簡介：點擊查看更多腺病毒介導(dǎo)CTLA-41g基因轉(zhuǎn)染延長大鼠腎臟移植物存活的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERTHELEFTITRINRECOMBINANTADENOVIRUSVECTORSINFLUENCETHEEXPRESSIONOFDOWNSTREAMGENESBYYUANLINGXUSUPERVISORPROFZANGXINMAHONGBAOCELLBIOLOGY一一DEPARTMENTOFBIOENGINEERINGMAY2011原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者彳蔽I起遵日期為F／年‘月／D日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者彳泰L起勉日期知11年6月I。日

簡介：第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文樹突狀細(xì)胞（DC）的培養(yǎng)及CEA重組痘苗病毒轉(zhuǎn)染DC誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞免疫姓名吳軍申請學(xué)位級別碩士專業(yè)消化內(nèi)科指導(dǎo)教師王曉懷周殿元2001530簡單摘要／／7＼體外成功地完成了CDL4單核細(xì)胞來源的樹突狀G啦DC的蕉養(yǎng)，并進(jìn)一步研究人癌胚抗原重組痘苗病毒RV．CEA轉(zhuǎn)染DC后體外誘導(dǎo)的CEA特異性細(xì)胞免疫。首先，分離癌癥患者的外周血單核細(xì)胞，分別加入重組人粒．單集落刺激因子RHGMCSF1000U／MLIL4500U／MLA組、血GMCSF1000U／MLB組及單純含10％牛血清的RPMI1640C組。體外培養(yǎng)一周后C于光鏡及電鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的表面標(biāo)志、MTT比色法檢測上述三種條件培養(yǎng)的細(xì)胞對T細(xì)胞的刺激增殖作用√結(jié)果，癌癥患者外周血中的單核細(xì)胞在RHGM．CSF1000U／MIIL．4500U，ML的條件下培養(yǎng)一周，就可看到典型的樹突狀細(xì)胞形態(tài)，其表面CDL4分子表達(dá)減少，HLADR、CD54、CD40、CD83及CD86分子的表達(dá)明顯增高，且具有明顯刺激T細(xì)胞增殖的能力。成功地完成了外周血單核細(xì)胞來源的DC的培養(yǎng)。其次，用RV．CEA轉(zhuǎn)染晚期大腸癌患者的DC，再激發(fā)自體T細(xì)胞，然后檢測T細(xì)胞對CEA分泌性腫瘤細(xì)胞的體外殺傷活性，并與未經(jīng)RV．CEA轉(zhuǎn)染的DC激發(fā)的T細(xì)胞及野生型痘苗病毒轉(zhuǎn)染的DC激發(fā)的T細(xì)胞進(jìn)行對比。結(jié)果，經(jīng)RV．CEA轉(zhuǎn)染的DC激活的T細(xì)胞增殖力強(qiáng)，且對CEA分泌性腫瘤細(xì)胞具特異性殺傷活性。關(guān)鍵詞；樹突狀細(xì)胞；外周血單核細(xì)胞癌胚抗原；痘苗病毒

簡介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒潛伏膜蛋白1轉(zhuǎn)化鼻咽上皮細(xì)胞的磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名劉潔瓊申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師賀智敏20080501碩士學(xué)位論文中文摘要PLNSX為對照分別導(dǎo)入PA317包裝細(xì)胞，G418篩選2周后擴(kuò)大培養(yǎng)，自細(xì)胞培養(yǎng)上清獲得后續(xù)實驗所需的感染性逆病毒RVPLNSX、RVLMPLWR、RVLⅧ1TRADD與RVLMPL△232。51。然后，用濃縮的病毒分別感染人鼻咽上皮細(xì)胞NP69，匯合克隆培養(yǎng)，獲得NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69L腳1吼∞D(zhuǎn)與NP69L腳1必2。514種轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。觀察和檢測以上轉(zhuǎn)化細(xì)胞的形態(tài)、生長曲線、平板克隆、細(xì)胞周期等。同時，采用固相PH梯度雙向凝膠電泳技術(shù)結(jié)合WESTEMBLOT方法分析NP69PLNSX、NP69LMPLWR、NP69L御1TRADD與NP69LMPL△232。351細(xì)胞系磷酸化蛋白質(zhì)表達(dá)的差異，即在感染24小時后抽提細(xì)胞總蛋白，2DE分別分離NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69LⅧ1吼心D與NP69LMP1△232351細(xì)胞的總蛋白質(zhì)，每組平行進(jìn)行兩塊膠電泳，其中一塊作為制備膠，另一塊作為分析膠。制備膠考染顯色，得到了分辨率較高、重復(fù)性較好的NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69LMP1T啪D與NP69LMPL△232。351細(xì)胞總蛋白質(zhì)2D膠電泳圖譜；分析膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜后，與抗酪氨酸磷酸化抗體孵育，進(jìn)行WESTEMBLOT分析，獲得差異表達(dá)酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)的反應(yīng)圖譜；將制備膠的電泳圖譜和WESTEMBLOT的反應(yīng)圖譜進(jìn)行比對分析，在制備膠上找到相應(yīng)的差異酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)點。利用MALDITOFMS對差異酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定，部分差異蛋白質(zhì)應(yīng)用免疫沉淀方法進(jìn)行驗證。結(jié)果1NP69LMPLWT細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，逐漸由多角形、II

簡介：目的調(diào)查在呼吸科就診的COPD患者的一般情況及疾病認(rèn)知狀況，為進(jìn)一步在遼寧地區(qū)普及COPD相關(guān)知識和提高人們對COPD的認(rèn)識提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和相關(guān)信息。方法采用調(diào)查問卷的方法，對我院2007年5月～2008年11月在呼吸科就診和門診定期隨訪的206例COPD患者進(jìn)行一般情況及疾病認(rèn)知狀況調(diào)查，分析與認(rèn)知程度相關(guān)的因素。結(jié)果COPD患者年齡普遍偏大，平均年齡6469±1016歲，社會經(jīng)濟(jì)地位和受教育程度普遍偏低，對COPD的認(rèn)知明顯不足，對COPD名稱及COPD急性加重方面的知曉率分別為277％和262％，病情嚴(yán)重程度相對較輕、受教育程度和經(jīng)濟(jì)收入水平低下患者的認(rèn)知水平明顯下降。結(jié)論COPD患者對于疾病的認(rèn)知水平十分低下，尤其是低收入，受教育水平較低及病情相對較輕的患者對疾病的認(rèn)知程度更低，有必要加大對COPD相關(guān)知識的宣傳教育力度，提高COPD患者的疾病認(rèn)知程度，從而提高疾病防治水平以減輕家庭及社會經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

簡介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文副粘病毒天津株HN、M基因克隆與表達(dá)的研究姓名袁立軍申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病原生物學(xué)指導(dǎo)教師李曉眠李梅20070501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文●FDVODPBSPCABPCRPVDFRNAASINRTSDSNEWCASTLEDISEASEVIRUS新城疫病毒OPTICALDENSITY光密度PHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液POLYCLONALANTIBODY多克隆抗體POLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈反應(yīng)POLYVINYLIDENEDIFLUORIDE聚偏二氟乙烯RNAA∞INHIBITORREVERSETRANSCRIPTI∞SODIUMDODECYLSULFATERNA酶抑制劑逆轉(zhuǎn)錄十二烷基硫酸鈉SODIUMDODECYLSULFATESDSPAGEPOLYACRYLAMIDEGEL聚丙烯酰胺凝膠變性電泳ELECTROPHORESISSE_VTEMEDSENDAIVIRUS仙臺病毒N，NN’，NTETRAMETHYL四甲基乙二胺ETHYLENEDIAMINE2

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簡介：目的腫瘤壞死因子凋亡相關(guān)配體TNFRELATEDAPOPTOSISINDUCINGLIG，TRAIL是近年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子家族的一員，在正常人體組織中廣泛存在，主要參與機(jī)體的免疫自穩(wěn)定、免疫監(jiān)控和免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)，但對正常組織細(xì)胞基本無毒副作用，而主要選擇性作用于腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)其凋亡。鑒于有學(xué)者報道，TRAIL表達(dá)的降低可能與HBV感染的慢性化有關(guān)，我們推測，TRAIL可能在抑制乙肝病毒復(fù)制方面發(fā)揮某種作用。為此，作者采用肝癌細(xì)胞株HEPG2及其同種系的HEPG2215建立體外細(xì)胞模型，就TRAIL分子對HBV復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的影響及其與凋亡的關(guān)系作了初步探索，希望可以為抗乙肝病毒治療找到新思路。方法1研究STRAIL對HBVDNA轉(zhuǎn)錄、復(fù)制和表達(dá)的影響。將具有相同遺傳背景的肝癌細(xì)胞株HEPG2215和HEPG2細(xì)胞作為體外模型，使25～20NGMLSTRAIL分別作用于已與HBV基因組整合的HEPG2215和轉(zhuǎn)染了乙肝病毒PHBV41的HEPG2細(xì)胞，通過ELISA測定HEPG2215細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBSAG、HBEAG量的變化情況加STRAIL0～5天；通過免疫組化觀察HEPG2細(xì)胞分泌HBSAG、HBCAG的變化情況加STRAIL48H后；用SOUTHERN核酸吸印雜交檢測HEPG2215和HEDG2細(xì)胞中HBV復(fù)制中間體水平，NTHERN核酸吸印雜交檢測HEPG2細(xì)胞中35KB、24KB、21KB和07KBHBVMRNA的轉(zhuǎn)錄水平加STRAIL48H后。2用乙肝病毒全基因重組質(zhì)粒PHBV41轉(zhuǎn)染HEPG2細(xì)胞，加入STRAIL10、20、100、200、1000NGML作用48H后，以電泳觀察DNALADDER形成實驗，了解不同濃度的STRAIL誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的情況。結(jié)果1SOUTHERN核酸吸印雜交的結(jié)果顯示，與未加STRAIL的對照組相比，10NGMLSTRAIL作用48H后的實驗組已與HBV基因組整合的HEPG2215或轉(zhuǎn)染了乙肝病毒PHBV41的HEPG2細(xì)胞中的HBV復(fù)制中間體RCDNA、SSDNA均下降了3～20倍；NTHERN核酸吸印雜交的結(jié)果顯示，與未加STRAIL的對照組相比，加了10NGMLSTRAIL作用48H后的實驗組轉(zhuǎn)染了乙肝病毒PHBV41的HEPG2細(xì)胞中的HBV前基因組RNA即35KBRNA的轉(zhuǎn)錄水平下降了5～20倍。2ELISA檢測結(jié)果顯示。加入不同濃度0、25、5、10、20NGMLSTRAIL作用于HEPG2215細(xì)胞后，對其分泌HBSAG、HBEAG量進(jìn)行連續(xù)5天的觀察，各濃度組檢測結(jié)果進(jìn)行方差分析和兩兩比較后提示與不加STRAIL組相比，在25、5、10、20NGML范圍內(nèi)，加入STRAIL后，第1天起HBSAG分泌量即均顯示減少P005。3免疫組化檢測結(jié)果顯示。10NGMLSTRAIL作用于HEPG2細(xì)胞48小時后，免疫組化檢測觀察到細(xì)胞中HBSAG、HBCAG分泌量表達(dá)明顯減少。4LADDER實驗結(jié)果提示，STRAIL誘導(dǎo)HEPG2細(xì)胞已轉(zhuǎn)染乙肝病毒PHBV41凋亡的現(xiàn)象呈濃度依賴性。加入STRAIL100NGML組作用48小時后，則可見LADDER條帶，表明HEPG2細(xì)胞已出現(xiàn)可檢測的凋亡；加入STRAIL200NGML組作用48小時后，LADDER條帶明顯變強(qiáng)。但是，在上述可以產(chǎn)生HBV復(fù)制及表達(dá)抑制現(xiàn)象的STRAIL濃度10、20NGML組作用48小時后，HEPG2細(xì)胞未見明顯凋亡。結(jié)論10NGMLSTRAIL作用48小時后可使轉(zhuǎn)染了PHBV41的HEPG2細(xì)胞分泌HBSAG、HBCAG量減少，HBV復(fù)制中間體DNA和轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物35KBMRNA水平降低；HEPG2215細(xì)胞HBV復(fù)制中間體DNA生成減少。而25～20NGML濃度范圍內(nèi)STRAIL作用48小時后，HEPG2215細(xì)胞分泌HBSAG、HBEAG量下降；且HBSAG下降趨勢呈STRAIL濃度依賴性。另由LADDER實驗的結(jié)果觀察到，STRAIL誘導(dǎo)HEPG2細(xì)胞已轉(zhuǎn)染乙肝病毒PHBV41凋亡的現(xiàn)象呈濃度依賴性。100NGMLSTRAIL作用48小時后，轉(zhuǎn)染了PHBV41的HEPG2細(xì)胞方可觀察到凋亡現(xiàn)象；小于此劑量則未見凋亡。上述結(jié)果提示，STRAIL可能通過某種機(jī)制對HBV復(fù)制、轉(zhuǎn)錄及表達(dá)的過程發(fā)揮了抑制作用，在STRAIL25～20NGML濃度范圍內(nèi)，該抑制作用的產(chǎn)生與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡似無明顯關(guān)系。

簡介：朊病毒病PRIONDISEASES是一類致死性神經(jīng)退行性疾病，是細(xì)胞型朊蛋白CELLULARPRIONPROTEIN，PRPC經(jīng)構(gòu)象轉(zhuǎn)變形成致病型朊蛋白SCRAPIEPRIONPROTEIN，PRPSC的結(jié)果。上世紀(jì)末歐洲瘋牛病的大范圍爆發(fā)及其由牛傳染給人的新型克雅氏病的發(fā)現(xiàn)使得人們“談牛色變”，并迫使歐盟迅速建立朊病毒病檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法。朊病毒病的診斷尤其是早期診斷既能實現(xiàn)該疾病流行趨勢的監(jiān)控、確保肉類產(chǎn)品、輸血、手術(shù)、血庫和血漿產(chǎn)品安全，又使得該病在永久性腦損傷發(fā)生前即可進(jìn)行有效治療?；陔貌《静】贵w的傳統(tǒng)檢測方法因抗體制備復(fù)雜、與靶物的親和力和特異性不高等缺點而無法應(yīng)用于朊病毒病的早期診斷中。因此簡單、快速、準(zhǔn)確的朊病毒病早期診斷方法亟待建立。朊病毒蛋白配體因能夠特異性的與朊蛋白相互作用而得到科學(xué)工作者的廣泛關(guān)注。如適配子是一類新興的與靶物具有很高的親和力和選擇性的核酸配體，自發(fā)現(xiàn)以來就因具抗體無法比擬的優(yōu)勢成為抗體替代物在各個領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。本文將配體應(yīng)用于朊病毒病分析中，建立了一系列基于配體的朊病毒蛋白分析方法。主要研究內(nèi)容如下1單標(biāo)記APTAMER分子燈標(biāo)的設(shè)計及朊蛋白的檢測中。根據(jù)G堿基在距離適當(dāng)時能猝滅染料如羅丹明、熒光素等的熒光的性質(zhì)，本文設(shè)計了基于G堿基猝滅的單標(biāo)記適配子分子燈標(biāo)，成功解決了分子燈標(biāo)雙標(biāo)記的操作復(fù)雜、成本高、適配子親和力下降等問題。將所設(shè)計的適配子分子燈標(biāo)應(yīng)用于朊病毒蛋白檢測時發(fā)現(xiàn)，在朊病毒蛋白濃度為11447ΜGML時，熒光強(qiáng)度與蛋白濃度呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系，檢測限為03ΜGML3Σ。與傳統(tǒng)的抗體檢測方法相比，本文所建立的方法簡單、快速且選擇性高。2基于適配子和汞離子的朊蛋白免標(biāo)記檢測。根據(jù)T堿基能與HG相互作用形成THG2T結(jié)構(gòu)的特點，本文建立了基于適配子和HG2的免標(biāo)記的朊病毒蛋白檢測方法。研究結(jié)果表明，適配子與HG2作用后形成鏈間雙鏈結(jié)構(gòu)，引起雙鏈嵌入熒光染料SYBERGREENⅠ的熒光顯著增強(qiáng)；但當(dāng)加入朊病毒蛋白后，朊病毒蛋白與適配子的特異性相互作用促使THGT結(jié)構(gòu)打開從而雙鏈結(jié)構(gòu)被破壞，SYBERGREENⅠ的熒光降。當(dāng)朊蛋白濃度為1301560NMOLL時，SYBERGREENⅠ的熒光強(qiáng)度與朊蛋白濃度呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系，線性方程為IFF05833842CPRP，相關(guān)系數(shù)R0992。3雙適配子策略在多靶物分析中的應(yīng)用。與單適配子策略相比，雙適配子策略具有更高的選擇性和靈敏度，并能顯著提高分析方法靈敏度。本研究將雙適配子策略應(yīng)用于多靶物分析中并選擇凝血酶、腺苷、朊病毒蛋白PRP三種與疾病相關(guān)的生物分子作為研究對象。結(jié)果表明，雙適配子策略能夠?qū)崿F(xiàn)同一樣品中凝血酶、腺嘌呤核苷酸和朊蛋白的同時檢測，且三種靶物的類似物如鳥嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、IGG、蝸牛酶、牛血清白蛋白等對多靶物測定不產(chǎn)生干擾，顯示出雙適配子策略在多靶物分析中的高選擇性。4雙適配子分子邏輯門在朊病毒蛋白構(gòu)象區(qū)分中的應(yīng)用。作為邏輯門延伸的分子邏輯門以一個或多個復(fù)雜的生物或化學(xué)反應(yīng)過程為輸入信號，通過一定的邏輯運算簡化為單一輸出結(jié)果，例如疾病的診斷通過分子邏輯門可簡化為“患病”或“正?！?。本文借助分子邏輯門的優(yōu)勢并將雙適配子策略應(yīng)用其中，成功構(gòu)建了能夠進(jìn)行“異或”X和“或”邏輯運算的雙適配子分子邏輯門。結(jié)果表明，PRPC符合“異或”邏輯運算而PRPRES符合“或”邏輯運算。與傳統(tǒng)的朊病毒蛋白區(qū)分方法相比，本文所構(gòu)建的雙適配子分子邏輯門具有四個優(yōu)點1雙適配子分子邏輯門非常簡單且能夠應(yīng)用于朊病毒蛋白不同構(gòu)象的區(qū)分；2使用雙適配子策略使得分子邏輯門具有極高選擇性，無需分離和純化即可實現(xiàn)血清中的朊病毒蛋白的區(qū)分；3雙適配子分子邏輯門的輸入信號PRP和鹽酸胍和元件MMPSAPT1和QDSAPT2的成本較低，且都是化學(xué)穩(wěn)定分子，而這是構(gòu)建更快、更高效、更小型的計算器所必需的；4因APT1只在磁微米粒子表面形成單層而不涉及固定構(gòu)象，所以元件之一的MMPSAPT1能夠通過簡單的方法進(jìn)行循環(huán)使用。5肝素鈉誘導(dǎo)朊病毒蛋白構(gòu)象變化的光譜分析。粘多糖是一種在細(xì)胞膜表面和溶酶體中均有表達(dá)的朊蛋白配體分子，其在朊病毒病中發(fā)生中所發(fā)揮的作用目前仍存在爭議。本文以肝素鈉作為粘多糖的代表，通過共振光散射光譜、熒光光譜和圓二色光譜的變化研究了肝素鈉與人重組細(xì)胞型朊蛋白RHPRPC23231的相互作用。結(jié)果表明，肝素鈉與朊蛋白相互作用后光散射和熒光信號均得到增強(qiáng)，且當(dāng)RHPRPC23231濃度為0411646ΜGML時，RHPRPC23231濃度與共振散射光強(qiáng)度呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系，線性方程IRLS1838427240CRHPRPC23231，相關(guān)系數(shù)R0999。同時對朊蛋白和肝素鈉相互作用體系的熒光壽命表征表明，肝素鈉促使朊蛋白的熒光壽命有一定程度的延長，而圓二色光譜的表征則表明肝素鈉能誘導(dǎo)朊蛋白從富含Α螺旋的構(gòu)象向富含Β折疊的構(gòu)象轉(zhuǎn)變。本研究基于配體所建立的一系列朊病毒蛋白分析方法，方法簡單、快速且靈敏，雙適配子邏輯門方法更因具有超高的靈敏度和選擇性而有望開發(fā)成朊病毒病的早期診斷方法。

簡介：第一部分中國靜脈吸毒人群HCV感染的流行病學(xué)系統(tǒng)綜述和META分析靜脈吸毒是中國丙型肝炎病毒傳播的主要方式，然而全國對此的報道和描述存在許多不一致。本文旨在對中國靜脈吸毒人群IDUS的流行病學(xué)特征和HCV感染危險因素的已有相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和綜合，為制定防治計劃和明確研究方向提供可靠依據(jù)。根據(jù)事先制定的標(biāo)準(zhǔn)，從已發(fā)表文章或報道中摘錄中國不同地域、性別、民族和具有不同高危行為注射毒品行為、共用針具、長期吸毒、不安全性行為和共感染吸毒人群的HCV感染率數(shù)據(jù)進(jìn)行META分析?；诰C合的數(shù)據(jù)及代表性觀點進(jìn)行系統(tǒng)綜述。應(yīng)用近似正態(tài)分布法計算HCV感染率的95％可信區(qū)間CI。比值比及其95％CI的計算使用固定或隨機(jī)效應(yīng)模型。發(fā)表偏倚的衡量采用BEGG’S檢驗和EGGER’S檢驗。數(shù)據(jù)處理軟件為STATA70和REVMAN42。地圖制作采用EPIINFO343軟件。中國IDUS的合并感染率為614％95％CI557672％，感染率最高的地區(qū)是湖北、云南、廣西、湖南和新疆。IDUS中男性和女性之間HCV感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義153，95％CI080293，P0339。漢族IDUS的HCV感染率低于少數(shù)民族068，95％CI050092，P0012。IDUS感染HCV的風(fēng)險是非靜脈方式吸毒者的92倍95％CI7031214，P0000，而非靜脈方式吸毒者的感染風(fēng)險仍然高于一般人群682，95％CI1932411，P0003和其他高危人群如性病門診病人和醫(yī)務(wù)工作者。共用針具和不共用針具IDUS的HCV感染率差異無顯著性95％CI074444。人類免疫缺陷病HIV共感染能顯著增加IDUS感染HCV的可能1770，95％CI5575629，P0000，而乙型肝炎病毒HBV的感染率在感染或未感染HCV的IDUS中無顯著差異。在中國，通過靜脈吸毒途徑傳播HCVHIV的勢頭迅猛，政府和疾病預(yù)防控制部門已采取各種切實的措施，但效果仍需進(jìn)一步評價。第二部分江蘇省部分地區(qū)吸毒人群HCV感染的流行病學(xué)調(diào)查毒品是全世界關(guān)注的問題，吸毒不僅造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且傳播丙型肝炎、性病、艾滋病等多種疾病。吸毒人群的不良行為，特別是共用注射針管和稀釋液，為HCV提供了高效的傳播條件。吸毒人群與非主要性伴發(fā)生性行為較普遍，同樣是傳播HCV的危險因素。為了解江蘇省吸毒人群的人口統(tǒng)計學(xué)特征、吸毒行為、性行為和HCV感染狀況，為制定科學(xué)的防治策略和措施提供依據(jù)，本研究對江蘇省部分地區(qū)吸毒人群HCV感染現(xiàn)狀進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查。本研究選取南京市公安局強(qiáng)制戒毒所強(qiáng)制戒毒人員587例，無錫市疾病預(yù)防控制中心美沙酮維持治療MMT門診收治的吸毒者798例，兩地共計1385例吸毒者。采用專門設(shè)計的“藥物濫用監(jiān)測調(diào)查表”進(jìn)行調(diào)查，同時抽取每名調(diào)查對象靜脈血3ML檢測抗HCV抗體。第三部分TAP基因與吸毒人群HCV感染關(guān)系的研究HCV感染時，細(xì)胞毒性T細(xì)胞CD8T細(xì)胞CTL反應(yīng)起很重要的作用。被感染細(xì)胞胞漿內(nèi)的抗原經(jīng)蛋白酶體降解后，一部分經(jīng)抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運體TAP從胞漿轉(zhuǎn)運到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中，并在此與MHCⅠ類分子結(jié)合，進(jìn)一步被提呈到細(xì)胞表面，引起HCV特異性的CD8T應(yīng)答。TAP蛋白是由TAP1和TAP2蛋白組成的異二聚體，人類TAP基因位于第六號染色體短臂HLAⅡ區(qū)，包括TAP1和TAP2基因，人類的部分多態(tài)性位點已被證實。本研究目的是為了探索TAP基因多態(tài)性與HCV易感性及HCV感染者ALT水平的關(guān)聯(lián)。本研究對象為南京市強(qiáng)制戒毒所強(qiáng)制戒毒人員587名。根據(jù)抗HCV檢測結(jié)果分為HCV感染組362人和HCV感染陰性組225人。其中，HCV感染組根據(jù)ALT水平分為ALT異常組ALT≥40UL116人和ALT正常組ALT40UL246人。TAP1基因2個和TAP2基因4個多態(tài)性位點檢測采用ARMSPCR法。運用SASGEIC模塊根據(jù)觀察到位點的基因型推斷TAP1和TAP2基因的基因型。

簡介：浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文利用IETD連接TRAIL和SMAC的靶向性雙基因溶瘤腺病毒治療癌癥的研究姓名譚淵申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師劉新垣20100101

簡介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒LMP1介導(dǎo)PKC調(diào)控ANNEXINA2絲氨酸磷酸化的分子機(jī)制研究姓名羅威申請學(xué)位級別碩士專業(yè)腫瘤病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師曹亞20070501碩士學(xué)位論文中文摘要磷酸化分子機(jī)制及其生物學(xué)功能的研究，有助于進(jìn)一步完善這條新的信號通路。為此我們確定了“髓病毒LMPL介導(dǎo)PKC調(diào)控ANNEXINA2絲氨酸磷酸化的分子機(jī)制研究”這一課題，采用LMPL陰性的CNEI和LMPI穩(wěn)定表達(dá)的CNEILMPI鼻咽癌細(xì)胞系為主要實驗材料。我們通過PKCKINASEACTIVITYASSAYKITNONRADIOACTIVE，STRESSGEN特異檢測經(jīng)過不同處理細(xì)胞的PKC激酶活性；同時使用抗絲氨酸抗體進(jìn)行IPWESTERNBLOTTING，檢測細(xì)胞內(nèi)ANNEXINA2絲氨酸磷酸化水平的變化。使用PKC激活劑TPA、阻斷LMPL表達(dá)的脫氧核酶DZL和PKC特異性活性抑制劑發(fā)現(xiàn)，PKC的活化狀態(tài)與ANNEXINA2絲氨酸磷酸化狀態(tài)的變化趨勢一致，因此得出結(jié)論LMPI確實可通過PKC調(diào)控ANNEXINA2絲氨酸磷酸化，進(jìn)一步確定了這條通路的存在。PKC屬于“IP3、DAG信號系統(tǒng)”，磷脂酰肌醇磷脂酶CPHOSPHOINOSITIDESPECIFICPHOSPHOLIPASEC，PIPLC是PKC的上游關(guān)鍵性激酶，PLC同功酶中以PLCB和PLC_Y的功能最為重要。使用特異針對PLCB和PLCY的激酶活性抑制劑U73122，并以結(jié)構(gòu)相似但無活性的小分子U73343和載體DMSO作為對照，研究PIPLC激酶對PKC激酶和PKC下游效應(yīng)蛋白ANNEXINA2絲氨酸磷酸化水平的影響。PIPLC活性小分子抑制劑U73122能降低兩種細(xì)胞系的PKC激酶活性，進(jìn)而降低PKC下游蛋白ANNEXINA2的絲氨酸磷酸化水平。證實了LMPL介導(dǎo)PIPLC調(diào)控PKC激酶活性和ANNEXINA2絲氨酸磷酸化水平。前期實驗通過使用特異針對PKCA和PKCB的抑制劑，證實了L卿L可能主要通過PKCQ和PKCB調(diào)控ANNEXINA2絲氨酸磷酸化。我們進(jìn)一步研究PKC亞型對ANNEXINA2絲氨酸磷酸化的調(diào)控機(jī)制。通過免疫共沉淀結(jié)合WESTERNBLOTTING，發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞內(nèi)PKCA和PKCB均可直接與ANNEXINA2結(jié)合；而且LMPL對PKCQ、PKCB的激酶活性都有上調(diào)的作用，但以對PKCB的調(diào)控更顯著。繼而我們在CNEI和CNEILMPI細(xì)胞中轉(zhuǎn)染PKCQ、PKC9特異性SHRNA質(zhì)粒，特異且有效地阻斷PKCQ、PKCB的蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在兩種細(xì)胞系中PKCQSHRNA和PKCBSHRNA質(zhì)粒均能有效降低PSERANNEXINA2水平，證實在CNEI和CNEILMPL細(xì)胞內(nèi)PKCD和PKCB兩種亞型均調(diào)控ANNEXINA2的絲氨酸磷酸化。進(jìn)一步我們進(jìn)行了重組活性激酶PKC和純化的GSTANNEXINA2之間的體外蛋白激酶Ⅱ

簡介：目的研制早期快速檢測抗腸道病毒71型（EV71）抗體的ELISA血清學(xué)診斷性試劑盒，評價其臨床應(yīng)用價值。方法將表達(dá)純化的EV71重組蛋白VP1作為包被抗原，建立EV71型手足口病間接ELISA法的血清學(xué)檢測方法。通過與逆轉(zhuǎn)錄（RT）PCR方法、EV71病毒分離試驗和微量血清中和試驗比較，評價抗EV71IGM和抗EV71IGG血清學(xué)診斷方法在EV71型手足口病的診斷價值，并進(jìn)行臨床考評。結(jié)果與RTPCR比較，抗EV71IGM敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為83％，85，81和87；抗EV71IGG敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為72，74，68和77。與EV71病毒分離方法比較，抗EV71IGM敏感度、特異度分別為85和97；抗EV71IGG敏感度、特異度分別為75和77。通過直線相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，抗EV71IGG抗體滴度和中和抗體滴度呈顯著正相關(guān)（R072，P結(jié)論利用VP1重組蛋白作為包被抗原，成功開發(fā)ELISA檢測人血清抗EV71IGM和抗EV71IGG抗體的診斷試劑盒。

簡介：目的探討新呼吸道病毒一人類偏肺病毒HUMANMETAPNEUMOVIRUS，HMPV在福州地區(qū)感染情況，比較HMPV與傳統(tǒng)呼吸道病毒一呼吸道合胞病毒RESPIRATYSYNCYTIALVIRUS，RSV所引起呼吸道感染的臨床特征及流行特點。方法2005年11月～2007年4月連續(xù)兩個冬春季節(jié)福建省立醫(yī)院門診和住院的部分呼吸道感染患者153例，男91例，女62例；兒童121例，成人32例，年齡最小27天，最大96歲。收集以上患者咽拭子標(biāo)本。用巢式逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)REVERSETRANIONPOLYMERASECHAINREACTION，RTPCR檢測HMPV的M基因。用RTPCR檢測RSV的N基因。部分PCR陽性產(chǎn)物進(jìn)行核苷酸序列測定，用DNAMAN軟件對基因序列分析。同時分析HMPV和RSV感染患者的臨床資料。結(jié)果1、153例呼吸道標(biāo)本中，HMPV陽性率210％32153，其中兒童22例，最小年齡為8個月，平均年齡為458±335歲；RSV陽性率170％26153，其中兒童17例，最小年齡為27天，平均年齡為265±265歲；兒童RSV感染的平均年齡低于HMPVP005。2005年～2006年冬春季節(jié)HMPV陽性率為258％，RSV陽性率為124％，HMPV陽性率高于RSVP005；2006年～2007年冬春季節(jié)HMPV陽性率為152％，RSV陽性率為304％，HMPV的陽性率高于RSV本課題為福建省自然科學(xué)基金資助項目編號F0310042P005。2、8例HMPV感染患者合并RSV感染，5例成人，3例兒童；5例為女性，3例為男性。3、在32例HMPV陽性患者中，患者臨床表現(xiàn)406％咳嗽，217％咽部紅腫，343％發(fā)熱，344％臨床診斷為支氣管炎和肺炎；26例RSV陽性患者中650％咳嗽，269％咽部紅腫，192％發(fā)熱，460％臨床診斷為支氣管炎和肺炎。4、分別隨機(jī)抽出的3例HMPV和2例RSV擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行核苷酸測序。3例HMPV產(chǎn)物的核苷酸序列完全一致，與GENBANK中文獻(xiàn)報導(dǎo)的HMPVM基因序列達(dá)85％～99％一致，氨基酸的同源性達(dá)93％～100％。對上述3例HMPV核苷酸序列作基因進(jìn)化樹分析顯示為單一基因型，均屬于以病毒株BJ1816為代表的A基因型，但發(fā)生了部分變異。2例RSV產(chǎn)物的核苷酸序列完全一致，與GENBANK中文獻(xiàn)報導(dǎo)中RSV病毒株BJ9149序列號DQ7805641部分N基因序列97％相似。結(jié)論1、HMPV與RSV均是福州地區(qū)兒童和成年人冬春呼吸道病毒感染的主要病原體。2、HMPV與RSV感染的臨床特征相似。主要癥狀為發(fā)熱、咳嗽、咽部紅腫；主要臨床診斷是支氣管炎或肺炎。3、本研究期間福州地區(qū)發(fā)現(xiàn)的HMPV為單一基因型，均屬于以病毒株BJ1816為代表的A基因型。4、HMPV與RSV可合并感染。

簡介：目的探討人巨細(xì)胞病毒HCMV感染與非特異性下腰痛NLBP的關(guān)系；HCMV活動性感染與NLBP患者腰痛加重病程、疼痛程度和內(nèi)皮素水平的相關(guān)性；走罐療法對HCMV感染引起的NLBP的作用及其機(jī)制。方法1選擇符合NLBP診斷標(biāo)準(zhǔn)的50例NLBP患者作NLBP組，與該組性別、年齡相似的36例健康正常人作健康對照組；NLBP組采用走罐治療，隔日一次，一共觀察2周。2NLBP組走罐前50例、后35例及36例健康對照組采用蘇木素一伊紅染色HE檢測尿沉渣中HCMV包涵體，采用聚合酶鏈反應(yīng)PCR對HCMV包涵體進(jìn)行鑒定；通過酶聯(lián)免疫吸附法ELISA測定血漿HCMV抗體工GM、IGG；采用放射免疫法檢測血漿中的內(nèi)皮素水平作為反應(yīng)腰部炎癥程度指標(biāo)。3NLBP患者走罐前、后使用VAS調(diào)查表評估患者腰痛程度；使用OSW調(diào)查表評估腰痛對患者軀體的功能影響結(jié)果1NLBP組走罐前HCMV包涵體、HCMVIGG和IGM抗體陽性率分別為12％、66％、22％，ET值為4738±881，明顯高于正常對照組PO05；IGG抗體陽性例數(shù)分別為26例、9例；內(nèi)皮素水平分別為4716±8883497±510，T值為947，POOL。結(jié)論1NLBP患者腰痛癥狀可能與HCMV活動性感染有關(guān)。2本研究發(fā)現(xiàn)成年人HCMV活動性感染尿標(biāo)本中病毒包涵體形態(tài)不典型。3走罐治療對活動性HCMV感染引起NLBP患者腰痛癥狀有治療效果。