簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文SEDL基因重組腺病毒的構(gòu)建及其對(duì)HFOB119細(xì)胞相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的研究姓名王旭榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)兒科學(xué)（內(nèi)分泌）指導(dǎo)教師熊豐2012052熒光顯微鏡證實(shí)重組腺病毒PAI5．SEDL成功導(dǎo)入圈C293包裝細(xì)胞。3收獲高滴度重組腺病毒PAD5．SEDL，病毒滴度約為4．3LOLLP糾瑚。4兩組細(xì)胞中均有SEⅨ，1MRNA及SEDLIN蛋白的表達(dá)。5實(shí)驗(yàn)組SⅡLIIL】ⅢA表達(dá)量為O．79士O．12與空白對(duì)照組O．1L土O．04相比明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO．01。6實(shí)驗(yàn)組SED】IIL蛋白表達(dá)量為O．93士O．30，與空白對(duì)照組O．12士O．04相比也明顯增加P如．01。緒論1成功構(gòu)建了攜帶SⅡL基因的重組腺病毒質(zhì)粒，收獲高滴度重組腺病毒PAD5．SEDL，并成功感染11FOBL．19細(xì)胞。2HFOBL．19細(xì)胞表達(dá)SEDLMRNA及SEDH蛋白。3攜帶SEDL基因的重組腺病毒AD5．SEIL可明顯增強(qiáng)HFOBL．19細(xì)胞SⅡLMRNA及SEDLIIL蛋白的表達(dá)。關(guān)鍵詞重組腺病毒；遲發(fā)性脊椎骨骺發(fā)育不良SEDL；轉(zhuǎn)染11FOBL．19細(xì)胞4

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多partⅰ.人巨細(xì)胞病毒重組蛋白的表達(dá)純化和免疫學(xué)性質(zhì)研究partⅱ.風(fēng)疹病毒igg抗體檢測(cè)方法的研究精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文NR2B轉(zhuǎn)基因犬構(gòu)建的部分基礎(chǔ)研究Ⅰ犬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)ⅡNR2B慢病毒的生產(chǎn)和鑒定姓名王麗潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師邢華李厚達(dá)20070601不與成熟率呈正線性相關(guān)；在體外培養(yǎng)的時(shí)間以72H為優(yōu)，卵丘細(xì)胞對(duì)成熟率有重要作用，COCS組成熟率明顯高于去顆粒細(xì)胞組15，56％VS3．13％。NR2B蛋白與哺乳動(dòng)物的突觸性、學(xué)習(xí)記憶、痛覺、神經(jīng)系統(tǒng)疾病有關(guān)，因此有必要建立NR2B轉(zhuǎn)基因高等動(dòng)物模型來(lái)迸一步研究該亞單位的作用。本實(shí)驗(yàn)室正承擔(dān)著NR2B轉(zhuǎn)基園犬的構(gòu)建項(xiàng)目，放本實(shí)驗(yàn)將為該項(xiàng)目的進(jìn)行提供NR2B慢病毒，用其高效感染胚胎獲得轉(zhuǎn)基因犬。在本研究中，我們采用脂質(zhì)體共轉(zhuǎn)染的方法，在293T細(xì)胞中生產(chǎn)NR2B慢病毒，并采取超速離心的方法，對(duì)收獲的慢病毒顆粒進(jìn)行濃縮、純化和滴度測(cè)定，獲得病毒最高滴度達(dá)1．2X108TU／ML；將生產(chǎn)的慢病毒感染PCI2細(xì)胞，經(jīng)抗性篩選得到穩(wěn)定傳代細(xì)胞，提取其RNA，經(jīng)RT．PCR能檢測(cè)到目的片段，采用WESTERNBLOTTING進(jìn)一步驗(yàn)證，成功表達(dá)NR2B蛋白，說明該慢病毒可攜帶NR2B基因轉(zhuǎn)入PCI2，并穩(wěn)定表達(dá)NR2B蛋白。這為該慢病毒在犬胚胎上的轉(zhuǎn)染和最終表達(dá)提供了一定依據(jù)?？傊?，本研究在體外成功培養(yǎng)的成熟卵母細(xì)胞和經(jīng)生產(chǎn)鑒定的慢病毒，都為我們的后續(xù)工作NR2B轉(zhuǎn)基因犬的構(gòu)建奠定了良好的基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞犬；卵母細(xì)胞；成熟培養(yǎng)；NR2B慢病毒

簡(jiǎn)介：廣西師范學(xué)院碩士學(xué)位論文廣西師范學(xué)院碩士學(xué)位論文

簡(jiǎn)介：I暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文IRF5慢病毒干擾載體構(gòu)建及巨噬細(xì)胞慢病毒干擾載體構(gòu)建及巨噬細(xì)胞J774A1穩(wěn)定沉默細(xì)胞系的建立穩(wěn)定沉默細(xì)胞系的建立CONSTRUCTIONOFLENTIVIRALINTERFERENCEVECTOROFIRF5ANDESTABLISHMENTOFMACROPHAGESJ774A1CELLSWITHIRF5GENESILENCE作者姓名麥莉指導(dǎo)教師姓名及學(xué)位、職稱韋建瑞碩士主任醫(yī)師學(xué)科、專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)心血管病學(xué)論文提交日期20160410論文答辯日期20160601答辯委員會(huì)主席論文評(píng)閱人學(xué)位授予單位和日期暨南大學(xué)201607暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文IRF5慢病毒干擾載體構(gòu)建及巨噬細(xì)胞J774A1穩(wěn)定沉默細(xì)胞系的建立I中文摘要中文摘要目的構(gòu)建IRF5慢病毒干擾載體以及建立IRF5基因沉默巨噬細(xì)胞J774A1穩(wěn)定細(xì)胞系方法1．構(gòu)建攜帶IRF5SHRNA的慢病毒干擾質(zhì)粒載體，進(jìn)行病毒包裝后轉(zhuǎn)染J774A1巨噬細(xì)胞，建立穩(wěn)定IRF5基因沉默的J774A1/IRF5巨噬細(xì)胞系。首先利用OLIGODESIGNER30化學(xué)合成方法得到4種IRF5SHRNA（IRF5MUS649、IRF5MUS1059、IRF5MUS1322、IRF5MUS1578），分別將4種IRF5SHDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增后與目的載體進(jìn)行酶切，酶切純化后的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化細(xì)菌感受態(tài)細(xì)胞。對(duì)陽(yáng)性克隆進(jìn)行酶切鑒定以及測(cè)序，以證實(shí)目的基因已經(jīng)定向連接目的載體，比對(duì)準(zhǔn)確的即為構(gòu)建成功的目的基因慢病毒表達(dá)質(zhì)粒載體。大量質(zhì)粒抽提后利用293T細(xì)胞進(jìn)行病毒包裝，檢測(cè)并標(biāo)定各病毒液滴度。2．使用LV3NC（陰性對(duì)照）、LV3649、LV31059、LV31322、LV31578病毒原液分別對(duì)正常J774A1巨噬細(xì)胞株進(jìn)行侵襲測(cè)試，通過熒光表達(dá)計(jì)數(shù)挑選最佳的病毒侵襲濃度；用上述4種病毒液分別對(duì)J774A1細(xì)胞浸染，對(duì)浸染后各組細(xì)胞進(jìn)行分組，并設(shè)立空白對(duì)照組，從浸染細(xì)胞中提取RNA及蛋白，用RTPCR和WESTERNBLOT方法進(jìn)行檢測(cè)，明確實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞IRF5表達(dá)水平是否有明顯下降；另外，測(cè)試PUROMYCIN對(duì)正常J774A1巨噬細(xì)胞最小致死濃度，以挑選最佳最低的細(xì)胞篩選濃度。結(jié)果1．通過慢病毒干擾載體介導(dǎo)成功構(gòu)建4種攜帶IRF5SHRNA的慢病毒質(zhì)粒載體，設(shè)立陰性對(duì)照NC，分別進(jìn)行病毒包裝后浸染J774A1巨噬細(xì)胞，建立IRF5基因沉默的巨噬細(xì)胞株J774A1細(xì)胞模型。2．通過RTPCR和WESTERN‐BLOT檢測(cè)，結(jié)果與空白對(duì)照組對(duì)比，J774A1細(xì)胞用LV31059和LV31322病毒液進(jìn)行浸染，浸染細(xì)胞內(nèi)IRF5基因表達(dá)量明顯

簡(jiǎn)介：1828803南開大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解南開大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意如下各項(xiàng)內(nèi)容按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存學(xué)位論文的印刷本和電子版，并采用影印、縮印、掃描、數(shù)字化或其它手段保存論文；學(xué)校有權(quán)提供目錄檢索以及提供本學(xué)位論文全文或者部分的閱覽服務(wù)；學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國(guó)家有關(guān)部門或者機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版；在不以贏利為目的的前提下，學(xué)?？梢赃m當(dāng)復(fù)制論文的部分或全部?jī)?nèi)容用于學(xué)術(shù)活動(dòng)。學(xué)位敝儲(chǔ)繇值約砒年鄉(xiāng)月巧日經(jīng)指導(dǎo)教師同意，本學(xué)位論文屬于保密，在∥年解密后適用＼本授權(quán)書。指導(dǎo)教師簽名協(xié)位學(xué)位論文作者簽名廈鈞解密時(shí)間夠侈年鄉(xiāng)月吻日各密級(jí)的最長(zhǎng)保密年限及書寫格式規(guī)定如下摘要摘要I型單純皰疹病毒HERPESSIMPLEXVIRUSTYPEI，HSV1是一種國(guó)在人群中感染率極高的DNA病毒。初次感染后，HSV1通常會(huì)在人體神經(jīng)細(xì)胞中潛伏。病毒會(huì)在一些條件下反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致死亡率極高的病毒性腦炎或者其它病毒如HW1的超感染。HSV1干擾宿主后會(huì)激活先天性免疫，其中包括I型干擾素的產(chǎn)生。干擾素會(huì)及激活許多重要的干擾素激活基因的表達(dá)，其中包括一個(gè)重要的抗病毒蛋白一雙鏈RNA依賴的蛋白質(zhì)激酶PKR。同時(shí)HSV1病毒復(fù)制過程中會(huì)產(chǎn)生病毒DSRNA，并進(jìn)一步激活PKR。被激活的PKR能夠一個(gè)重要的蛋白翻譯起始調(diào)節(jié)因子ELF一20【磷酸化進(jìn)而終止包括病毒蛋白翻譯起始在內(nèi)的所有蛋白翻譯起始。HSV一1的7134．5基因編碼一個(gè)重要的病毒因子_ICP34．5。ICP34．5對(duì)于病毒的致病性以及通過抵御干擾素誘導(dǎo)的宿主抗病毒應(yīng)答非常重要。HSV一1F毒株的ICP34．5通過與宿主的蛋白磷酸酶1PPL結(jié)合，介導(dǎo)EIF一2A的去磷酸化，使蛋白合成繼續(xù)進(jìn)行，因而逆轉(zhuǎn)PKR的作用和宿主抗病毒功能。ICP34．5結(jié)構(gòu)上分為三個(gè)區(qū)域。N端160個(gè)氨基酸負(fù)責(zé)病毒從細(xì)胞核中釋放成熟以及抵御宿主抗病毒的自噬AUTOPHAGY，然后是由10個(gè)三聯(lián)氨基酸ALATHRPRO重復(fù)構(gòu)成的區(qū)域影響病毒的神經(jīng)侵染能力，最后是由73個(gè)氨基酸構(gòu)成的羧基端。其中羧基端對(duì)于ICP34．5介導(dǎo)的EIF～2CC脫磷酸化非常重要。該區(qū)域首先包括一個(gè)經(jīng)典的PPL結(jié)合模序193195位氨基酸位于該區(qū)域的，并且該模序?qū)τ贗CP34．5脫磷酸化功能必不可少。除此之外有一個(gè)假想的效應(yīng)區(qū)域248263位氨基酸在ICP34．5的脫磷酸化過程中的作用并不清楚。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在ICP34．5羧基端的效應(yīng)區(qū)有一個(gè)精氨酸富集的區(qū)域，其中的249、251以及255位點(diǎn)的精氨酸位點(diǎn)高度保守。將255位點(diǎn)精氨酸突變?yōu)楸彼?、天冬氨酸或者賴氨酸?duì)ICP34．5的功能沒有太大影響，但將249、251與255位的精氨酸突變?yōu)楸彼峄蛘邘喾措姾傻陌被釙r(shí)，ICP34．5的脫磷酸化能力大大減弱。同時(shí)這種效應(yīng)與減弱的HSV1感染后的細(xì)胞內(nèi)EIF一2A的磷酸化水平、降低的病毒蛋白合成以及病毒蛋白復(fù)制非常好的一致。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，ICP34．5的這些突變體于PPL的結(jié)合能力與前文所述的現(xiàn)象有一定的一致性。我們推斷這幾給位點(diǎn)的精氨酸對(duì)于精確調(diào)節(jié)ICP34．5與PPL的結(jié)合發(fā)揮了重要T

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文GII4諾如病毒全基因組共發(fā)生網(wǎng)絡(luò)諾如病毒全基因組共發(fā)生網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和分析的構(gòu)建和分析研究生姓名林強(qiáng)指導(dǎo)教師姓名、職稱封少龍副教授段招軍研究員學(xué)科、專業(yè)名稱勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)研究方向環(huán)境因素的健康效應(yīng)及分子機(jī)制研究2012年5月目錄縮寫符號(hào)與相關(guān)軟件I中文摘要錯(cuò)誤錯(cuò)誤未定義書簽。未定義書簽。ABSTRACT31引言511病毒性胃腸炎512諾如病毒513全基因組共發(fā)生網(wǎng)絡(luò)模型112全基因組共發(fā)生網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建1221序列1222主要方法1323網(wǎng)絡(luò)相關(guān)特征及共進(jìn)化參數(shù)1524文章中用到的主要代碼173結(jié)果1931病毒核苷酸替代1932共發(fā)生網(wǎng)絡(luò)的基本特征1933網(wǎng)絡(luò)連接度2034病毒進(jìn)化相關(guān)的基因片段內(nèi)部和片段之間的相互作用2235正向選擇氨基酸位點(diǎn)2336共發(fā)生核苷酸模塊24

簡(jiǎn)介：碩碩碩碩士士士士學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)位位位位論論論論文文文文題題題題目目目目EE卡明斯視覺詩(shī)的認(rèn)知文體學(xué)研究研研研研究究究究生生生生范仿靜專專專專業(yè)業(yè)業(yè)業(yè)英語(yǔ)語(yǔ)言文學(xué)指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師于學(xué)勇教授完成日期完成日期完成日期完成日期2013年10月DISSERTATIONSUBMITTEDTOHANGZHOUDIANZIUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERASTUDYONCOGNITIVESTYLISTICSINEECUMMINGS’SVISUALPOETRYCANDIDATEFANFANGJINGSUPERVISORPROFYUXUEYONGOCTOBER，2013

簡(jiǎn)介：LILLLLLIIIIIIIIIIILLLY3277541多之京倆和醋學(xué)院中國(guó)蔚孽甜辱既博士研究生學(xué)位論文北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究生院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生畢業(yè)論文目錄目錄?????????????????????????????????一1中英文縮略寫?????????????????????????????．4第一部分CD45異構(gòu)體對(duì)HIV1GPL20蛋白介導(dǎo)T細(xì)胞凋亡的影響??????．．5中文摘要?????????????????????????????????5ABSTRACT?????????????????????????????????????????????7引言??????????????????????????????????????????????．9材料與方法????????????????????????????????111．材料?????????????????????????????????????????????112．方法?????????????????????．????????????????????????132．1JURKAT和J45．01細(xì)胞表面CD45表達(dá)的流式檢測(cè)???????????????132．2GPL20誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)?????????????????????????142．3細(xì)胞調(diào)亡的流式檢測(cè)??????????????????????????．．142．4質(zhì)粒提取和測(cè)序鑒定??????????????????????????．．142．5慢病毒包裝并感染靶細(xì)胞????????????????????????一152．6CD45異構(gòu)體穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的流式檢測(cè)??????????????????162．7WESTERNBLOT????????????????????????????????????????．1628O．糖基化抑制實(shí)驗(yàn)???????????????????????????．．182．9LCK活性抑制實(shí)驗(yàn)???????????????????????????．．182．10統(tǒng)計(jì)學(xué)分析??．????????????????????????????．19實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????????????201．JURKAT和J45．01細(xì)胞表面CD45表達(dá)量的檢測(cè)?????????????????．．202．CD45調(diào)節(jié)GPL20介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡??????????????????????．202．1GPL20對(duì)JURKAT和J45．01凋亡的影響???????????????????．．202．2GPL20濃度對(duì)細(xì)胞凋亡的影響???????????????????????2223GPL20不同抗體對(duì)細(xì)胞凋亡的影響?????????????????????233．CD45砒VCD45RB／CD45RC／CD45毗墟C／CD45RD．J45．01穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建??????233．1CD45質(zhì)粒提取鑒定???????????????????????????2432陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染觀察結(jié)果???????????????????????一243．3CD45慢病毒感染JURKAT細(xì)胞鑒定結(jié)果??????????????????．243．4CD45異構(gòu)體的表達(dá)鑒定??????????????????．??????254．CD45異構(gòu)體調(diào)節(jié)GPL20誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡能力比較?????????????????261

簡(jiǎn)介：福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文C3D在人體正常肝組織和乙型病毒性肝炎肝硬化中GLISSONS囊與纖維化區(qū)域表達(dá)的研究姓名黃海建申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師鄭智勇201104中文摘要中文摘要2肝150例，其中HBC組織76例，HBCHC的非癌處肝組織74例；肝癌分型為肝細(xì)胞癌70例，肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌4例，所有標(biāo)本分別行HE、網(wǎng)狀纖維MASSON染色，HBSAG、HBCAG、IGG、IGM、IGA、C3D、C1Q及FIB免疫組化染色，其中10例加做CD21免疫組化染色?！窘Y(jié)果】【結(jié)果】1正常肝組織肝包膜纖維層、GC及肝靜脈外膜有不同程度的C3D沉積，主要在較致密的膠原纖維束上；83（50/60）病例GC有C3D強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，C3D陽(yáng)性膠原纖維束圍繞小葉間動(dòng)脈和小葉間靜脈的周圍以及整個(gè)匯管區(qū)外圍。2正常肝組織比較結(jié)果2170歲組、320歲組C3D在肝包膜纖維層、GC、小動(dòng)脈內(nèi)膜、肝靜脈外膜、肝血竇內(nèi)皮的表達(dá)均有顯著差異；3歲組C3D呈陰性表達(dá)。2170歲組與320歲組C3D的表達(dá)顯著高于3歲組（P0001）；且2170歲組GC與肝包膜C3D的表達(dá)顯著高于320歲組（P005）。3CIEM的C3D染色膠體金顆粒疏密不均地散在沉積于GC膠原纖維之間，但并沒有與膠原纖維緊密結(jié)合，小動(dòng)脈內(nèi)膜及肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞上也有少量沉積；CIEM的IGG、IGM、IGA、C1Q及FIB染色GC均陰性。4正常脾組織脾包膜纖維層、脾小梁纖維鞘有C3D沉積（30/40例，75），主要沉積在較致密的膠原纖維束上；小梁動(dòng)脈和脾小體中央動(dòng)脈內(nèi)膜亦呈C3D強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)（30/40例，75）；各種淋巴組織中淋巴濾泡的生發(fā)中心明區(qū)C3D呈不規(guī)則網(wǎng)線狀沉積（61/73例，8356）。5正常脾組織組間比較2170歲組、320歲組C3D在脾包膜纖維層、脾小梁纖維鞘、小梁動(dòng)脈內(nèi)膜、中央動(dòng)脈內(nèi)膜、淋巴濾泡的表達(dá)有顯著差異；3歲組C3D呈陰性表達(dá)。2170歲組、320歲組C3D的表達(dá)顯著高于3歲組（P0001）。6150例肝硬化組織6067（91/150）的FS呈C3D陽(yáng)性，6333（95/150）GC呈C3D陽(yáng)性。C3D陽(yáng)性的FS無(wú)水腫、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，與C3D陽(yáng)性的GC纖維束在結(jié)構(gòu)上互相延續(xù)。C3D陰性的FS顯示水腫和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且與GC在結(jié)構(gòu)上沒有延續(xù)性。7HBC和HBCHC兩組中，大結(jié)節(jié)型肝硬化FS與GC的C3D陽(yáng)性平均分均高于小結(jié)節(jié)型肝硬化，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0005）?；旌辖Y(jié)節(jié)型肝硬化的FS與GC的C3D陽(yáng)性平均分介于大、小結(jié)節(jié)型肝硬化之間，差別均有統(tǒng)計(jì)

簡(jiǎn)介：洳；≥．碩士學(xué)位論文⑧論文題目BBS成癮對(duì)高級(jí)認(rèn)知過程的影響研究作者姓名指導(dǎo)教師汪玨許百華教授學(xué)科專業(yè)應(yīng)用心理學(xué)所在學(xué)院理學(xué)院浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文BBS成癮對(duì)高級(jí)認(rèn)知過程的影響研究ABSTRACT111EPROBLEMOFINTERACTADDICTIONFORCOLLEGESTUDENTSISBECOMINGARESEARCHHOTSPOT．BASEDONRELATEDRESEARCHABROAD,THISSTUDYUSEDLABEXPERIMENTSTOEXPLORETHEEFFECTOFBBSADDICTIONONARTIFICIALGRAMMARLEARNING，INORDERTOPROVIDENEWCUESFORBETTERUNDERSTANDINGOFBBSADDICTION’SCOGNITIVEMECHANISM．THESTUDYWASCOMPOSEDOFTWOPARTS．INTHEFIRSTPARTOFTHISSTUDY,THEBBSADDICTIONSCALEFORCOLLEGESTUDENTSWASESTABLISHED,WHICHCONSISTSOFFOURFACTORS，COMPULSIVEU∞OFBBS．WITHDRAWALSYMPTOMSOFBBSADDICTION,INTERPERSONALANDHEALTHRELATEDPROBLEMSOFBBSADDICTIONANDTIMEMANAGEMENTPROBLEMS．ANDASTANDARDTODEFINEBBSADDICTIONISESTABLISHEDFORTHESCALE．INTHESECONDPART,THESTUDYUSEDTHEPARADIGMOFARTIFICIALGRAMMARLEARNINGTOINVESTIGATEHOWBBSRELATEDINFORMATIONWOULDAFFECTADVANCEDCOGNITIVEPROCESSESOFBBSADDICTEDSTUDENTS．111ERESULTSSUGGESTEDTHAT，F(xiàn)IRST，F(xiàn)ORBOTHADDICTEDANDNONADDICTED．THESENSIBILITYANDTHERESPONSEBIASWEREBOMLOWERFORSEQUENCES1ⅣIMHIGHCHUNKSTRENGTH,ANDTHEVARIABLEOFSEQUENCESTRENGTHHADNOINTERACTIONEFFECTWITHTHEOTHERTWOVARIABLES．SOANINTERRUPTIONPROCESSOFTHECONCRETEINFORMATIONINARTIFICIALGRAMMARLEARNINGEXISTED,ANDITSEFFECTWASNOTDESTROYEDBYANYOFTHERESEARCHTREATMENTS．SECOND,SENSITIVITYOFTHEADDICTEDWASLOWERWHENTHESEQUENCESYMBOLSWEREBBSRELATED，ANDNOSUCHEFFECTEXISTEDFORTHENONADDICTED,WHICHMEANSBBSRELATEDINFORMATIONWILLDECREASETHELEARNINGPERFORMANCEOFTHEADDICTED．THIRD,SENSITIVITYOFTHEADDICTEDWASLOWERWHENTHESEQUENCESYMBOLSWEREBBSRELATEDPICTURESTHANWEREBBSRELATEDWORDS，ANDNOSUCHEFFECTEXISTEDFORTHENONADDICTED,WHICHMEANSBBSRELATEDPICTURESDECREASESTHELEARNINGPERFORMANCEOFTHEADDICTEDMORETHANBBSRELATEDWORDDOESKEYWORDSCOLLEGESTUDENT,BBSADDICTION,ARTIFICIALGRAMMARLEARNING,ADVANCEDCOGNITIVEPROCESSII

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文ADCMVHSP70腺病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)大鼠移植肝的保護(hù)作用姓名秦磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)普通外科指導(dǎo)教師錢海鑫20040401坐坐塑￡豎堅(jiān)生堡墮童冀壁墮塑堡星苧墮盔墮整墊壁墮堡塑堡旦±皇堡鐾第三部分目的構(gòu)建重組腺病毒載體AD．CMVHSP70，將人熱休克蛋白70基闋置丁MCMV啟動(dòng)于控制之F。方法J千J酶切法將人熱休克蛋白701≯3全長(zhǎng)．CDNA插入腺病毒穿梭質(zhì)粒載體PDC312CMV的彰克隆位點(diǎn)。鑒定、篩選包含目的基因的正確克隆，將其與腺病毒骨架質(zhì)粒載體PBGH△E3一起用LIPOFECTAMINE共轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中，使其在293細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行位點(diǎn)特異性重組及包裝。用酶切法十和IPCR法鑒定后，在293細(xì)胞中大量擴(kuò)增，密度梯度離心純化。結(jié)果產(chǎn)物經(jīng)鑒定后為包含有HSP70全長(zhǎng)序列的腺病毒載體，HSP70基因位于其MCMV啟動(dòng)子控制之下。經(jīng)擴(kuò)增純化后濃度為3．010?PFU／MT，共2ML。結(jié)論CRE酶介導(dǎo)的LOXP位點(diǎn)特異性重組是一種簡(jiǎn)單、高效的腺病毒載體構(gòu)建方法，具有構(gòu)建速度快、成功率高、準(zhǔn)確率高等特點(diǎn)。第四部分目的觀測(cè)我們構(gòu)建的AD．CMVHSP70腺病毒載體在大鼠體內(nèi)的表達(dá)及其對(duì)大鼠原位肝臟移植中移植肝的保護(hù)作用。方法術(shù)前24D“時(shí)將AD．CMVHSP70通過門靜脈注入實(shí)驗(yàn)組供體大鼠肝臟，3．0109／只。供肝獲取后將其保存在40C的乳酸鈉林格氏液中4小時(shí)，二袖套法行原位肝臟移植術(shù)。門靜脈復(fù)流后觀測(cè)兩組受體膽汁分泌情況，術(shù)后3小時(shí)處死受體大鼠，檢測(cè)血漿中AST、ALT、LDH水平，切取肝臟組織，WESTERNBLOTTING檢測(cè)HSP70的表達(dá)，免疫組化法檢測(cè)HSP70、TNF．A的表達(dá)，TUNEL法檢測(cè)肝臟組織中細(xì)胞的凋亡水平。結(jié)果WESTEMBLOTTING顯示實(shí)驗(yàn)組肝臟組織高表達(dá)HSP70，而對(duì)照組僅痕量表達(dá)。術(shù)厲34,時(shí)，實(shí)驗(yàn)組膽汁分泌量多于對(duì)照組，而AST、ALL’、LDH水平明顯低于對(duì)照組。免疫組化顯示實(shí)驗(yàn)組肝臟中HSP70表達(dá)明顯，而對(duì)照組則為陰性。對(duì)照組TNF．A免疫組化染色為陽(yáng)性，實(shí)驗(yàn)組為陰性。實(shí)驗(yàn)組凋亡水平明顯低于對(duì)照組。結(jié)論我們構(gòu)建的AD．CMVHSP70可以在大鼠體內(nèi)有效表達(dá)。經(jīng)門靜脈注射的方法3XLO々只可以有效的將目的基因轉(zhuǎn)染入大鼠肝臟。高表達(dá)HSP70的移植肝對(duì)缺血再灌注損傷具有較強(qiáng)的耐受能力，其作用機(jī)制可能是通過抑皋TJTNFO表達(dá)、抑制肝細(xì)胞的凋亡發(fā)生引起的。關(guān)鍵詞肝移植大鼠缺血再灌注損傷基因轉(zhuǎn)染熱休克蛋白70．U．作者秦磊導(dǎo)師錢海鑫教授

簡(jiǎn)介：1碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目ADHD兒童視覺空間工作記憶的認(rèn)知加工階段特點(diǎn)研究生姓名趙宇指導(dǎo)教師姓名楊雙專業(yè)名稱發(fā)展與教育心理學(xué)研究方向兒童發(fā)展障礙論文提交日期2014年4月

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文ADHO1腺病毒載體對(duì)肝細(xì)胞體外缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用姓名汪慧訪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)普外科指導(dǎo)教師錢海鑫20070401AD．HOI腺病毒載體對(duì)肝細(xì)胞體外缺氧．復(fù)氧損傷的保護(hù)作用中文摘要氧損傷防御能力。結(jié)果肝細(xì)胞轉(zhuǎn)染該腺病毒后，HO．1MRNA轉(zhuǎn)錄水平與對(duì)照組相比明顯升高；熒光顯微鏡觀察顯示該腺病毒同時(shí)攜帶的綠熒光蛋白表達(dá)明顯；流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示正常肝細(xì)胞只表達(dá)極少量的HO．1，而轉(zhuǎn)染該AD．HO1后表達(dá)量明顯提高M(jìn)TT法檢測(cè)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染HO1后的肝細(xì)胞在缺氧一復(fù)氧損傷后存活率明顯高于轉(zhuǎn)染空載體組。結(jié)論已構(gòu)建的腺病毒載體在體外能有效的轉(zhuǎn)染人正常肝細(xì)胞株；腺病毒攜帶的人血紅素氧合酶．1和綠熒光蛋白在肝細(xì)胞內(nèi)能有效地轉(zhuǎn)錄及表達(dá)；轉(zhuǎn)染HO1后的肝臟細(xì)胞在體外對(duì)缺氧一復(fù)氧損傷的抵御力在一定程度上有了提高．關(guān)鍵詞肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染腺病毒血紅素氧合酶一IⅡ作者汪慧訪導(dǎo)師錢海鑫