簡介：點(diǎn)擊查看更多反義核酸基因重組體的構(gòu)建及抗乙型肝炎病毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的探討乙型肝炎病毒HBVC基因翻譯起始區(qū)和C基因區(qū)反義寡聚脫氧核苷酸對HBV表達(dá)的序列性抑制作用方法以乙型肝炎病毒基因組HBVDNA轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞系HEPG而建立起來的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系2215作為實(shí)驗(yàn)對象設(shè)計(jì)了一系列互補(bǔ)于HBVMRNA編碼核心蛋白基因區(qū)C區(qū)15聚反義硫代寡聚核苷酸ASON通過脂質(zhì)體介導(dǎo)將這些合成的外源基因?qū)?215細(xì)胞中用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測作用細(xì)胞培養(yǎng)上清液中乙型肝炎病毒E抗原HBEAG和乙型肝炎病毒表面抗原HBSAG含量提取細(xì)胞中的HBVDNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后用SOUTHERNBLOTTING方法對PCR產(chǎn)物進(jìn)行半定量分析結(jié)論反義硫代寡核苷酸能夠在細(xì)胞水平有效地抑制乙型肝炎病毒基因的表達(dá)

簡介：農(nóng)民和農(nóng)業(yè)問題一直是我國政府重點(diǎn)關(guān)注的問題，為了使農(nóng)業(yè)能夠得到規(guī)模經(jīng)營和得到高效率的生產(chǎn)，農(nóng)村相對過剩的人口需要從農(nóng)村轉(zhuǎn)移到城市。農(nóng)村相對過剩的人口包括進(jìn)城的農(nóng)民工和留在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域的農(nóng)民、兼業(yè)農(nóng)民等。在需要轉(zhuǎn)移的人中，有一部分由于農(nóng)村的推力和城市的拉力共同作用成為了中國特有的農(nóng)民工群體，他們在城市的經(jīng)濟(jì)狀況比在農(nóng)村更好，且他們的留城意愿也較高。對此，自2010年起，我國將“加快農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)移人口的城鎮(zhèn)落戶”寫進(jìn)中央一號文件，鼓勵(lì)農(nóng)民工市民化，并從解決養(yǎng)老保險(xiǎn)、戶口問題等多角度促進(jìn)相對過剩的人口進(jìn)城、留城。與此同時(shí)，鼓勵(lì)農(nóng)民工市民化的政策也影響著在農(nóng)村務(wù)農(nóng)的農(nóng)民對于城市的態(tài)度。因此，在研究農(nóng)民工留城意愿的基礎(chǔ)上同時(shí)研究農(nóng)村的農(nóng)民留城意愿將具有一定的意義。而由于成長的社會環(huán)境和背景的差異，新生代農(nóng)民和第一代農(nóng)民在生活方式、思想觀念和留城意愿及影響因素等方面具有差異，研究代際農(nóng)民留城意愿及影響因素，對于我國政府更好的制定針對性強(qiáng)、效率高的城鎮(zhèn)化政策具有實(shí)際意義。本文首先對第一代和新生代農(nóng)民的留城意愿分別與個(gè)人特征、家庭特征、社會資本特征、心理認(rèn)知、政策評價(jià)進(jìn)行交叉分析，發(fā)現(xiàn)不同特征的新老一代農(nóng)民留城意愿各異且新生代和第一代農(nóng)民留城意愿均較高。然后將第一代和新生代農(nóng)民留城意愿影響因素進(jìn)行篩選，通過顯著性檢驗(yàn)的自變量納入各自的模型進(jìn)行多元有序LOGIT回歸分析，結(jié)果顯示，對新生代農(nóng)民留城意愿影響顯著的變量有年齡、耕地?cái)?shù)、村以外干部（親朋擔(dān)任）情況、住房、小孩上學(xué)5個(gè)變量；顯著影響第一代農(nóng)民留城意愿的變量有年齡、本省縣外打工人數(shù)、村以外干部（家里擔(dān)任）情況、村以外干部（親朋擔(dān)任）情況、小孩上學(xué)、外出就業(yè)扶持政策。最后結(jié)合代際農(nóng)民的留城意愿和影響因素情況提出了加快城鎮(zhèn)化進(jìn)程和促進(jìn)農(nóng)民市民化的相關(guān)建議和政策啟示。

簡介：背景流行性乙型腦炎JAPANESEENCEPHALITIS，JE是通過蚊蟲叮咬感染乙腦病毒JAPANESEENCEPHALITISVIRUS，JEV引起的人獸共患傳染病，表現(xiàn)為急性神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀，該病主要威脅兒童。JE病死率達(dá)到30％～40％，存活者40％留有神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，對人類健康造成極大的威脅。全世界約有30億人生活在JE流行區(qū)，目前JE主要流行于亞洲大部分地區(qū)，我國是JE高流行區(qū)。1993～2009年我國在長江流域三峽地區(qū)修建水庫，按大壩正常蓄水位175M，淹沒重慶和湖北省的19個(gè)縣市（區(qū)），造成涉及人口約1590萬人、總面積為56萬平方公里的三峽庫區(qū)。水庫蓄水前這一地區(qū)是JE的高流行區(qū)，并存在騷擾阿蚊、中華按蚊、三帶喙庫蚊等多種JE的傳播媒介。三峽建壩蓄水后，庫區(qū)境內(nèi)河流將改變天然急流的自然特征，水體流速減緩，自凈能力降低，加上消落區(qū)污染物滯留累積，容易為蚊蟲的孳生繁殖帶來適宜的環(huán)境。三峽庫區(qū)生態(tài)環(huán)境發(fā)生巨大的變化后，自然界JE的主要傳播媒介蚊蟲、JE中間宿主豬，以及人群的JEV感染狀況急需重新評估，以了解水庫環(huán)境變化對JE流行的潛在及中長期影響。目的通過對三峽庫區(qū)采集的蚊蟲、仔豬血清和正常人血清標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室檢測，了解蚊蟲JEV感染率和JE中間宿主豬的JEV感染狀況，并掌握正常人群JEV中和抗體水平，為三峽庫區(qū)JE的預(yù)防控制提供病原學(xué)依據(jù)和本底資料。方法2008～2009年夏天在三峽庫區(qū)采集蚊蟲、仔豬血清和正常人血清標(biāo)本，標(biāo)本液氮保存運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。蚊蟲標(biāo)本研磨后制備CDNA文庫，采用半巢式PCR法檢測JEV基因，使用POOLEDINFRATEMANUAL軟件計(jì)算蚊蟲JEV感染率；同時(shí)將蚊蟲研磨液接種于組織細(xì)胞培養(yǎng)，陽性分離物使用血清學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行鑒定。對新分離JEV的特異性基因片段擴(kuò)增測序后，使用CLUSTA1X183、MEGALIGN、MEGA4和GENEDOC32等生物學(xué)軟件進(jìn)行核苷酸和氨基酸序列分析及系統(tǒng)進(jìn)化分析。仔豬血清標(biāo)本分別采用ELISA法和IFA法檢測IGG抗體和IGM抗體。正常人血清標(biāo)本采用蝕斑減少中和實(shí)驗(yàn)法檢測JEV中和抗體。結(jié)果1本研究于2008～2009年連續(xù)兩年分別在三峽庫區(qū)三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)采集蚊蟲標(biāo)本，三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)自北向南依次為湖北省秭歸縣、重慶市萬州區(qū)和渝北區(qū)。兩年共采集到14183只蚊蟲標(biāo)本，分裝為286批，蚊種包括3屬4種，為三帶喙庫蚊、致倦庫蚊、騷擾阿蚊和中華按蚊。三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)兩年所采集的蚊蟲種類和數(shù)量基本相同，但各地優(yōu)勢蚊種存在差異，湖北省秭歸縣以騷擾阿蚊為優(yōu)勢蚊種，占當(dāng)?shù)厮杉瘶?biāo)本的8634％39324554，重慶市萬州區(qū)和渝北區(qū)則以三帶喙庫蚊為優(yōu)勢蚊種，分別占當(dāng)?shù)厮杉瘶?biāo)本的5735％28594985和7677％35654644。三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)均采集到三帶喙庫蚊，但自北向南分布存在遞增趨勢，湖北省秭歸縣、重慶市萬州區(qū)和渝北區(qū)三帶喙庫蚊的構(gòu)成比分別為1091％4974554、5735％28594985和7677％35654644。22008年采集的123批蚊蟲標(biāo)本中檢出JEV核酸陽性23份，2009年采集的163批蚊蟲標(biāo)本中檢出JEV核酸陽性26份。從JEV核酸檢測陽性的蚊蟲分析可以看出三帶喙庫蚊的JEV感染率最高，也最為普遍。兩年每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)采集的三帶喙庫蚊均有JEV感染，并且自北向南呈現(xiàn)遞減趨勢，2008年和2009年其感染率分別為3923和3171000只蚊（秭歸），1058和3601000只蚊（萬州），417和3661000只蚊（渝北）。致倦庫蚊僅2009年在重慶市萬州區(qū)和渝北區(qū)采集到少量，其感染率分別是1609和01000只蚊。中華按蚊JEV感染率也較高，但僅從2009年在湖北省秭歸縣和重慶市萬州區(qū)采集的中華按蚊中檢測到JEV，其感染率為1632和8221000只蚊。騷擾阿蚊的JEV感染率最低，2008年僅在重慶市萬州區(qū)采集的騷擾阿蚊中檢測到JEV，其感染率為1081000只蚊，2009年重慶市萬州區(qū)和湖北省秭歸縣采集的騷擾阿蚊JEV感染率為279和1351000只蚊。由此可見，四種蚊蟲均有不同程度的JEV感染，其中三帶喙庫蚊JEV感染率最高，騷擾阿蚊最低。3通過組織細(xì)胞培養(yǎng)法對2008～2009年采集的蚊蟲標(biāo)本進(jìn)行病毒分離，結(jié)果從286批蚊蟲研磨上清中分離到22株病毒陽性分離物。血清學(xué)和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果顯示，16株分離物為JEV，其中一株同時(shí)存在JEV和蓋塔病毒GETAHVIRUS，GETV，另外6株為GETV?；贓基因核苷酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示，三峽庫區(qū)分離的16株JEV均屬于基因I型，大部分分離株與2004年四川省蚊蟲標(biāo)本的JEV分離株進(jìn)化關(guān)系較近。16株JEV與JE減毒活疫苗SA14142株在E基因區(qū)段存在14處共同的氨基酸差異位點(diǎn)，但決定抗原性和毒力的重要位點(diǎn)未發(fā)生變化。新分離7株GETV的3UTR基因區(qū)段全長均為401NT，均存在GETV特有的長約53NT的3個(gè)重復(fù)序列元件和19NT的保守序列，第45～54NT間都存在與我國其它省分離株及蒙古和俄羅斯分離株一致的10NT缺失。4為了解三峽庫區(qū)豬感染JEV的狀況，2008～2009年5月21日～6月14日在三峽庫區(qū)共采集216份仔豬血清標(biāo)本。血清學(xué)檢測結(jié)果顯示，兩年仔豬血清標(biāo)本JEVIGG抗體陽性率分別是4876％59121和8947％8595，IGM抗體陽性率分別是4628％56121和3895％3795，提示三峽庫區(qū)仔豬JEVIGG抗體50％轉(zhuǎn)陽時(shí)間大約在5～6月。結(jié)合標(biāo)本采集時(shí)間和抗體檢測結(jié)果估算IGG抗體50％轉(zhuǎn)陽時(shí)間顯示，2009年重慶市萬州區(qū)、涪陵區(qū)和渝北區(qū)自北向南存在遞早趨勢，分別是6月9日士5日、5月23日±5日和5月16日±5日。2008年的結(jié)果此趨勢不明顯，重慶市萬州區(qū)IGG抗體50％轉(zhuǎn)陽時(shí)間比較早，可能原因?yàn)樵摫O(jiān)測點(diǎn)的仔豬飼養(yǎng)模式為豬場圈養(yǎng)，其他均為散戶散養(yǎng)，圈養(yǎng)豬的抗體陽性率高于散養(yǎng)豬（X243797，P＜005）。5連續(xù)兩年在三峽庫區(qū)三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)采集正常人血清標(biāo)本，共采集1222份。湖北省興山縣、重慶市萬州區(qū)和渝北區(qū)分別采集了533份、496份和193份。2008～2009年連續(xù)兩年調(diào)查結(jié)果顯示，三峽庫區(qū)正常人血清JEV中和抗體總陽性率為7136％8721222，湖北省秭歸縣為5704％304533、重慶市萬州區(qū)為8105％402496、渝北區(qū)為8601％166193。三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)自北向南JEV中和抗體陽性率呈現(xiàn)遞增趨勢，其差別部分與標(biāo)本的年齡分布有關(guān)。按年齡分組分析結(jié)果顯示，湖北省興山縣2008年標(biāo)本為大于30歲的成人，其抗體陽性率為9118％93102，2009年標(biāo)本為小于16歲的兒童，其抗體陽性率為4891％211431重慶市萬州區(qū)兩年抗體陽性率基本相同，分別為7917％190240和8281％212256，大于10歲的人群兩年抗體陽性率均高于90％，小于10歲的兒童兩年抗體陽性率分別是4889％4490和5340％4788，并且隨年齡的增長呈現(xiàn)增高趨勢，2008年0、1、5三個(gè)年齡組的抗體陽性率分別是3667％1130、4667％1430和6333％1930，2009年結(jié)果為0％022、6563％2132和7647％2634，趨勢基本一致；重慶市渝北區(qū)兩年均以大年齡組人群為主，其抗體陽性率分別是75％7296和9691％9497，檢測結(jié)果基本相似。由此可見，三峽庫區(qū)兒童的JEV抗體水平低，是重點(diǎn)關(guān)注人群。結(jié)論本研究首次在三峽庫區(qū)比較系統(tǒng)而全面地進(jìn)行了JEV傳播媒介蚊蟲，病毒擴(kuò)散的中間宿主豬，以及人群的JEV感染狀況調(diào)查。三個(gè)監(jiān)測點(diǎn)在三峽大壩自北向南依次間隔200公里，基本代表三峽庫區(qū)的地理范圍。該地區(qū)三帶喙庫蚊感染JEV最高最普遍，其次為中華按蚊，值得特別關(guān)注。該地目前JEV流行株為基因I型，與SA14142疫苗株存在一定的氨基酸差異位點(diǎn)，但決定抗原性和毒力的重要位點(diǎn)未發(fā)生變化，理論上目前廣泛使用的疫苗株能有效預(yù)防該病毒引起的感染。當(dāng)?shù)刈胸i自然感染JEV時(shí)間早，仔豬JEVIGG抗體50％轉(zhuǎn)陽時(shí)間大約在5～6月，發(fā)現(xiàn)圈養(yǎng)豬抗體陽性率高于散養(yǎng)豬，有待繼續(xù)監(jiān)測和評估。三峽庫區(qū)大年齡組人群JEV中和抗體水平高，可能與多次JEV隱性感染有關(guān)，小于10歲兒童JEV中和抗體水平低，提示當(dāng)?shù)剡m齡兒童的JEV疫苗接種率尚需提高，同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)防蚊滅蚊意識，以降低JE的發(fā)病率。乙型腦炎

簡介：授予單位代碼10459學(xué)號或申請?zhí)柮芗壒_鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目作者姓名學(xué)科門類專業(yè)名稱導(dǎo)師姓名、職稱人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸癌關(guān)系的研究進(jìn)展鄧克紅臨床醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科喬玉環(huán)教授崔金全教授二零零五年五月十五日鄭州大學(xué)2005屆碩士學(xué)位論文人乳頭狀瘤病毒感染與富頸癌關(guān)系的研究進(jìn)展陰道下部的外生性濕疣類病變，扁平濕疣類病變和低度子宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變CINI高危型HPV如HPVL6，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等，與高度上皮內(nèi)瘤樣病變CIN111和浸潤性宮頸癌有關(guān)。其中HPVL6和HPVL8是宮頸癌中最常見型別，其次是HPV58、HPV52和HPV56。不同種類HPV與宮頸癌的組織學(xué)分型以及臨床分期有關(guān)。HPVL6型多見于宮頸鱗癌，而宮頸腺癌中常以HPVL8型為主。HPVL6或HPVL6與HPVL8的混合型與較低的臨床分期OII期相關(guān)。而HPVL8與較高臨床分期／IIIV期相關(guān)，預(yù)后亦更差?！鳛橐环N常見的性傳播疾病，HPV感染多為暫時(shí)的。約80％的HPV感染呈一時(shí)性，一般在7～12個(gè)月左右病毒即可被清除，在另外的20％HPV感染人群中，約80％患者感染的病毒也能在3年內(nèi)被清除。只有很少一部分患者4％體內(nèi)病毒不能被清除，感染呈持續(xù)性，這將導(dǎo)致CIN持續(xù)存在或進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌。盡管HPV感染是宮頸癌的首要病因，但只有少數(shù)IIPV的婦女發(fā)展為富頸癌，調(diào)查資料顯示還有其他因素協(xié)同致癌，如性活動、機(jī)體的免疫狀態(tài)、多產(chǎn)、長期口服避孕藥、吸煙、營養(yǎng)狀況、社會因素、生殖道其它微生物感染等。HPV的致癌作用與HPVDNA的整合有關(guān)。在良性病變中，HPV基因組常以游離的形式存在，在HPV相關(guān)的惡性腫瘤中，病毒DNA常整合到宿主染色體中。目前認(rèn)為，整合后的DNA發(fā)生致癌作用的主要基因是E6、E7和E2。HPVDNA整合于細(xì)胞基因組后，導(dǎo)致E2基因片段丟失，致E6和／或E7基醫(yī)L瘵達(dá)增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化。E6、E7蛋白分別與抑癌基因P53蛋白和RB蛋白結(jié)合，促使P53、PRB蛋白降解和滅活，促進(jìn)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和癌細(xì)胞的發(fā)生。HPV感染機(jī)體后，防御病毒感染的免疫系統(tǒng)會受到影響，細(xì)胞免疫、體液免疫以及局部免疫反應(yīng)都會發(fā)生多種改變。HPV可逃避機(jī)體的宿主免疫監(jiān)視，尤其是細(xì)胞免疫監(jiān)視HPV早期蛋自調(diào)節(jié)局部免疫反應(yīng)以及宮頸癌產(chǎn)生的細(xì)胞因子所致的免疫抑制和促進(jìn)腫瘤增殖均是免疫逃逸的機(jī)制。HPV相關(guān)疾病與全身的免疫狀況有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)HIV陽性婦女HPV感染、宮頸病變的發(fā)生率明顯增加，而通過抗HIVII

簡介：點(diǎn)擊查看更多器官移植受者巨細(xì)胞病毒分離株糖蛋白基因分型.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點(diǎn)擊查看更多白細(xì)菌介素12在慢性乙型肝炎病毒感染中的免疫調(diào)節(jié)作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的將乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUSHBVX蛋白真核表達(dá)載體PCDNA31HBX轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞觀察X蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)及其對巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子及凋亡的影響為進(jìn)一步研究HBV的致病機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法用PRIMER50軟件分析HBVX基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)PCR擴(kuò)增465BP的目的基因片段將其插入PCDNA31載體通過雙酶切分析及測序鑒定篩選陽性重組體將真核表達(dá)載體PCDNA31HBX通過SUPERFECTTM脂轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞利用WESTERNBLOTTING鑒定X蛋白在巨噬細(xì)胞中的表達(dá)細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后24H用LPS刺激巨噬細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA檢測PCDNA31HBX轉(zhuǎn)染的巨噬細(xì)胞不同時(shí)間12H、24H、48H培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子TNFΑ、IL1Β的含量統(tǒng)計(jì)軟件SPSS130分析所得數(shù)據(jù)通過形態(tài)學(xué)方法觀察巨噬細(xì)胞利用顯微計(jì)數(shù)法測定X蛋白即時(shí)高表達(dá)時(shí)地塞米松誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡并計(jì)算凋亡率用統(tǒng)計(jì)軟件通過方差分析所得數(shù)據(jù)。結(jié)果1將PCR擴(kuò)增的465BP大小的HBVX基因片段連接入PCDNA31雙酶切及測序結(jié)果表明X基因亞克隆入PCDNA31真核表達(dá)載體即得X蛋白真核表達(dá)載體PCDNA31HBX。2將真核表達(dá)載體PCDNA31HBX轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞WESTERNBLOTTING結(jié)果顯示PCDNA31HBX能在巨噬細(xì)胞中表達(dá)約17KD的目的蛋白。3ELISA法測定細(xì)胞上清液中TNFΑ、IL1Β的含量LPS刺激組及PCDNA31組與空白對照組有顯著性差異P005即LPS可活化巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子且X蛋白即時(shí)高表達(dá)可引起LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞分泌TNFΑ、IL1Β明顯增加。4地塞米松誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡所得數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析地塞米松刺激組及PCDNA31組與空白對照組有顯著性差異P005即地塞米松能高效誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡且X蛋白即時(shí)高表達(dá)導(dǎo)致地塞米松誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡率明顯降低。結(jié)論1成功構(gòu)建了HBVX基因的真核表達(dá)載體PCDNA31HBX并能在巨噬細(xì)胞中表達(dá)HBVX蛋白。2X蛋白即時(shí)高表達(dá)上調(diào)LPS刺激的巨噬細(xì)胞分泌TNFΑ、IL1Β。3X蛋白即時(shí)高表達(dá)抑制地塞米松誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡。

簡介：汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文1目錄目錄CONTENTSCONTENTS中文摘要中文摘要（CHINESEABSTRACTCHINESEABSTRACT）1英文摘要英文摘要ENGLISHABSTRACTENGLISHABSTRACT5前言前言INTRODUCTIONINTRODUCTION9材料和方法材料和方法MATERIALSMETHODSMATERIALSMETHODS1313結(jié)果結(jié)果RESULTSRESULTS2020討論討論DISCUSSIONDISCUSSION2626結(jié)論結(jié)論（CONCLUSIONCONCLUSIONS）3030參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)REFERENCESREFERENCES3131致謝致謝ACKNOWLEDGEMENTACKNOWLEDGEMENT3333綜述綜述REVIEWREVIEW3434已發(fā)表論文已發(fā)表論文PAPERSPAPERS4444本課題受本課題受李嘉誠基金會，李嘉誠基金會，國家自然科學(xué)基金（國家自然科學(xué)基金（NO30571674NO30571674），），廣東省自然科學(xué)基廣東省自然科學(xué)基金（金（NO04020239NO04020239）以及）以及WHOWHO項(xiàng)目項(xiàng)目HQ01144185HQ01144185資助。資助。汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文3斷，早期治療以及流感疫情的監(jiān)測起著十分重要的作用。流感病毒的檢測主要包括血清學(xué)檢測和病原學(xué)檢測兩方面，其中血清學(xué)檢測以血凝（HA）及血凝抑制（HI）為主，為WHO推薦的流感病毒型與亞型鑒定方法；病原學(xué)檢測則以PCR為主，PCR作為日益發(fā)展成熟的體外基因擴(kuò)增技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于流感病毒的基因檢測和分子流行病學(xué)調(diào)查。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用RTPCR以及細(xì)胞培養(yǎng)血凝抑制試驗(yàn)對部分人流感臨床標(biāo)本進(jìn)行分別檢測并將兩者結(jié)果進(jìn)行比較。材料和方法材料和方法從汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科門診采集急性上呼吸道感染兒科患兒的咽拭子標(biāo)本，冰浴送至實(shí)驗(yàn)室，常規(guī)加雙抗（青霉素和鏈霉素），4℃作用至少2H后進(jìn)行接種傳代MDCK細(xì)胞。MDCK細(xì)胞培養(yǎng)瓶長成單層后，每管接種05ML標(biāo)本，每個(gè)標(biāo)本接種2管，置33℃孵育，每天用倒置顯微鏡觀察致細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），當(dāng)出現(xiàn)CPE時(shí)，按常規(guī)血凝試驗(yàn)（HA）檢測細(xì)胞維持液中的紅細(xì)胞凝集活性。將收獲的有紅細(xì)胞凝集活性血凝滴度≥16的維持液與特異性免疫血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，通過血凝抑制試驗(yàn)鑒定病毒亞型（H1、H3或B型），如果H1、H3亞型和B型陰性時(shí)，用H9、H7和H5亞型標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)檢測相應(yīng)亞型病毒株。用QIAGENRNA提取試劑盒提取標(biāo)本流感病毒RNA后，逆轉(zhuǎn)錄合成CDNA，以流感病毒M基因?yàn)槟０暹M(jìn)行PCR反應(yīng)擴(kuò)增，最后用瓊脂糖凝膠電泳檢測目標(biāo)產(chǎn)物。應(yīng)用SPSS115版本對部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析處理。結(jié)果12004年1342份標(biāo)本細(xì)胞培養(yǎng)血凝法檢出陽性標(biāo)本142例，總陽性率為1058％，其中H3亞型121例，B型21例，未分離到H1亞型；未分離到H5、H7和H9亞型禽流感病毒株。全年中4月份和9月份陽性率達(dá)到最高。2嬰兒期、幼兒期、學(xué)齡前期、學(xué)齡期和青春期的流感病毒分離陽性率分別是254％、392％、968％、2552％和3333％，學(xué)齡前期、學(xué)齡期和青春期陽性率比嬰兒期和幼兒期顯著增高P001。3411份標(biāo)本用RT－PCR方法檢出陽性標(biāo)本70份，陽性率1703％；而細(xì)胞培養(yǎng)血凝抑制法檢出陽性標(biāo)本44份，陽性率為1071％。RTPCR檢出陽性率比細(xì)胞培養(yǎng)血凝抑制法檢出陽性率顯著高P001

簡介：研究目的通過回顧性調(diào)查分析，評估本檢測中心澳門公共衛(wèi)生化驗(yàn)所10年來的病毒性肝炎包括甲、乙、丙、丁、戊型肝炎、TCH和HIV等傳染病的血清學(xué)檢測結(jié)果，探討病毒性傳染病在本地區(qū)流行感染情況，為加強(qiáng)對澳門地區(qū)傳染病的防治和優(yōu)生優(yōu)育對策提供科學(xué)理論依據(jù)。研究方法根據(jù)本中心的記錄，將這些檢測結(jié)果分別進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，按年份、年齡、性別、檢驗(yàn)結(jié)果等參數(shù)進(jìn)行分析部分指標(biāo)的檢出率針對職業(yè)進(jìn)行比較。血清學(xué)的檢測方法包括肝炎病毒標(biāo)記物、TCH及HIV抗體采用ELISA方法，梅毒抗體采用RPR、TPHA及FTAABS方法，沙眼衣原體DNA和淋病雙球菌DNA之檢測采用PCR方法其他傳染病的抗體檢測則采用

簡介：該文分析HIV1感染相關(guān)的抗性基因CCR5Δ32、CCR2B64I和SDF13A在中國新疆地區(qū)靜脈吸毒人群中的多態(tài)性CXCR1249、CXCR1280以及MBP52、MBP54、MBP57在中國新疆地區(qū)靜脈吸毒人群和河南性病艾滋病患者中的基因多態(tài)性為評估高危人群對HIV1的易感性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)結(jié)論1測定了CCR5Δ32、CCR2B64I和SDF13A以及CXCR1249、MBP52、MBP54、MBP57五種等位基因在靜脈吸毒人群及性病艾滋病患者中的多態(tài)性2五種等位基因在高危人群中的群體分布均符合HARDYWEINBERG平衡3高危人群中CCR5Δ32等位基因的出現(xiàn)對CCR2B64I的基因頻率有影響4CXCR1249的基因突變與HIV1感染的易感性有關(guān)聯(lián)并可能使病程加速5靜脈吸毒者中CXCR1249基因頻率存在明顯的種族差異維吾爾族高于漢族6高危人群與健康對照之間MBP54基因頻率無顯著性差異7高危人群中SDF13A等位基因的出現(xiàn)對MBP54的基因頻率亦有影響8中國人群中可能存在極低的MBP52、MBP57突變9高危人群中五種等位基因的基因頻率與當(dāng)?shù)卦撁褡褰】等巳旱耐蛔冾l率一致提示高危行為對HIV1相關(guān)的等位基因的基因頻率無影響10上述基因突變對HIV1的感染以及對艾滋病病程的影響還有待于擴(kuò)大檢測例數(shù)并結(jié)合臨床詳細(xì)資料進(jìn)一步闡明

簡介：點(diǎn)擊查看更多丙型肝炎病毒基因亞型、機(jī)體免疫功能與抗病毒療效研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的重組腺病毒RAD是常用的基因治療載體但它缺乏嗜肝性本課題通過改造RAD纖毛結(jié)構(gòu)擬構(gòu)建出具有嗜肝性的RAD載體用于肝病靶向基因治療。方法以目前常用的RAD高表達(dá)載體系統(tǒng)ADEASYSYSTEM為基礎(chǔ)用乙型肝炎病毒HBV衣殼蛋白中具有天然嗜肝性的肽段PRES1的2147位氨基酸的編碼基因PRES1定點(diǎn)克隆至ADEASYSYSTEM中骨架質(zhì)粒PADEASY1的HILOOP編碼基因位點(diǎn)構(gòu)建出重組骨架質(zhì)粒PADEASY1PRES1再用PADEASY1PRES1與穿梭質(zhì)粒PSHUTTLEIRESHRGFP1同源重組成病毒質(zhì)粒PADPRESL經(jīng)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞后包裝生成重組腺病毒基因治療載體RADPRES1。結(jié)果克隆了PRES1基因片段的腺病毒重組子經(jīng)測序顯示基因序列正確；病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞一周后進(jìn)行熒光觀察發(fā)現(xiàn)其表達(dá)出熒光蛋白提示有腺病毒生成；以重組腺病毒基因?yàn)槟０逍蠵CR檢測能提取嗜肝性基因片段PRES1；抽提重組腺病毒蛋白用免疫印跡法能檢測到目標(biāo)蛋白PRES12147的表達(dá)提示有重組腺病毒基因治療載體RADPRES1的生成；用構(gòu)建的RADPRES1感染多種細(xì)胞病毒滴度檢測顯示對肝細(xì)胞具有相對嗜向性。結(jié)論在RAD纖毛球域HILOOP的編碼基因位點(diǎn)插入HBV表面蛋白中嗜肝性片段PRES1的2147位氨基酸的編碼基因PRES1經(jīng)HEK293細(xì)胞包裝生成的重組腺病毒基因治療載體RADPRES1通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示對肝細(xì)胞具有相對嗜向性。

簡介：點(diǎn)擊查看更多丙型肝炎病毒與非霍奇金淋巴瘤關(guān)系的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：KAPOSI氏肉瘤KAPOSISSARCOMAKS相關(guān)皰疹病毒KAPOSISSARCOMAASSOCIATEDHERPESVIRUSKSHV首先發(fā)現(xiàn)于艾滋病患者的KS活組織中隨后被分類歸入GAMMA2皰疹病毒亞科與松鼠猴皰疹病毒HERPESVIRUSSAIMIRIHVS和EPSTEINBARR病毒EPSTEINBARRVIRUSEBV有著密切的親緣關(guān)系皰疹病毒在宿主細(xì)胞中建立潛伏感染特殊化學(xué)試劑能夠在攜帶病毒的體外培養(yǎng)細(xì)胞中誘發(fā)病毒的裂解感染周期KSHVF50基因的產(chǎn)物RTA蛋白在誘發(fā)病毒由潛伏感染進(jìn)入裂解感染周期中扮演著關(guān)鍵的角色與HVS和EBV的F50基因產(chǎn)物類似KSHVRTA蛋白也是一個(gè)強(qiáng)轉(zhuǎn)錄反式激活因子能夠激活多種病毒基因表達(dá)為了解KSHVRTA蛋白調(diào)控基因表達(dá)的機(jī)理我們首先研究了隸屬RTA靶基因之一的KSHVF57基因并在F57啟動子上游區(qū)域鑒定到一段40BP的RTA應(yīng)答元件RTARESPONSIVEELEMENTRRE為了進(jìn)一步調(diào)查RTA通過反式激活轉(zhuǎn)錄來調(diào)節(jié)病毒基因表達(dá)的機(jī)制我們使用RTA激活域的缺失突變型進(jìn)行了酵母雙雜合體篩選實(shí)驗(yàn)