去細胞異種肌腱復合IGF-Ⅰ修復肌腱缺損的實驗研究.pdf

1、目的：通過動物實驗，探索用化學去細胞異種肌腱復合胰島素樣生長因子I(IGF-Ⅰ)修復肌腱缺損的可行性提供理論依據(jù)，為化學去細胞異種肌腱作為肌腱組織工程的細胞生長支架提供實驗依據(jù)。方法：切取月齡(6個月)相同Leghorn雞屈趾肌腱經(jīng)化學去細胞處理后作為異種肌腱移植供體，去細胞前后行生物力學、組織學光鏡電鏡觀察；健康成熟日本大耳白兔54只，建立雙后肢跟腱中間束2cm缺損模型，隨機分為3組，每組18只。實驗組為去細胞異種肌腱復合IGF-Ⅰ移

2、植組(A組)、對照組Ⅰ為自體肌腱移植組(B組)、對照組Ⅱ為單純去細胞異種肌腱移植組(C組)。肌腱移植縫合用4-0無創(chuàng)傷肌腱縫合線行雙“8”字縫合，兩邊各加強一針，術后伸直位管型石膏固定2周，每日A組左右交替臀肌注射濃度為300ng/ml的IGF-Ⅰ一次，每次1ml，連續(xù)兩周，B、C兩組以同樣方式注射等量的生理鹽水。術前3天10只兔及術后第3、7、14天每組10只兔取耳緣靜脈血行血常規(guī)檢測；2、4、9周每組取6只兔對標本行大體觀察、生物力

3、學測定、組織學光鏡、電鏡觀察及圖像分析。結果：1.去細胞前后生物力學比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，去細胞后的最大抗拉力是去細胞前的83.44％，去細胞前可見細胞與膠原纖維交替緊密排列，去細胞后膠原排列相對松散，且無細胞及細胞碎片。2.在相同時期內，A、B、C三組血常規(guī)白細胞數(shù)兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.肌腱移植后總體上經(jīng)歷了細胞長入、膠原纖維再生、替代和再塑形的過程；早期成纖維細胞增生活躍，胞體和胞核較大，形態(tài)

4、呈圓形或橢圓形，膠原合成增加，膠原纖維早期以纖細纖維為主，且排列較紊亂，以后成纖維細胞逐漸分化為成熟的腱細胞，數(shù)量逐漸減少，細胞形態(tài)演變?yōu)殚L梭形；隨時間延長，粗細不等的膠原纖維經(jīng)改造塑形變?yōu)榇旨毾嗟鹊妮^粗大纖維，排列方向趨向平行，在結構和功能上逐漸達到正常腱水平。從細胞分化速度來看，A、B兩組細胞增值、分化及成熟較C組快，尤以A組更甚。4.術后相同時間內三組膠原纖維含量兩兩比較，A、B組與C組之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，A組與

5、B組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5.術后相同時間內三組生物力學兩兩比較，A組與B組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，A、B組與C組之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，術后2周時肌腱最大抗拉力最差，9周時A、B兩組最大抗拉力接近正常水平。結論：1.化學去細胞肌腱可明顯降低其免疫原性，移植后無明顯的免疫排斥反應發(fā)生，其力學強度亦能滿足肌腱移植的需要。2.化學去細胞異種肌腱復合IGI—Ⅰ修復肌腱缺損的效果優(yōu)于單純化學去細胞異種肌腱