǎng)感染量法TCID50檢測(cè)病毒滴度。6體外培養(yǎng)大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞。7RADVEGF轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)染后在熒光顯微鏡下觀察并采用ELISA法檢測(cè)VEGF的表達(dá)水平。結(jié)果1經(jīng)酶切鑒定基因測(cè)序及綠色熒光觀察證實(shí)成功構(gòu)建出含有VEGF基因的腺病毒載體RADVEGF。2擴(kuò)增得到1010PFU／ML高滴度重組腺病毒。3RADVEGFA轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞后ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染組上清液中VEGF蛋白分泌量明顯高于對(duì)照組P結(jié)論成功構(gòu)建含有VEGF基因的腺病毒載體RADVEGFRADVEGF轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞能夠表達(dá)并分泌VEGF為缺血性腦血管疾病的基因治療提供基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：目的了解公共場(chǎng)所從業(yè)人員吸煙行為的現(xiàn)狀，探討對(duì)這類(lèi)人群控?zé)煾深A(yù)的方法。通過(guò)對(duì)公共場(chǎng)所經(jīng)營(yíng)者進(jìn)行健康教育，提高他們控?zé)熤R(shí)水平和參與控?zé)熞庾R(shí)，便于室內(nèi)公共場(chǎng)所將全面禁煙工作的開(kāi)展。方法采取分層隨機(jī)抽樣方法，獲得河西區(qū)250家室內(nèi)公共場(chǎng)所，對(duì)其從業(yè)人員進(jìn)行單純隨機(jī)抽樣進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。問(wèn)卷包括一般情況問(wèn)卷、吸煙情況調(diào)查、家庭關(guān)懷度指數(shù)調(diào)查表、壓力知覺(jué)量表、尼古丁依賴(lài)量表、抑郁自評(píng)量表等6個(gè)量表。對(duì)經(jīng)營(yíng)者進(jìn)行健康教育，使用省級(jí)人群二手煙暴露水平調(diào)查表對(duì)經(jīng)營(yíng)者進(jìn)行培訓(xùn)前后各1次問(wèn)卷調(diào)查，并對(duì)前后吸煙危害知曉率和態(tài)度等變化進(jìn)行比較。結(jié)果調(diào)查總?cè)藬?shù)為1209人，吸煙人數(shù)為369人，現(xiàn)在吸煙率為305％，其中男性現(xiàn)在吸煙率為504％，女性現(xiàn)在吸煙率為33％；戒煙率為26％，其中男性戒煙率17％，女性戒煙率190％。吸煙者有戒煙意愿者占187％，其中182％男性吸煙者有戒煙意愿，294％女性吸煙者有戒煙意愿。吸煙者與非吸煙者在性別、學(xué)歷、在工作場(chǎng)所是否有人吸煙和家里是否有人吸煙、壓力知覺(jué)總得分、抑郁自評(píng)得分、家庭功能評(píng)級(jí)、對(duì)“公共場(chǎng)所禁止吸煙的規(guī)定”態(tài)度和對(duì)“開(kāi)展吸煙與健康的宣傳教育活動(dòng)”態(tài)度問(wèn)題的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。有無(wú)戒煙意愿的吸煙者在平均開(kāi)始吸煙年齡、連續(xù)吸煙年數(shù)、目吸煙數(shù)量、尼古丁依賴(lài)程度、在是否擔(dān)心吸煙影響生活質(zhì)量、影響健康、是否認(rèn)為吸煙與社交有關(guān)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005，公共場(chǎng)所經(jīng)營(yíng)者對(duì)吸煙危害一般常識(shí)有一定了解，對(duì)二手煙的認(rèn)知度較高，通過(guò)3周的控?zé)煾深A(yù)，比較干預(yù)前后，對(duì)低焦油含量卷煙的危害比一般卷煙小的錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)等問(wèn)題上知曉率有明顯的提高P005。但通過(guò)對(duì)公共場(chǎng)所控?zé)熤贫鹊慕⒑徒麩煒?biāo)示的張貼等問(wèn)題的調(diào)查，近376％的單位未建立有效的禁煙制度，禁煙標(biāo)示張貼率為872％，但對(duì)于吸煙者在公共場(chǎng)所吸煙的行為，僅544％的單位稱(chēng)會(huì)上前勸阻。結(jié)論公共場(chǎng)所從業(yè)人員吸煙現(xiàn)況不容樂(lè)觀，應(yīng)重視這類(lèi)人群，對(duì)公共場(chǎng)所經(jīng)營(yíng)者進(jìn)行控?zé)熃】到逃幸欢ǜ深A(yù)效果。

簡(jiǎn)介：汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文I碩士學(xué)位論文姓名封金花學(xué)號(hào)10920122所在學(xué)院汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院導(dǎo)師姓名林廣裕教授專(zhuān)業(yè)兒科學(xué)入學(xué)日期2009年9月答辯日期2012年5月題目英文英文題目題目DETECTIONCLINICALACTERIZATIONOFHUMANRHINOVIRUSINHOSPITALIZEDCHILDRENWITHACUTERESPIRATYTRACTINFECTIONINYUEDONGAREA粵東地區(qū)住院兒童急性呼吸道感染中鼻病毒的檢出及臨床特征研究汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文III摘要目的了解20082010年粵東地區(qū)急性呼吸道感染住院兒童人鼻病毒（HRV）的檢出情況、流行規(guī)律和感染患兒的臨床特點(diǎn)。材料與方法材料收集2008年10月至2010年9月廣東省汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院兒科急性呼吸道感染1335例住院兒童咽拭子進(jìn)行病毒學(xué)檢測(cè)，并記錄其年齡、性別、癥狀、體征等臨床資料以供分析研究。方法1應(yīng)用PCR或RTPCR技術(shù)進(jìn)行HRV、呼吸道合胞病毒RSV和其它8種呼吸道常見(jiàn)病毒（流感病毒A，B型、副流感病毒1，3型、人偏肺病毒、人博卡病毒、腺病毒和WU多瘤病毒）篩查。2對(duì)HRV陽(yáng)性病例的臨床資料進(jìn)行分析，并與RSV陽(yáng)性病例的臨床資料進(jìn)行分析比較。結(jié)果1、1335例呼吸道感染住院患兒的咽拭子標(biāo)本中檢測(cè)出HRV陽(yáng)性124例（93）。陽(yáng)性率最高的是IVA335例（251），其余的依次遞減RSV202例（151），HBOV110例（82），PIV385例（64），PIV160例（45），WUPYV46例（34），ADV44例（33），HMPV43例（32），IVB19例（14）。2、HRV流行的季節(jié)各年并不相同，2009年檢出高峰夏季，2010年在秋季。24個(gè)月，60月，84月，47例（35），≥84月，各年齡組均易感染HRV。3、單純HRV感染和混合其它病毒感染的患兒臨床癥狀、體征、胸片、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)體外培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞，建立柯薩奇病毒體外感染心肌細(xì)胞模型，探討益心康對(duì)感染CVB3病毒心肌細(xì)胞的保護(hù)及對(duì)病毒的抑制作用，為該藥的進(jìn)一步研究及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法1、心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)體外原代培養(yǎng)3天的SD大鼠心肌細(xì)胞。2、HELA細(xì)胞的培養(yǎng)。3、制備病毒擴(kuò)增CVB3病毒的毒力，測(cè)定CVB3病毒的毒力TCID50。4、制備益心康提取物。5、測(cè)定益心康提取物及利巴韋林注射液對(duì)心肌細(xì)胞的最大無(wú)毒劑量TCID0。6、藥物的干預(yù)取單層生長(zhǎng)狀態(tài)良好的乳鼠心肌細(xì)胞，分成4組①細(xì)胞對(duì)照組②病毒對(duì)照組③益心康組④利巴韋林組。培養(yǎng)24H、48H在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變CPE，待病毒對(duì)照組CPE出現(xiàn)100％（）時(shí)，停止培養(yǎng)。7、療效指標(biāo)的檢測(cè)1倒置顯微鏡下觀察各組24小時(shí)、48小時(shí)心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化及CPE情況。2MTT法測(cè)定48小時(shí)各組心肌細(xì)胞存活率。3ELISA法測(cè)定48小時(shí)各組CKMB及CTNI，比較益心康及利巴韋林對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。4RTPCR法測(cè)定各組柯薩奇病毒MRNA的含量，比較益心康及利巴韋林對(duì)柯薩奇病毒復(fù)制的抑制作用。8、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS160統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)處理用X±SD表示，各組均數(shù)比較采用方差分析及兩兩比較，兩組間比較用T檢驗(yàn)，P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、形態(tài)學(xué)觀察觀察各組心肌細(xì)胞24小時(shí)、48小時(shí)的形態(tài)學(xué)變化和細(xì)胞病變CPE。正常對(duì)照組24小時(shí)、48小時(shí)心肌細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，向周?chē)斐龇派錉钔黄?，心肌?xì)胞呈同步搏動(dòng)，節(jié)律規(guī)整，搏動(dòng)有力，6080次MIN；病毒對(duì)照組心肌細(xì)胞，在接種病毒24小時(shí)后，細(xì)胞仍搏動(dòng)但速度較慢，節(jié)律欠規(guī)整，開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞病變。接種病毒48小時(shí)后，可見(jiàn)細(xì)胞團(tuán)縮、破碎等細(xì)胞病變，基本停止搏動(dòng)；益心康組、利巴韋林組與病毒對(duì)照組比較，病變明顯減輕，益心康組細(xì)胞病變輕于利巴韋林組。2、用MTT法測(cè)定各組細(xì)胞存活率結(jié)果顯示正常組、益心康組、利巴韋林組細(xì)胞存活率均明顯高于病毒對(duì)照組；益心康組細(xì)胞存活率高于利巴韋林組。3、ELISA法測(cè)定各組CKMB及CTNI的結(jié)果顯示正常細(xì)胞組、益心康組、利巴韋林組細(xì)胞上清液CKMB、CTNI均明顯低于病毒對(duì)照組，益心康組CKMB、CTNI低于利巴韋林組。4、應(yīng)用RTPCR法測(cè)定各組心肌細(xì)胞MRNA的含量顯示正常細(xì)胞組未檢測(cè)到CVB3病毒，而益心康組和利巴韋林組在感染CVB3病毒48小時(shí)后CVB3病毒含量均低于病毒對(duì)照組；病毒對(duì)照組與益心康組和利巴韋林組比較，有顯著性差異，益心康組心肌細(xì)胞病毒含量略低于利巴韋林組，益心康和利巴韋林比較無(wú)顯著性差異。結(jié)論1、益心康具有保護(hù)心肌細(xì)胞，減輕心肌細(xì)胞病變的作用。2、益心康具有提高心肌細(xì)胞存活率的作用，并且該作用優(yōu)于利巴韋林。3、益心康能降低心肌細(xì)胞CKMB、CTNI的表達(dá)，具有減輕心肌損傷的作用，并且該作用優(yōu)于利巴韋林。4、益心康能降低CVB3病毒NRNA的表達(dá)，具有抑制CVB3病毒復(fù)制的作用，該作用與利巴韋林相當(dāng)。