簡介：980938墩墩。呼墨44I216310耕級(jí)壘趕南京師勉犬掌碩士學(xué)位論文園幼兒對意外傷害事故的認(rèn)知研究作者院系；指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)劉蕊教育科學(xué)學(xué)院頗榮芳教授學(xué)前教爵學(xué)中文摘要本研究采用訪談法，從下定義、原因認(rèn)知、后果認(rèn)知和情境認(rèn)知這四個(gè)方面研究了幼兒對于意外傷害事故受傷、觸電、燙傷、中毒、跌落、摔跤、拐騙、走失的認(rèn)知。通過對訪談結(jié)果的整理歸納和統(tǒng)計(jì)分析，分別揭示了幼兒對意外傷害事故認(rèn)知的總體特點(diǎn)、年齡特點(diǎn)、性別特點(diǎn)、園所特點(diǎn)以及對不同意外傷害事故的認(rèn)知差異。通過研究發(fā)現(xiàn)，56％的被試幼兒能夠通過在具體事例中描述事故原因、后果或者過程的方式來為意外傷害事故下定義；58％的被試幼兒所認(rèn)識(shí)到的意外傷害事故原因是單維度的；75％的被試幼兒能夠認(rèn)識(shí)到意外傷害事故可能導(dǎo)致的后果；62％的被試幼兒能夠正確識(shí)別可能導(dǎo)致意外傷害事故的危險(xiǎn)情境。此外，幼兒意外傷害事故認(rèn)知不存在明顯的性別差異，但存在明顯的年齡差異、園所差異以及不同意外傷害事故之間的差異。在此基礎(chǔ)上，研究者對幼兒意外傷害事故認(rèn)知的特點(diǎn)進(jìn)行了總的討論，得出幼兒對意外傷事故的認(rèn)知受到幼兒思維水平、幼兒生活經(jīng)驗(yàn)以及教育因素影響的結(jié)論，并對幼兒安全教育提出了一些建議。最后，研究者對本研究進(jìn)行了反思，提出了需要繼續(xù)改進(jìn)的地方。關(guān)鍵詞幼兒認(rèn)知意外傷害事故意外傷害事故認(rèn)知

簡介：流感屬中醫(yī)疫病學(xué)范疇是由流感病毒引起的嚴(yán)重危害人類健康的一種急性病毒性呼吸道傳染病歷史上流感有過幾次世界范圍內(nèi)的大規(guī)模流行曾給人類帶來深重災(zāi)難目前每年全世界仍有大約10％的人患流感流感主要影響老年人和患有慢性疾病的人尤以老年人的發(fā)病率和死亡率最高根據(jù)美國科學(xué)技術(shù)委員會(huì)等的報(bào)告近年來美國每年因流感損失數(shù)百萬個(gè)工作日死于流感的人數(shù)為24萬30萬人次住院每年用于預(yù)防流感的費(fèi)用和流感引起的勞動(dòng)力損失超過12億美元目前尚缺乏可靠的方法對流感發(fā)生與流行的周期性進(jìn)行有效預(yù)測而合成藥中也尚無理想廣譜且能消除癥狀的抗病毒藥物該文首先總結(jié)中藥抗流感病毒的研究進(jìn)展以及清開靈在各個(gè)系統(tǒng)的研究進(jìn)展并對中醫(yī)疫病學(xué)的發(fā)展簡史進(jìn)行了總結(jié)其后又進(jìn)行了清開靈Ⅱ?qū)α鞲胁《靖腥拘∈蠓尾∽兣c免疫狀態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究一、清開靈Ⅱ?qū)α鞲胁《綟M1感染小鼠的保護(hù)作用二、清開靈Ⅱ?qū)α鞲胁《綟M1感染小鼠肺指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響三、清開靈Ⅱ?qū)α鞲胁《綟M1感染小鼠血清中IFNΓ和IL4、10的影響綜合上述研究結(jié)果初步得出以下結(jié)論1清開靈的不當(dāng)使用對于小鼠的脾胃功能有影響可造成飲食減少及體重減輕驗(yàn)證了中醫(yī)過用寒涼則傷脾胃的理論2清開靈過早、過量使用造成小鼠體溫下降同時(shí)出現(xiàn)耳緣和尾部靜脈淤血其嚴(yán)重程度和劑量大小呈正相關(guān)驗(yàn)證了中醫(yī)苦寒藥損傷陽氣導(dǎo)致寒凝血淤的理論3清開靈對流感病毒感染抑制的量效關(guān)系從實(shí)驗(yàn)中可以看出清開靈Ⅱ大劑量組較模型組先出現(xiàn)死亡這與苦寒傷正有關(guān)而小劑量組死亡時(shí)間雖然延后但死亡數(shù)量仍然高于模型組說明藥量達(dá)不到抗病毒水平4清開靈Ⅱ中劑量組治療給藥能抑制FM1感染所致的體重下降降低小鼠死亡率提高平均生存天數(shù)但并不明顯病毒唑組能極顯著地提高小鼠生存率及平均生存天數(shù)抑制體重下降該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明清開靈Ⅱ?qū)M1感染小鼠具有一定的死亡保護(hù)作用5清開靈Ⅱ?qū)M1感染小鼠肺部病變的作用清開靈Ⅱ中劑量組與感染模型照組比較肺指數(shù)亦略有降低說明清開靈Ⅱ組有減輕流感病毒引起的小鼠肺部病變的作用清開靈Ⅱ大、中劑量組的胸腺指數(shù)顯著高于模型組其他各組無明顯區(qū)別說明清開靈Ⅱ有刺激動(dòng)物細(xì)胞免疫的作用6清開靈Ⅱ?qū)M1感染小鼠的抗病毒和抑炎作用通過感染7天后細(xì)胞因子的測定清開靈Ⅱ能促進(jìn)IFNΓ的分泌而且效果優(yōu)于清開靈清開靈Ⅱ組IL4釋放有明顯增加清開靈Ⅱ組與感染模型組比較IL10釋放亦有增加說明清開靈Ⅱ?qū)α鞲胁《靖腥疽鸬难装Y具有一定的抑制作用

簡介：點(diǎn)擊查看更多非意愿妊娠婦女避孕認(rèn)知度的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：第一部分目的探討乙肝病毒感染原代培養(yǎng)的人胚胎肝細(xì)胞的機(jī)制。方法用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)人的胚胎肝細(xì)胞，然后添加乙肝病毒感染；用ELISA與實(shí)時(shí)熒光定量PCRFQPCR測定每天收集培養(yǎng)的上清液；熒光定量PCR測定細(xì)胞內(nèi)含的乙肝病毒DNAHBVDNA的量；免疫組化測定培養(yǎng)細(xì)胞里的HBCAG、肝細(xì)胞表型CKL8、CK8、白蛋白ALB、GST每天測定培養(yǎng)上清的乳酸脫氫酶LDH來檢測細(xì)胞膜的完整性。結(jié)果建立起穩(wěn)定的肝細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)；乙肝病毒能感染培養(yǎng)的胚胎肝細(xì)胞并且在細(xì)胞里復(fù)制；免疫組化能測到HBCAG在肝細(xì)胞中表達(dá)；FQPCR測定感染后的218天培養(yǎng)上清HBVDNA為陽性結(jié)果；ELISA測定感染后318天培養(yǎng)上清的HBSAG及HBEAG為陽性結(jié)果。討論乙肝病毒能感染培養(yǎng)的胚胎肝細(xì)胞并且在細(xì)胞里復(fù)制；這種體外模式能為乙肝病毒感染肝細(xì)胞及在細(xì)胞中復(fù)制提供一個(gè)研究模型。第二部分目的觀察氧化苦參堿體外抗乙型肝炎病毒HBV的活性。方法用各濃度的氧化苦參堿處理培養(yǎng)HEPG22215細(xì)胞后1000MGL，800MGML，400MGML，200MGML，100MGML50MGML，干擾素IFNΑ2B1500UL為陽性對照，空白為陰性對照。用流式細(xì)胞術(shù)、免疫組化、DNA電泳觀察細(xì)胞的凋亡；四甲基偶氮唑藍(lán)MTT比色法觀察藥物的細(xì)胞毒性。每隔3天，用酶聯(lián)免疫法測ELISA檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HBSAG、HBEAG含量，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測培養(yǎng)上清液種的HBVDNA量的變化。結(jié)果半數(shù)抑制濃度1C是875MGL，氧化苦參堿在50MGL～800MGL的濃度范圍內(nèi)，對HEPG22215細(xì)胞毒性較小，氧化苦參堿對HBSAG和HBEAG的抑制作用，在200MGL～800MGL劑量范圍內(nèi)逐漸增加，與1500UL干擾素比較無顯著性差異P005。結(jié)論體外細(xì)胞培養(yǎng)表明，氧化苦參堿具有直接抗HBV活性。

簡介：目的探討綠原酸對腸道病毒71型（EV71）的抑制作用及分子機(jī)制。方法（1）斑塊形成試驗(yàn)檢測不同濃度綠原酸對EV71感染的抑制作用；（2）噻唑藍(lán)（MTT）法檢測不同濃度綠原酸和利巴韋林對RD細(xì)胞的細(xì)胞毒作用；病毒斑塊減少試驗(yàn)分析綠原酸對EV71吸附作用的影響；（3）時(shí)間過程試驗(yàn)檢測綠原酸抑制效用與病毒生命周期的相關(guān)性；（4）綠原酸處理RD細(xì)胞后，采用RTPCR和WESTERNBLOTTING法檢測不同時(shí)間點(diǎn)EV71VP1、2A、3C和3DMRNA及蛋白酶的表達(dá)。結(jié)果（1）綠原酸在5、10和20ΜGML劑量時(shí)對EV71具有良好的抑制率，分別為834±30、887±19和947±18，其半數(shù)抑制濃度（IC50）457ΜGML。利巴韋林在20、40和80ΜGML劑量時(shí)對EV71具有良好的抑制率，分別為845±11、956±22和854±46，其IC501952ΜGML；（2）綠原酸低于50ΜGML劑量處理時(shí)，細(xì)胞活率與空白對照組相比較并沒有顯著下降，其半數(shù)細(xì)胞毒性濃度（CC50）1435ΜGML。而利巴韋林低于150ΜGML時(shí)對RD細(xì)胞的存活率亦無明顯影響，其CC5011872ΜGML；（3）20ΜGML綠原酸與病毒同時(shí)加入或病毒吸附1H后加入，兩種方法不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞裂解液上清病毒滴度的降低差異無統(tǒng)計(jì)意義（P005）；（4）綠原酸在EV71感染RD細(xì)胞后08H加入，能顯著抑制EV71復(fù)制；而在EV71感染后1024H加入綠原酸，僅有部分或輕微抑制EV71復(fù)制效應(yīng)；（5）EV71感染RD細(xì)胞后4H和8H綠原酸可阻礙EV712AMRNA表達(dá)，但未影響EV71VP1、3C和3DMRNA表達(dá)；（6）綠原酸處理EV71感染RD細(xì)胞后4H和8H，未能檢測出EV712A蛋白酶，但EV71VP1、3C和3D蛋白表達(dá)未受影響。結(jié)論（1）綠原酸具有良好的抑制EV71病毒復(fù)制效用；（2）綠原酸對EV71感染的抑制效應(yīng)與阻止病毒吸附無關(guān)；（3）綠原酸主要通過干擾EV71復(fù)制早期2AMRNA表達(dá)和蛋白翻譯而發(fā)揮抗病毒效應(yīng)。

簡介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文基因重組HSVTK腺相關(guān)病毒聯(lián)合GCV治療膀胱癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名劉俊國申請學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)外科學(xué)（泌尿外）指導(dǎo)教師韓瑞發(fā)20070401天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文介導(dǎo)HSVTK的真核表達(dá)載體主要有逆轉(zhuǎn)錄病毒RETROVIMS腺病毒ADENOVIMS，AD、腺相關(guān)病毒ADENOASSOCIATEDVIRUS，AAV等；也可不經(jīng)載體介導(dǎo)直接將質(zhì)粒裸DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)在已經(jīng)報(bào)道的各種涉及HSVTK基因治療的體內(nèi)外試驗(yàn)中，由于選擇的基因轉(zhuǎn)移方法不同，可使HSVTK發(fā)揮的作用不盡相同本課題借助已被成功包裝為有復(fù)制缺陷的含目的基因HSVTK的腺相關(guān)病毒顆粒優(yōu)勢，結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物飼養(yǎng)技術(shù)，進(jìn)行殺傷膀胱癌細(xì)胞及裸鼠膀胱癌模型抑癌作用的實(shí)驗(yàn)研究。該項(xiàng)研究旨在為隨后的動(dòng)物原位模型體內(nèi)試驗(yàn)，含兩個(gè)或兩個(gè)以上目韻基因的腫瘤基因治療實(shí)驗(yàn)等系列研究莫定理論基礎(chǔ)，同時(shí)為膀胱癌等腫瘤疾病的治療開拓一個(gè)新的研究平臺(tái)第一部分基因重組HSVTK腺相關(guān)病毒聯(lián)合GCV治療膀胱癌的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究目的1通過觀察基因轉(zhuǎn)染T24膀胱腫瘤細(xì)胞的效果，證明含目的基因HSVTK的腺相關(guān)病毒基因轉(zhuǎn)染T24細(xì)胞的可行性2利用HSVTK腺相關(guān)病毒進(jìn)行體外124膀胱腫瘤細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究，觀察其對腫瘤細(xì)胞凋亡的影響、細(xì)胞生長抑制作用和時(shí)間一劑量依賴性方法1，以RAAVEGFP轉(zhuǎn)染T24膀胱腫瘤細(xì)胞，來確定腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染T24細(xì)胞的最適MOI值2、已被成功包裝為有復(fù)制缺陷的含目的基因HSVTK的腺相關(guān)病毒對“I“24膀胱腫瘤細(xì)胞的進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染并得到鑒定，來研究其可行性3、體外培養(yǎng)膀胱腫瘤細(xì)胞系T24，接種于96孔板，分別加入RAAVHSVTKRAAVMCS重組腺相關(guān)病毒顆粒，并加入含不同濃度GCV，以不加GCV的細(xì)胞為對照，做MIT試驗(yàn)，研究RAAVHSVTK／GCV系統(tǒng)對“1“24細(xì)胞殺傷的劑量依賴性4、體外培養(yǎng)膀胱腫瘤細(xì)胞系“1“24，接種于24孔板，加人RAAVHSVTKII

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)的人骨形成蛋白7基因轉(zhuǎn)染對人牙髓細(xì)胞增殖與分化的研究姓名秦偉申請學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師林正梅20060518腺癇毒介導(dǎo)的人骨形成蛋白．7基因轉(zhuǎn)染對人牙髓細(xì)胞增殖與分化的研究夠得到顯著提高，礦化結(jié)節(jié)形成，DSPPMRNA的表達(dá)呈劑量和時(shí)間依賴性。結(jié)論AD。HBMP．7轉(zhuǎn)染人牙髓細(xì)胞后可高效穩(wěn)定表達(dá)。ADHBMP一7顯著促進(jìn)體外培養(yǎng)的人牙髓細(xì)胞向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化，而對細(xì)胞的增殖無明顯改變。關(guān)鍵詞骨形形成蛋白；腺病毒載體；牙髓細(xì)胞；基因治療；組織工程

簡介：目的探討陰分伏熱體質(zhì)外感采用透伏解表法即以解表祛邪為主清透陰分伏熱以調(diào)體質(zhì)為輔的治療方法的作用機(jī)理。方法及指標(biāo)①理論探討部分主要從中西醫(yī)對流行性感冒的病因病機(jī)及治療的不同點(diǎn)為切入點(diǎn)進(jìn)行中西醫(yī)對比總結(jié)中醫(yī)藥治療流行性感冒的獨(dú)特優(yōu)勢。以此為基礎(chǔ)重點(diǎn)探討陰分伏熱體質(zhì)外感形成原因、作用機(jī)理、治療思想、方藥分析及其臨床意義。②實(shí)驗(yàn)研究主要采用半體內(nèi)法、MTT法、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)及實(shí)驗(yàn)方法以清營解表合劑干預(yù)流感病毒APR8H1N1感染小鼠通過觀察其死亡保護(hù)率、肺組織病理形態(tài)學(xué)改變、肺指數(shù)、肺組織病毒血凝滴度以及檢測免疫器官胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的大小驗(yàn)證其整體抗病毒的療效通過觀察對造模小鼠淋巴細(xì)胞增殖功能和對小鼠全血中TH1TH2調(diào)節(jié)的影響探討其發(fā)揮作用的免疫機(jī)制。結(jié)果①清營解表合劑對病毒感染小鼠有死亡保護(hù)作用能顯著改善感染小鼠的肺組織病變程度降低肺指數(shù)、血凝滴度。②清營解表合劑能通過提高淋巴細(xì)胞增殖功能和調(diào)節(jié)全血中TH1TH2平衡來提高流感病毒感染小鼠的免疫功能從而對病毒感染小鼠起保護(hù)作用。

簡介：研究目的人細(xì)小病毒B19與人類多種疾病發(fā)生有密切關(guān)系，可引起特發(fā)性血小板減少性紫癜、急性再生障礙性貧血、幼年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、過敏性紫癜等多種疾病，并可造成胎兒水腫、死胎、流產(chǎn)和先天畸形，給患者生命和健康造成嚴(yán)重影響。B19病毒基因組主要編碼兩種結(jié)構(gòu)蛋白VPL85KDA和VP258KDA以及一種非結(jié)構(gòu)蛋白NS77KDA。VPL和VP2均具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的IGM和IGG抗體，可用于B19病毒感染的診斷。免疫功能正常兒童感染B19病毒后可產(chǎn)生特異性抗體，B19VP2IGM陽性提示近期感染或急性感染，發(fā)病后3天即可檢出，23周達(dá)高峰，持續(xù)23個(gè)月，適用于B19病毒感染的早期診斷。但由于B19病毒抗原來源困難，國內(nèi)相關(guān)的血清學(xué)檢測試劑很少，臨床診斷大都采用昂貴的國外進(jìn)口ELISA試劑盒。分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展使得許多病毒衣殼蛋白能夠在體外進(jìn)行基因重組表達(dá)，這也為解決B19病毒抗原來源難的問題開辟了一條新的途徑。本研究通過對B19病毒VP2序列的生物信息學(xué)分析，選定VP2片段中43544662BPF309BP，351454位氨基酸表面易得性較高的片段作為研究對象，利用分子生物學(xué)方法獲得VP2基因片段及重組的VP2蛋白，再利用ELISA方法對該重組蛋白的生物學(xué)功能進(jìn)行初步分析。研究內(nèi)容與結(jié)果1細(xì)小病毒B19VP2基因片段克隆與序列分析通過引物合成及PCR方法合成了目的片段，擴(kuò)增出309BP的基因片段，測序結(jié)果與選定的B19病毒VP2序列一致，成功構(gòu)建了克隆質(zhì)粒PMDL8TVP2。2原核表達(dá)載體的構(gòu)建根據(jù)表達(dá)載體多克隆酶切位點(diǎn)信息重新設(shè)計(jì)引物，用新設(shè)計(jì)的引物再次擴(kuò)增VP2基因片段，經(jīng)酶切處理后插入PGEX4T2載體的BAMHI和SALI酶切位點(diǎn)之間，構(gòu)建了表達(dá)質(zhì)粒PGEXVP2，由于選用的載體在多克隆位點(diǎn)前融合有GST基因序列，當(dāng)目的基因表達(dá)時(shí)，就與GST形成融合蛋白，可以幫助目的蛋白正確折疊。3融合蛋白的表達(dá)與純化將構(gòu)建的原核表達(dá)載體轉(zhuǎn)入BL21入DE3工程菌并進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，表達(dá)的融合蛋白分子量約為37KDA左右，符合預(yù)期大小。SDSPAGE電泳顯示，融合蛋白主要以包涵體的形式存在，改變誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)時(shí)間及換用不同的宿主菌等條件均未增加蛋白的溶解。用8MOL／L的脲溶解包涵體，經(jīng)GSTRAP阡1M1親和樹脂純化后，雖然還含有少許其它雜蛋白，但以B19病毒VP2融合蛋白為主，純度較高。4融合蛋白抗原活性初步分析采用ELISA方法對初步純化的融合蛋白進(jìn)行了抗原活性分析，并與德國SERIONELISA試劑盒進(jìn)行了比較。用本研究中獲得的重組蛋白VP25UG／M1包被酶標(biāo)板，共檢測了46份兒童血清標(biāo)本中的IGM抗體，其特異度和靈敏度分別為100％和60％，與SERIONKIT的一致率為934％。研究結(jié)果表明，在檢測B19病毒特異性抗體IGM方面，本研究獲得的重組蛋白VP2活性較好，而敏感性較低的原因可能與配體蛋白GST有關(guān)。結(jié)論本研究利用分子生物學(xué)方法人工拼接合成了人細(xì)小病毒B19VP2部分基因片段，并構(gòu)建了原核表達(dá)載體，初步純化了表達(dá)出的融合蛋白，活性分析結(jié)果表明，該重組的VP2蛋白具有檢測B19病毒特異性抗體IGM的功能，這為進(jìn)一步研究探討該蛋白作為B19病毒感染檢測抗原奠定了一定基礎(chǔ)。

簡介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文內(nèi)皮抑素基因重組腺病毒載體抗血管生成治療子宮內(nèi)膜異位癥的實(shí)驗(yàn)研究姓名張新艷申請學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師劉彥20070501獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示謝意本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任學(xué)位論文作者簽名蟛幻之簽字日期善們7年J一月對日學(xué)位論文使用授權(quán)書聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)第二軍醫(yī)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印，縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名繯汐，罐一導(dǎo)師簽名簽字日期砷年廠月巧日簽字日期≯啼R月卿

簡介：碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目注意缺陷多動(dòng)障礙患兒數(shù)學(xué)認(rèn)知功能的事件相關(guān)電位研究研究生姓名王單單指導(dǎo)教師姓名董選專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)研究方向神經(jīng)電生理論文提交日期2013年5月注意缺陷多動(dòng)障礙患兒數(shù)學(xué)認(rèn)知功能的事件相關(guān)電位研究中文摘要I注意缺陷多動(dòng)障礙患兒數(shù)學(xué)認(rèn)知功能的事件相關(guān)電位研究中文摘要目的目的使用行為學(xué)及事件相關(guān)電位（ERP）技術(shù)對注意缺陷多動(dòng)障礙（ADHD）兒童數(shù)學(xué)認(rèn)知功能進(jìn)行研究，探討ADHD兒童在計(jì)算過程及答案判斷認(rèn)知加工的差異。方法方法ADHD患兒45例及正常對照組67名，采用計(jì)算題任務(wù)刺激（20以內(nèi)加減乘法），記錄認(rèn)知電位及行為學(xué)數(shù)據(jù)，并使用BESA軟件提取ERP波形并進(jìn)行比較分析。結(jié)果結(jié)果一、ADHD患兒與正常兒童在計(jì)算過程中的認(rèn)知加工的差異（1）行為學(xué)ADHD組加減乘法計(jì)算的反應(yīng)時(shí)間明顯長于正常組加949144，829166）MS；減981129，856170MS；乘944136，825172MS，正確率低于正常組加080（069，086），090（084，096）；減078（055，082），090（083，093）；乘086（073，092），093（089，097），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。二、ADHD患兒與正常兒童在答案判斷中認(rèn)知加工的差異（1）行為學(xué)ADHD組解決正確問題和錯(cuò)誤問題的反應(yīng)時(shí)間明顯長于正常組ADHD894165MS、1052157MS；NMAL762166MS、931195）MS，正確率低于正常組ADHD091（087，094）、088（079，092）；NMAL096（092，098）、096（092，097），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。2ERPADHD和正常對照組在解決正確問題和錯(cuò)誤問題時(shí)前額部均產(chǎn)生明顯的N2波，ADHD組正確問題判斷的波幅明顯高于

簡介：多系統(tǒng)萎縮患者的認(rèn)知功能、情感狀態(tài)及日常生活能力臨床研究THECLINICALSTUDYOFCOGNITIVEFUNCTION，EMOTIONALSTATUSANDACTIVITIESOFDAILYLIVINGINPATIENTSWITHMULTIPLESYSTEMATROPHY研究生宋東東專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)導(dǎo)師戚曉昆教授第二軍醫(yī)大學(xué)海軍臨床醫(yī)學(xué)院海軍總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2013年05月目錄中文摘要1ABSTRACT。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。；縮寫簡稱5第部分多系統(tǒng)萎縮患者的認(rèn)知功能、情感狀態(tài)及日常生活能力臨床研究前言66日|J舌對象與方法6結(jié)果7討論16參考文獻(xiàn)19第二部分多系統(tǒng)萎縮患者M(jìn)SAOC型和MSAP型認(rèn)知功能、情感狀態(tài)及日常生活能力對比分析前言21日IJ舌2L對象與方法21結(jié)果23討論26參考文獻(xiàn)28附件31綜述36碩士在讀期間發(fā)表文章、撰寫書籍以及獲獎(jiǎng)情況48致謝49

簡介：漢坦病毒是脂質(zhì)被膜包裹的RNA病毒可以持續(xù)感染嚙齒類動(dòng)物卻不使其致病而人在吸入含有病毒的氣溶膠狀的嚙齒動(dòng)物排泄物后可以被感染引起腎綜合征出血熱HFRS和肺綜合征HPS。目前還沒有針對漢坦病毒感染治療的抗病毒藥物臨床只限于對癥和支持治療。因此尋找有效和特異的治療漢坦病毒的新方法顯得十分重要而迫切。RNA干擾RNAI是一種由雙鏈RNA誘導(dǎo)的序列特異性的基因沉默機(jī)制。以致病基因?yàn)榘悬c(diǎn)的RNAI技術(shù)可用于治療包括腫瘤、感染性疾病和遺傳病在內(nèi)的各種疾病?？共《綬NAI策略作為治療方法的應(yīng)用研究正備受關(guān)注有多種基于該策略的方案正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。然而盡管針對病毒基因的RNAI能夠特異性地抑制病毒的復(fù)制但小RNA的組織或細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運(yùn)卻絕非簡單易行。治療性小干擾RNASSIRNAS面臨著如何在體內(nèi)被特異和有效地轉(zhuǎn)運(yùn)到靶細(xì)胞的難題。研究結(jié)果提示體內(nèi)細(xì)胞類型特異性的基因沉默可以通過SIRNA與細(xì)胞類型特異性親和配體或單克隆抗體結(jié)合而得以實(shí)現(xiàn)即抗體指導(dǎo)的SIRNA復(fù)合物通過內(nèi)吞作用進(jìn)入靶細(xì)胞隨后釋放到細(xì)胞漿通過RNAI路徑特異性地沉默靶基因的表達(dá)。與小分子堿性核酸結(jié)合蛋白融合的抗體片段是一種體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的有效工具體內(nèi)基因沉默的特異性、不引發(fā)非特異性免疫激活和全身毒性等特點(diǎn)促進(jìn)了以治療性RNAI的細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)運(yùn)為基礎(chǔ)的治療方法的開發(fā)。本研究針對漢坦病毒76118株的編碼基因以隨機(jī)序列SIRNA為陰性對照設(shè)計(jì)合成了4種SIRNAS篩選出抗病毒效果最強(qiáng)的SIRNAHV2命名為SIHV用于下一步研究。為確定抗體介導(dǎo)的SIRNA是否可以特異性地將SIRNA轉(zhuǎn)運(yùn)入漢坦病毒感染的細(xì)胞在原核表達(dá)載體PET32A中表達(dá)了一種融合蛋白3G1SCFVC_KTP它由漢坦病毒抗原特異性單鏈抗體3G1SCFV與魚精蛋白片段第829位氨基酸通過人C_K連接而形成。誘導(dǎo)表達(dá)的此融合蛋白以可溶性表達(dá)為主此融合蛋白明顯保留有抗原結(jié)合活性可以特異地結(jié)合胞膜上的病毒抗原與細(xì)胞表面的抗原結(jié)合后可以特異性地內(nèi)化入感染細(xì)胞的胞漿且與轉(zhuǎn)鐵蛋白有相似的內(nèi)化路徑即通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞來實(shí)現(xiàn)的。此融合蛋白可以結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)SIRNAS到漢坦病毒感染的細(xì)胞。先后用凝膠遷移阻滯實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測結(jié)果表明3G1SCFVC_KTP具有與SIRNA結(jié)合的能力且這種結(jié)合能力存在著劑量依賴關(guān)系DYNABEADSTALON磁珠分析顯示3G1SCFVC_KTP與SIRNA之間量的結(jié)合關(guān)系為1分子3G1SCFVC_KTP可以結(jié)合約10分子SIRNA3G1SCFVC_KTP可以將FITCSIRNA特異性地運(yùn)送到病毒感染的細(xì)胞。采用MTT方法測定細(xì)胞生長曲線表明3G1SCFVC_KTPSIRNA對細(xì)胞生長沒有毒性作用。在感染細(xì)胞中此融合蛋白靶向轉(zhuǎn)運(yùn)SIHV能夠有效地抑制病毒的復(fù)制。結(jié)果表明3G1SCFVC_KTPSIHV降低了病毒RNA和病毒抗原的水平而且下降程度與SIRNA呈劑量依賴性。在乳鼠顱內(nèi)注射漢坦病毒76118株以制備動(dòng)物模型然后腹腔注射3G1SCFVC_KTPFITCSIRNA混合物證實(shí)此融合蛋白能夠特異地將SIRNA轉(zhuǎn)運(yùn)入漢坦病毒感染的腦細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測顯示3G1SCFVC_KTP可以特異性的將FITCSIRNA轉(zhuǎn)運(yùn)到漢坦病毒感染的腦組織且熒光顯微鏡下可見熒光陽性細(xì)胞、高倍鏡下觀察到熒光彌散分布在漢坦病毒感染細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿。腹腔注射3G1SCFVC_KTPSIHV可以用于漢坦病毒感染性腦炎的保護(hù)。結(jié)果顯示3G1SCFVC_KTPSIHV治療組中病毒RNA和病毒抗原的水平明顯降低將腦組織和其它組織分別進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色觀察到3G1SCFVC_KTPSIHV使?jié)h坦病毒的感染和復(fù)制受到了明顯抑制對動(dòng)物的生存率進(jìn)行評(píng)估發(fā)現(xiàn)3G1SCFVC_KTP轉(zhuǎn)運(yùn)的SIHV對動(dòng)物有明顯的保護(hù)作用檢測乳鼠體內(nèi)IFN水平顯示3G1SCFVC_KTPSIHV并未誘導(dǎo)IFN的產(chǎn)生證明在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的保護(hù)作用是由針對病毒RNA的特異性RNAI所介導(dǎo)。總之實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示3G1SCFVC_KTP可以特異性轉(zhuǎn)運(yùn)SIRNA并沉默靶基因的表達(dá)因此可以用于漢坦病毒感染的保護(hù)。

簡介：1中圖分類號(hào)中圖分類號(hào)R89；R36；R39碩士學(xué)位論文事件相關(guān)電位對基底節(jié)區(qū)腔隙性梗死患者認(rèn)知功能事件相關(guān)電位對基底節(jié)區(qū)腔隙性梗死患者認(rèn)知功能損害的診斷價(jià)值損害的診斷價(jià)值院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名李經(jīng)晶學(xué)科、專學(xué)科、專業(yè)神經(jīng)病學(xué)導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名羅華教授3瀘州醫(yī)學(xué)院畢業(yè)碩士研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及發(fā)表承諾書本人聲明所呈交的學(xué)位論文（已整理成發(fā)表形式）是我個(gè)人在瀘州醫(yī)學(xué)院導(dǎo)師指導(dǎo)下，由導(dǎo)師及瀘州醫(yī)學(xué)院提供一切科研條件的情況下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。在即將畢業(yè)離校之際，本人鄭重承諾該論文將以瀘州醫(yī)學(xué)院的名義發(fā)表（論文作者為研究生及導(dǎo)師，作者所在單位為瀘州醫(yī)學(xué)院），并在發(fā)表后立即將發(fā)表論文原件（期刊）寄與導(dǎo)師1冊。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期年月日日期年月日瀘州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解瀘州醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即瀘州醫(yī)學(xué)院有權(quán)保留并向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本人學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，允許有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)以電子出版物形式出版發(fā)行，并對外進(jìn)行全文內(nèi)容服務(wù)。本人授權(quán)瀘州醫(yī)學(xué)院可以將本人學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，進(jìn)行數(shù)字化處理匯編、通過網(wǎng)絡(luò)或其它途徑進(jìn)行交流傳播，可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印、掃描或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，即瀘州醫(yī)學(xué)院具有本人學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)、信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫等數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本人提交的學(xué)位論文屬不保密□（請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期年月日日期年月日聯(lián)系電話聯(lián)系電話

簡介：背景和目的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞PASMCS由收縮表型向合成表型轉(zhuǎn)變，并從中膜遷移于內(nèi)膜大量增殖，是低氧性肺動(dòng)脈高壓HPH肺血管結(jié)構(gòu)重建PVSR的基本病理變化。PASMCS的增殖加速和凋亡減慢可以視為PVSR血管內(nèi)膜過度增生的演變核心。以PASMCS增殖和凋亡為切入點(diǎn)，探討HPH的發(fā)病機(jī)制，尋求HPH有效防治策略已成為目前研究前沿的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。有關(guān)生長因子、生長因子受體及其信號(hào)傳導(dǎo)通路在PASMCS的生物學(xué)行為異常中的作用研究較為深入。但關(guān)于核轉(zhuǎn)錄因子如何將這些信號(hào)進(jìn)行整合并啟動(dòng)級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)反應(yīng)的研究尚欠缺。GAX基因是近年來發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞生物學(xué)行為的核轉(zhuǎn)錄因子基因之一。研究證實(shí)GAXGROWTHARRESTHOMEOBOX基因是一個(gè)主要存在于心血管系統(tǒng)的同源盒基因，同源盒基因在胚胎發(fā)育中調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化和遷移。增強(qiáng)GAX基因表達(dá)可以抑制心血管平滑肌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡。以往的研究側(cè)重于GAX基因在心血管平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡中的作用，而有關(guān)GAX基因在肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的作用研究，目前亦尚欠缺。此外，研究側(cè)重于GAX基因?qū)ρ芷交≡鲋车挠绊懀瑢ζ湔T導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究亦顯不足。鑒于肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與心血管平滑肌細(xì)胞的生物學(xué)特性具有相似性，我們推測增強(qiáng)GAX基因表達(dá)對低氧性PASMCS可能也有抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。因此，本實(shí)驗(yàn)首先觀察正常大鼠PASMCS中是否有GAX基因表達(dá)，以及低氧對PASMCS中GAX基因表達(dá)是否有影響；其次通過攜帶GAX基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的大鼠PASMCS，觀察增強(qiáng)GAX基因表達(dá)對常氧和低氧條件下PASMCS增殖和凋亡的影響，以及原癌基因和凋亡相關(guān)基因表達(dá)的變化，探討GAX基因在低氧性PASMCS增殖和凋亡中的作用和機(jī)制。方法1采用組織塊貼壁法，顯微鏡觀察和ΑSMACTIN免疫細(xì)胞化學(xué)方法原代培養(yǎng)和鑒定大鼠PASMCS。2TRPCR、免疫細(xì)胞化學(xué)和WESTERNBLOT法檢測常氧和低氧條件下PASMCS中GAXMRNA和蛋白表達(dá)的變化。3用293細(xì)胞作為包裝細(xì)胞擴(kuò)增、氯化銫梯度離心純化、空斑形成實(shí)驗(yàn)、PCR、RTPCR和WESTEMBLOT鑒定攜帶大鼠GAX基因表達(dá)序列的重組腺病毒載體ADGAX及觀察其表達(dá)，制備高效、高滴度的病毒轉(zhuǎn)染液。4以病毒轉(zhuǎn)染液常規(guī)轉(zhuǎn)染PASMCS后，應(yīng)用RTPCR和免疫細(xì)胞化學(xué)方法分別檢測GAX基因在常氧和低氧條件下PASMCS轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)。5應(yīng)用四唑鹽MTT比色試驗(yàn)、3H標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷3HTDR摻入試驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、電鏡和TUNEL染色觀察GAX基因表達(dá)增強(qiáng)對在常氧和低氧條件時(shí)PASMCS增殖、和凋亡的影響。6應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色和RTPCR技術(shù)，在常氧和低氧條件下，分別觀察GAX基因轉(zhuǎn)染前后PASMCS中與增殖相關(guān)的原癌基因CFOS、CJUN以及與凋亡相關(guān)的凋亡相關(guān)基因BAX、BCL2表達(dá)的變化。結(jié)果1經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)和ΑSMACTIN免疫細(xì)胞化學(xué)方法鑒定，應(yīng)用大鼠肺動(dòng)脈原代培養(yǎng)所得細(xì)胞正是預(yù)期的PASMCS。可以用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。2在常氧和低氧條件下，用TRPCR、免疫細(xì)胞化學(xué)和WESTERNBLOT法均檢測到PASMCS中有GAXMRNA和蛋白的表達(dá)。低氧可以下調(diào)GAX基因在PASMCS中的表達(dá)水平，并且隨著低氧時(shí)間的延長，GAX基因表達(dá)下降程度更加顯著。3成功地?cái)U(kuò)增、純化和鑒定了攜帶大鼠GAX基因表達(dá)序列的重組腺病毒載體，并純化制備高效高滴度病毒轉(zhuǎn)染液。獲得70ΜL純化病毒液，滴度高達(dá)101010361011PFUML，最佳感染復(fù)數(shù)為80的ADGAX轉(zhuǎn)染液。ADGAX轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞后出現(xiàn)GAX基因高表達(dá)，提示ADGAX可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。4流式細(xì)胞儀檢測和免疫細(xì)胞化學(xué)染色均顯示ADGAX轉(zhuǎn)染PASMCS后，PASMCS的GAX蛋白表達(dá)率明顯增高，轉(zhuǎn)染后12小時(shí)即可超過80％，高水平的表達(dá)可維持較長時(shí)間。5ADGAX轉(zhuǎn)染后，GAX基因在PASMCS中能夠高效過表達(dá)。增強(qiáng)PASMCS中GAX基因的表達(dá)后，無論有無低氧刺激，PASMCS中GAX基因的表達(dá)均比轉(zhuǎn)染前顯著增加P＜001。6ADGAX轉(zhuǎn)染使PASMCS中表達(dá)GAX增強(qiáng)后，PASMCS中的MTT吸光度值和3HTDR摻入量均較未轉(zhuǎn)染組顯著降低，PASMCS中G0G1比例較未轉(zhuǎn)染組顯著增高P＜001，SG2M比例顯著降低P＜001。7在低氧條件下ADGAX轉(zhuǎn)染使PASMCS中的CFOS、CJUNMRNA表達(dá)比未轉(zhuǎn)染組顯著降低P＜001。8無ADGAX轉(zhuǎn)染時(shí)，低氧刺激前后，均無或可見極少量的TUNEL染色陽性細(xì)胞；ADGAX轉(zhuǎn)染后，如無低氧刺激，也無或僅可見少量的TUNEL染色陽性細(xì)胞，予低氧刺激后，TUNEL染色陽性細(xì)胞顯著增多，尤其在轉(zhuǎn)染后24小時(shí)至48小時(shí)更明顯。9ADGAX轉(zhuǎn)染前，與常氧時(shí)比較，低氧刺激PASMCS后，BAX蛋白表達(dá)略為升高但均沒有顯著意義P＞005；而BCL2蛋白表達(dá)顯著升高且有顯著性差異P＜001。ADGAX轉(zhuǎn)染PASMCS后，低氧刺激可使BAX蛋白表達(dá)顯著增高P＜005，BCL2蛋白表達(dá)顯著降低P＜001，且凋亡率與BCL2BAX比值呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論1本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了正常PASMCS在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上都有GAX基因的表達(dá)；低氧可使PASMCS中GAX基因在細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)均下調(diào)，并且隨著低氧時(shí)間的延長，下調(diào)程度越來越顯著，具有時(shí)間依賴性。說明低氧是下調(diào)PASMCS中GAX基因表達(dá)的一個(gè)因素。2ADGAX重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染PASMCS后，GAX基因能夠在PASMCS中進(jìn)行高效過表達(dá)。3低氧能夠誘導(dǎo)PASMCS增殖；ADGAX轉(zhuǎn)染使PASMCS中GAX基因過表達(dá)后，可抑制低氧引起的PASMCS增殖，其作用機(jī)制可能與GAX基因下調(diào)CFOS、CJUNMRNA表達(dá)有關(guān)。4ADGAX轉(zhuǎn)染使PASMCS中GAX基因過表達(dá)后，可誘導(dǎo)低氧條件下的PASMCS凋亡，但對常氧正常PASMCS無誘導(dǎo)凋亡的作用。GAX基因誘導(dǎo)PASMCS凋亡的機(jī)制可能是通過上調(diào)BAX蛋白和下調(diào)BCL2蛋白的表達(dá)，尤其是通過降低BCL2BAX比值來實(shí)現(xiàn)。5調(diào)控GAX基因的表達(dá)可能有利于改善低氧性肺動(dòng)脈高壓肺血管結(jié)構(gòu)重建的形成，對HPH的防治有益。GAX基因可望成為HPH基因治療的靶基因。