簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多編碼流感病毒核蛋白和基質(zhì)蛋白DNA疫苗的免疫保護(hù)作用研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的通過觀察正常小鼠在給予“芪香”氣霧劑后體內(nèi)T淋巴細(xì)胞增殖功能、血清細(xì)胞因子IL2、IFN含量的變化，初步探討“芪香”氣霧劑抗流感病毒的作用。方法為了深入探討“芪香”氣霧劑的抗病毒效果，給臨床提供新藥，本文從體外實(shí)驗(yàn)與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩方面對(duì)其抗病毒進(jìn)行了研究。體外實(shí)驗(yàn)采用雞胚尿囊血凝法檢測(cè)“芪香”氣霧劑對(duì)流感病毒A3的作用，并與常用抗病毒中藥板藍(lán)根作了對(duì)比。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)是將健康小鼠隨機(jī)分為4組生理鹽水對(duì)照組，環(huán)磷酰胺組、環(huán)磷酰胺加藥物組、藥物組。灌胃7天后，分別用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定“芪香”氣霧劑對(duì)小鼠脾細(xì)胞IL2產(chǎn)生的影響；利用流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)“芪香”氣霧劑對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8、CD3CD8陽(yáng)性細(xì)胞百分率的影響；用微量細(xì)胞病毒抑制法，檢測(cè)干擾素的變化情況。結(jié)果“芪香”氣霧劑能直接抑制流感病毒A3的增殖，與對(duì)照組比較P＜001；“芪香”氣霧劑能明顯提高IL2的產(chǎn)生P＜001；顯著提高CD3、CD4、CD4CD8陽(yáng)性細(xì)胞百分率P＜001，但對(duì)CD8陽(yáng)性細(xì)胞百分率則有下降趨勢(shì)。“芪香”氣霧劑能生成一定量的干擾素P＜001。在抑菌實(shí)驗(yàn)中，其能抑制金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌的生長(zhǎng)，抑菌效果中等。結(jié)論“芪香”氣霧劑具有顯著的抗病毒及抗菌作用。

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文鼠頸動(dòng)脈狹窄導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究姓名冉鴻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師陳康寧20060501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文縮寫詞VCIVDVCINDCINDADCSHAIL．6CRPSODMDAEI乇PICAPFAECALPSTNF．ABMPMMPSICMAASMHCGSHGPX主要英文縮寫一覽表英文名稱VASCULARCOGNITIVEIMPARIMENTVASCULARDEMENTIAVASCULARCOGNITIVEIMPARIMENTNODEMENTIACOGNITIVEIMPARIMENTNODEMENTIAALZHEIMER’SDISEASECANADIANSTUDYOFHEALTHANDAGINGINTERLEUKIM6CREACTIVEPROTEINSUPEROXIDEDISMUTASEMALONALDEHYDEEVENTRALATEDPOTENTIALSINTERNALCAROTIDARTERYPARAFORMALDEHYDEEXTERNALCAROTIDARTERYLIPOPOLYSACCHARIDETUMORNECROSISFACTORALPHABONEMORPHOGENETICPROTEINSMATRIXMETALLOPROTEINASESINTERCELLULARADHESIONMOLECULEATHEROSCLEROSISMAJORHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEX7GLUTAMYLCYSTEINYLGLYCINE】GLUTATHIONEPEROXIDASE中文名稱血管性認(rèn)知障礙血管性癡呆非癡呆血管性認(rèn)知障礙非癡呆認(rèn)知障礙阿爾茨海默病加拿人健康與老化研究自細(xì)胞介素．6C反應(yīng)蛋白超氧化物歧化酶丙二醛事件相關(guān)電位頸內(nèi)動(dòng)脈多聚甲醛頸外動(dòng)脈脂多糖腫瘤壞死因子骨形成發(fā)生蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶細(xì)胞間黏附分子動(dòng)脈粥樣硬化主要組織相容性復(fù)合物Y一谷氨酰半胱氨酸甘氨酸谷胱甘肽過氧化物酶

簡(jiǎn)介：胰腺癌是一種高度惡性的腫瘤，其發(fā)生發(fā)展與多種基因異常有關(guān)。胰腺癌手術(shù)切除率低，傳統(tǒng)的治療效果差，有待于探討新的治療方法。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，凋亡抑制在胰腺癌的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，因此，通過增加細(xì)胞內(nèi)促凋亡蛋白的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是胰腺癌治療的有效措施之一。PUMA是2001年發(fā)現(xiàn)的具有較強(qiáng)的促凋亡作用的P53下游基因，是公認(rèn)的抑癌基因。PUMA在許多惡性腫瘤中表達(dá)缺失或低表達(dá)，PUMA低表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，并且恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)PUMA表達(dá)具有明顯的腫瘤生長(zhǎng)抑制作用。本課題旨在探討PUMA在胰腺癌中的表達(dá)及意義及PUMA基因在胰腺癌中的作用。第一部分、PUMA在胰腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義目的研究胰腺癌組織中PUMA蛋白表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系，初步探討PUMA在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法應(yīng)用免疫組化ENVISION方法檢測(cè)60例胰腺導(dǎo)管癌組織石蠟標(biāo)本中PUMA，BCL2和蛋白表達(dá)以及19例正常胰腺組織石蠟標(biāo)本中PUMA蛋白表達(dá)，RTPCR、WESTERNBLOTTING檢測(cè)進(jìn)一步證實(shí)免疫組化的檢測(cè)結(jié)果。TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡，分析PUMA表達(dá)與臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系以及PUMA與AI、P53、BCL2表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果PUMA在胰腺癌組織中的陽(yáng)性率為30（1860），低于正常胰腺組織90（1719），差異有顯著性（P0002）；RTPCR、WESTERNBLOTTING檢測(cè)證實(shí)了免疫組化結(jié)果；PUMA表達(dá)與腫瘤大小（P005）；在PUMA陽(yáng)性和陰性表達(dá)的腫瘤組織中，細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）分別1763±627和1344±586，差異有顯著性（P005）；在PUMA陰性表達(dá)的腫瘤組織中的細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯低于正常胰腺組織（1612±572），差異有顯著性（P005）；P53和BCL2在胰腺癌中的表達(dá)率分別為467（2860）和417（2560），PUMA與P53和BCL2表達(dá)分別有顯著的負(fù)相關(guān)性（P0013和P0046）。結(jié)論胰腺癌細(xì)胞凋亡抑制及腫瘤轉(zhuǎn)移與PUMA蛋白表達(dá)缺失有關(guān)，PUMA可能是胰腺癌預(yù)后的判斷指標(biāo)和基因治療的靶點(diǎn)。第二部分、胰腺癌細(xì)胞CAR受體表達(dá)與5型腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的關(guān)系目的通過體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探討胰腺癌腫瘤細(xì)胞CAR表達(dá)水平與腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的關(guān)系，為腺病毒相關(guān)的生物制劑在胰腺癌患者個(gè)體化應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法先將載有綠色熒光蛋白的AD5型腺病毒（ADGFP）以100MOI分別感染人胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)SPC1、CAPAN1、BXPC3、PANC1細(xì)胞6～96H，再以20～1000MOI的ADGFP感染ASPC1、CAPAN1、BXPC3、PANC1細(xì)胞24H。感染結(jié)束后分別通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ADGFP在不同細(xì)胞系的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。采用WESTERNBLOTTING、免疫組化方法檢測(cè)這些細(xì)胞中CAR的表達(dá)水平。將CAPAN1、BXPC3細(xì)胞分別接種于裸鼠背部，接種細(xì)胞數(shù)分別為5106，建立裸鼠移植瘤模型。待腫瘤長(zhǎng)徑達(dá)10MM時(shí)，在裸鼠移植瘤內(nèi)注射ADGFP1108PFU，試驗(yàn)分2組，第一組114天內(nèi)動(dòng)態(tài)觀察腫瘤內(nèi)熒光的變化，第二組3天處死裸鼠，剖取瘤組織，熒光顯微鏡觀察冰凍切片中GFP的表達(dá)情況以判定腺病毒在瘤體內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，同時(shí)WESTERNBLOT法檢測(cè)瘤組織內(nèi)的CAR表達(dá)水平。結(jié)果4種細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率在24小時(shí)最高，ASPC1、CAPAN1細(xì)胞在MOI50時(shí)，轉(zhuǎn)染效率近100，PANC1細(xì)胞在200MOI時(shí)轉(zhuǎn)染效率接近100，而BXPC3在MOI1000時(shí)，轉(zhuǎn)染效率為60。各種細(xì)胞的CAR蛋白表達(dá)水平與腺病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率呈正相關(guān)。在注射ADGFP的裸鼠移植瘤組織中，3天可見CAPAN1瘤組織內(nèi)有明顯的綠色熒光，而BXPC3瘤組織內(nèi)熒光強(qiáng)度少于前者；14天后熒光完全消失。冰凍切片發(fā)現(xiàn)CAPAN1細(xì)胞內(nèi)明顯點(diǎn)狀熒光，而BXPC3細(xì)胞熒光較弱。CAR在CAPAN1移植瘤組織的表達(dá)高于BXPC3移植瘤組織，表明瘤體內(nèi)CAR表達(dá)水平與ADGFP的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也呈正相關(guān)。結(jié)論體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均顯示腫瘤細(xì)胞的CAR表達(dá)水平與5型腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率密切相關(guān)，胰腺癌患者治療前檢測(cè)組織中CAR表達(dá)水平有助于規(guī)范腺病毒載體的基因治療藥物個(gè)體化使用第三部分、攜帶PUMA基因的重組腺病毒（ADPUMA）的構(gòu)建及制備目的構(gòu)建含有人PUMA的重組腺病毒，為下一步轉(zhuǎn)染人胰腺癌細(xì)胞研究奠定基礎(chǔ)。方法以重組質(zhì)粒PCEP4PUMA中提取的PUMA基因?yàn)槟０?，采用PCR法擴(kuò)增基因片段。將擴(kuò)增的基因片段插入穿梭質(zhì)粒PSHUTTLECMV，并轉(zhuǎn)化大腸肝菌BJ5183。篩選重組質(zhì)粒PSHUTTLECMVPUMA，與PADEASY1一起電轉(zhuǎn)化BJ5183細(xì)胞。篩選重組腺病毒質(zhì)粒PADEASYPUMA，用LIPOFECTAMINE轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，制備攜帶人PUMA基因的重組復(fù)制缺陷型腺病毒（ADPUMA）。氯化銫密度梯度離心法純化ADPUMA病毒顆粒，并測(cè)定病毒滴度。結(jié)果①經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切，證實(shí)ADPUMA構(gòu)建成功②限制性內(nèi)切酶酶切確定穿梭質(zhì)粒重組于病毒骨架；顯微鏡下觀察HEK293細(xì)胞形態(tài)，證實(shí)病毒包裝復(fù)制成功③病毒滴度20321010PFUML，達(dá)到進(jìn)一步體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)要求。結(jié)論成功構(gòu)建了重組腺病毒ADPUMA，為了解PUMA在胰腺癌中的治療作用奠定基礎(chǔ)。第四部分、ADPUMA治療胰腺癌的體外研究目的探討ADPUMA對(duì)體外胰腺癌細(xì)胞的凋亡促進(jìn)作用和生長(zhǎng)抑制作用方法以不同MOI值的ADPUMA作用ASPC1、CAPAN1、BXPC3、PANC1細(xì)胞，MTT檢測(cè)PUMA對(duì)細(xì)胞增殖的影響，PI染色、DNALADDER、流式細(xì)胞儀檢測(cè)PUMA對(duì)細(xì)胞凋亡的影響；WESTERNBLOTTING檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)PUMA蛋白表達(dá)的變化以及BAX、BCL2、細(xì)胞色素C、CASPASE9，3表達(dá)的影響，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)CASPASE活性結(jié)果ADPUMA抑制胰腺癌細(xì)胞系細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)，并且PUMA抑制胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)表現(xiàn)出時(shí)間依賴性和劑量依賴性，但PUMA對(duì)不同胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用并不相同，在相同條件下，ASPC1細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制最明顯，而BXPC3的生長(zhǎng)抑制不明顯。DNALADDER、FCM、PI染色分析檢測(cè)到明顯的ADPUMA誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。WESTERNBLOTTING發(fā)現(xiàn)，在PUMA表達(dá)上調(diào)的同時(shí)，細(xì)胞內(nèi)BAX、BCL2、細(xì)胞色素C、CASPASES蛋白表達(dá)也隨著變化，CASPASES酶的活性明顯提高。結(jié)論P(yáng)UMA通過促進(jìn)凋亡而抑制胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，PUMA通過線粒體途徑發(fā)揮作用第五部分、ADPUMA治療胰腺癌的體內(nèi)研究目的探討ADPUMA對(duì)體內(nèi)胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。方法建立裸鼠ASPC1胰腺癌模型，待瘤體生長(zhǎng)到10MM左右。治療前一天，移植腫瘤局部注射ADPUMA1108PUFML50UL，第3D注射第二次，第6D注射第3次，從治療前一天開始測(cè)量腫瘤體積，每2D測(cè)量一次至第21天。在治療21天，TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡、免疫組化檢測(cè)KI67了解細(xì)胞增殖，WESTERNBLOTTING和RTPCR檢測(cè)細(xì)胞PUMA表達(dá)的變化。結(jié)果在實(shí)驗(yàn)組，腫瘤生長(zhǎng)明顯減慢，21天后的腫瘤的體積明顯低于對(duì)照組，而細(xì)胞內(nèi)PUMA表達(dá)明顯高于對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖受抑制，細(xì)胞凋亡指數(shù)增加。結(jié)論ADPUMA轉(zhuǎn)染促進(jìn)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞凋亡并抑制其生長(zhǎng)。第六部分、ADPUMA聯(lián)合吉西他濱治療胰腺癌的體內(nèi)研究目的探討ADPUMA聯(lián)合吉西他濱對(duì)體內(nèi)外胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法將ASPC1細(xì)胞分別暴露于系列濃度的吉西他濱或系列濃度吉他西濱聯(lián)合5MOIADPUMA48H，MTT法測(cè)定細(xì)胞的存活率。按照上述方法建立裸鼠ASPC1胰腺癌模型，待瘤體生長(zhǎng)到10MM左右，吉西他濱、ADPUMA或兩者聯(lián)合治療移植瘤。于0、3、6天，腫瘤局部注射ADPUMA1109PUFML50UL，吉他西濱的給藥方式為腹腔注射，劑量為100MGKG，于0、3、6天給藥。從治療前一天開始測(cè)量腫瘤體積，2D測(cè)量一次至21天。結(jié)果吉他西濱以劑量依賴方式抑制ASPC1細(xì)胞增殖，但吉他西濱聯(lián)合ADPUMA后對(duì)ASPC1細(xì)胞增殖的抑制更加明顯，聯(lián)合后的IC50為（00076±0012）ΜGML，其敏感性較單獨(dú)吉西他濱作用增加69倍。單獨(dú)以ADPUMA治療，腫瘤生長(zhǎng)抑制率為627，單獨(dú)吉西他濱治療時(shí)，腫瘤生長(zhǎng)抑制率為432，聯(lián)合后的抑制率為82（P001）。結(jié)論P(yáng)UMA基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的化療敏感性，增強(qiáng)抗腫瘤效果。

簡(jiǎn)介：目的了解江西省慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情況，HBV基因型與臨床的關(guān)系。方法選擇HBVDNA陽(yáng)性的江西籍慢性乙型肝炎患者血清150份，患者分別診斷為慢性HBV攜帶者、慢性肝炎輕度、中度、重度和慢性重型肝炎，每組30例，采用多對(duì)型特異性引物巢式PCR法檢測(cè)HBV基因型。結(jié)果本組慢性乙型肝炎患者HBV基因分型結(jié)果為B型118例（787％），C型31例（207％），D型1例（06％）；在上述5組患者中C型比例分別為0％，167％，267％，300％和300％，其中慢性HBV攜帶者與其他組比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。結(jié)論江西地區(qū)HBV優(yōu)勢(shì)基因型以B型為主，C型次之，有少量的D型感染者。C基因型HBV引起疾病的臨床病情較B型嚴(yán)重。關(guān)鍵詞乙型肝炎；乙型肝炎病毒基因型；多對(duì)型特異性引物巢式PCR目的通過檢測(cè)江西省乙型肝炎病毒（HBV）基因亞型（BA和BJ）的分布情況，了解HBV基因亞型與HBV致病性的關(guān)系，希望能藉此闡述相同基因型HBV可導(dǎo)致不同病情的機(jī)制。方法隨機(jī)選取經(jīng)多對(duì)型特異性引物巢式PCR法鑒定為B基因型HBV的血清標(biāo)本60例，包括慢性HBV攜帶者30例，慢性乙型肝炎患者各30例，采用巢式PCRRFLP法鑒定其基因亞型（BA和BJ）。結(jié)果60例B型HBV經(jīng)鑒定均為BA型，沒有發(fā)現(xiàn)BJ型。結(jié)論江西省B基因型HBV可能主要為BA亞型。相同基因型導(dǎo)致不同病情的機(jī)制可能還與其他因素如準(zhǔn)種有關(guān)。目的研究HBV準(zhǔn)種與拉米夫定耐藥的關(guān)系，指導(dǎo)臨床用藥。方法隨機(jī)選取經(jīng)拉米夫定治療慢性乙型肝炎患者，治療前30例，治療后發(fā)生HBV變異30例，病毒反彈但經(jīng)檢測(cè)未發(fā)生變異30例，HBVP區(qū)經(jīng)聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增后再采用熔點(diǎn)曲線法分析HBV準(zhǔn)種數(shù)量。同時(shí)也對(duì)HBVC區(qū)、S區(qū)準(zhǔn)種進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果拉米夫定治療前患者體內(nèi)HBVP區(qū)準(zhǔn)種數(shù)量為837±093個(gè)，病毒反彈組準(zhǔn)種數(shù)量為530±095個(gè)，病毒變異組準(zhǔn)種數(shù)量250±086個(gè)。三組間兩兩比較，P均小于005。HBVC區(qū)治療前組準(zhǔn)種數(shù)量為633±164個(gè)，病毒反彈組準(zhǔn)種數(shù)量為637±181個(gè)，病毒變異組準(zhǔn)種數(shù)量610±186個(gè)。三組間兩兩比較，P均大于005。HBVS區(qū)治療前組準(zhǔn)種數(shù)量為577±211個(gè)，病毒反彈組準(zhǔn)種數(shù)量為617±193個(gè)，病毒變異組準(zhǔn)種數(shù)量523±185個(gè)。三組間兩兩比較，P均大于005。結(jié)論在拉米夫定的作用下HBVP區(qū)準(zhǔn)種數(shù)量逐漸減少，發(fā)生變異后劣勢(shì)耐藥病毒株變?yōu)閮?yōu)勢(shì)病毒株易檢測(cè)到。拉米夫定對(duì)HBVC區(qū)、S區(qū)作用不明顯。

簡(jiǎn)介：目的臨床部分確定清肺口服液治療小兒呼吸道合胞病毒RSV肺炎痰熱閉肺證的有效性。實(shí)驗(yàn)部分通過實(shí)驗(yàn)研究，探討清肺口服液對(duì)RSV攻擊人喉癌表皮細(xì)胞的血清藥理學(xué)作用。方法臨床部分南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、江蘇省人民醫(yī)院、鹽城市中醫(yī)院按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)共納入194例RSV肺炎痰熱閉肺證患兒，隨機(jī)入組。其中試驗(yàn)組95例，使用清肺口服液加用不含抗病毒藥物的液體，對(duì)照組99例，使用利巴韋林加用清肺口服液安慰劑。兩組出現(xiàn)方案規(guī)定的情況時(shí)，可以按照方案加用相應(yīng)的對(duì)癥處理措施。依方案規(guī)定填寫病例報(bào)告表，在MICROSOFTACCESS系統(tǒng)中建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SAS913進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和采用SPSS115軟件中適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)部分設(shè)置了細(xì)胞感染病毒的兩種方法，藥物作用于細(xì)胞后感染病毒法和藥物和病毒同時(shí)作用于細(xì)胞法，通過MTT法測(cè)定病毒的抑制率，探索藥物抗病毒作用的機(jī)理。結(jié)果臨床部分結(jié)果顯示主要癥狀咳嗽、痰鳴、氣喘的改善方面試驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組，而發(fā)熱的改善方面，試驗(yàn)組優(yōu)勢(shì)不明顯；次要癥狀食欲和舌象的改善方面，試驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組。臨床理化檢查指標(biāo)中，X線胸片檢查兩組對(duì)比，治療后差別有高度統(tǒng)計(jì)意義P實(shí)驗(yàn)部分結(jié)果顯示病毒對(duì)照組與正常細(xì)胞組相比有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005，說(shuō)明含藥血清的抗病毒作用和利巴韋林相當(dāng)；含藥血清與空白血清組對(duì)比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005，表明兩種方法無(wú)差異。結(jié)論清肺口服液是治療小兒RSV肺炎痰熱閉肺證的有效藥物。并通過血清藥理學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究，肯定了清肺口服液的抗RSV作用，其抗RSV作用的機(jī)理，可能作用于F蛋白和G蛋白兩者都有，至于哪部分是作用重點(diǎn)，還有待于進(jìn)一步的研究。

簡(jiǎn)介：1895年之后，中國(guó)出現(xiàn)了大量由社會(huì)精英人士創(chuàng)辦的報(bào)刊雜志，建立了一批以吸收新知識(shí)為目的的新式學(xué)校。與此同時(shí)，清朝的思想鉗制政策被打破，出現(xiàn)了許多探討新思想、傳授新知識(shí)并評(píng)論政治時(shí)局的學(xué)會(huì)。在轉(zhuǎn)型時(shí)代，這三種以傳播新思想、新知識(shí)為主要目的新事物，使得中國(guó)社會(huì)和思想界發(fā)生了巨大變化。首先，“士”開始向知識(shí)分子過渡；其次，中國(guó)思想界出現(xiàn)了取向危機(jī)。因此，知識(shí)分子未能在近代混亂的政局中發(fā)揮出穩(wěn)定士氣人心的作用。在錢穆看來(lái)，知識(shí)分子要為近代中國(guó)混亂不定的狀況擔(dān)負(fù)很大的責(zé)任?？疾臁笆俊痹谙蛑R(shí)分子過渡時(shí)出現(xiàn)裂痕的原因必須回到近代的歷史語(yǔ)境中。中國(guó)的“讀書人”震驚于西方近現(xiàn)代工業(yè)文明的驚人力量，逐漸傾向于“西學(xué)”，一些人甚至達(dá)到“視西學(xué)如帝天”的程度。鑒于此，錢穆采取了截然不同的態(tài)度。他以中國(guó)民族文化為本位，通過歷史材料的整理，提出“士”階層是支撐中國(guó)民族、文化數(shù)千年延續(xù)不斷的主要原因。“士”作為一個(gè)群體活躍在中國(guó)歷史上有一個(gè)能夠不斷更新，但又相對(duì)穩(wěn)定的價(jià)值體系，即“士”精神。在知識(shí)分子誕生的轉(zhuǎn)型期間（是一個(gè)時(shí)間和空間交錯(cuò)混雜的時(shí)代），許多知識(shí)分子傾向于“西化”即能救國(guó)，用一種簡(jiǎn)單的、相對(duì)粗暴的二分法將傳統(tǒng)視為落后，因而作為傳統(tǒng)文化繼承者的“士”及“士”精神，不能發(fā)揮出形塑知識(shí)分子人格所應(yīng)有，也必須要有的作用。事實(shí)上，“士”是作為一條暗線存在于錢穆的著作中。他認(rèn)為學(xué)問應(yīng)當(dāng)“明天人之際，通古今之變，求以合之當(dāng)世”，中國(guó)學(xué)術(shù)又以人物為主線，故而“士”的作用極為重要。然而，“士”精神畢竟不能一成不變的全盤保留。當(dāng)列強(qiáng)環(huán)伺于國(guó)門之外，國(guó)家處于亂世之中，錢穆認(rèn)為“士”能于衰世中“守先待后”的精神尤為可貴；其次，要明了“華夷之防”。其次，錢穆主張結(jié)合中國(guó)傳統(tǒng)歷史精神，創(chuàng)造出能培養(yǎng)“新國(guó)士”的“新國(guó)史”。通過對(duì)“士”精神的闡釋以及在教育中的運(yùn)用，錢穆已經(jīng)較為清晰地勾勒出傳統(tǒng)的“士”及“士”精神的基本性格，因而重續(xù)“士”傳統(tǒng)，承傳“士”精神也就水到渠成。

簡(jiǎn)介：本課題的主要研究是用多屬性綜合評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)小兒呼吸道合胞病毒肺炎痰熱閉肺證型中西醫(yī)對(duì)照臨床療效的優(yōu)劣。本文所研究病例數(shù)據(jù)均來(lái)自汪受傳教授主持的“十五”攻關(guān)課題“中醫(yī)藥治療病毒性肺炎療效評(píng)價(jià)方法研究”課題任務(wù)書編號(hào)2004BA716803，從中選取痰熱閉肺證型共216例作為研究病例，并按照中藥和西藥治療方法分為中藥組和西藥組。本研究選用成本效果比、不良反應(yīng)率、住院時(shí)間和遠(yuǎn)期療效四個(gè)屬性作為比較中藥和西藥治療痰熱閉肺證綜合療效的指標(biāo)。本文通過分別計(jì)算出四個(gè)屬性的統(tǒng)計(jì)值并進(jìn)行中西藥組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，然后計(jì)算各自的屬性權(quán)重的統(tǒng)計(jì)值，最后將屬性值和屬性權(quán)重代入決策矩陣，采用簡(jiǎn)單加權(quán)法計(jì)算出中藥和西藥治療方案的積分并利用TOPSIS法對(duì)計(jì)算結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，具有較高分值的治療方案為優(yōu)選方案。確定優(yōu)選方案后，分別采用權(quán)重值敏感性分析和屬性值敏感性分析對(duì)綜合療效各個(gè)屬性的敏感性進(jìn)行確定，最終確定方案排序的穩(wěn)定性。統(tǒng)計(jì)利用SPSS軟件130，采用X2檢驗(yàn)、NMALPPPLOTS正態(tài)特性分析法、NONPARAMETRICTESTS非參數(shù)檢驗(yàn)、UNIVARIATE協(xié)方差分析、TWOINDEPENDENTSAMPLESTEST兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)和EXPLE分析方法。綜合評(píng)價(jià)分析結(jié)果成本一效果比中藥組CE247363，西藥組CE298542，中藥組較低。屬性權(quán)重為02；住院時(shí)間中藥組和西藥組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P005。中藥組均值為1010天，西藥組均值為1026天。屬性權(quán)重為01；不良反應(yīng)率中藥組和西藥組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P005。中藥組不良反應(yīng)率統(tǒng)計(jì)值為86957‰，西藥組統(tǒng)計(jì)值為99010‰。屬性權(quán)重為05；遠(yuǎn)期療效中藥組和西藥組間的遠(yuǎn)期療效無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P005。遠(yuǎn)期療效采用百分?jǐn)?shù)表示，中藥組統(tǒng)計(jì)值為902439％，西藥組統(tǒng)計(jì)值為913793％。屬性權(quán)重為02；臨床療效綜合評(píng)價(jià)分析簡(jiǎn)單加權(quán)法中藥組積分為0998，西藥組積分為0900，中藥組為優(yōu)選方案。TOPSIS法驗(yàn)證結(jié)果仍為中藥組較西藥組更理想。敏感性分析證明屬性值和權(quán)重值魯棒性較好，原結(jié)果穩(wěn)定性好。本項(xiàng)小兒呼吸道合胞病毒肺炎痰熱閉肺證型中西藥治療方案臨床綜合療效評(píng)價(jià)研究，得出以清開靈注射液和兒童清肺口服液為基本藥物的中藥治療方案的綜合療效優(yōu)于以利巴韋林注射液和復(fù)方愈創(chuàng)木酚磺酸鉀口服液為基本藥物的西藥治療方案。用中藥方案治療小兒呼吸道合胞病毒肺炎痰熱閉肺證型值得向社會(huì)推廣。為了建立快速臨床決策機(jī)制，給臨床決策提供有效、快速的依據(jù)，可將本項(xiàng)成果開發(fā)成臨床決策軟件，將有著極大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益，值得今后進(jìn)一步研究。

簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文新型溶癌腺病毒抗白血病細(xì)胞作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名劉輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師金潔錢文斌20090501洳；，土嘧塹婆太堂接堂絲I金塞翅墅此外，我們進(jìn)一步設(shè)計(jì)和研究化療、基因治療和病毒治療三種手段相結(jié)合殺傷白血病細(xì)胞這一新思路，以期為臨床白血病治療提供新的方法和策略本研究分三部分進(jìn)行第一部分溶癌腺病毒SG235TRAIL抗白血病細(xì)胞的體內(nèi)外研究；第；部分溶癌腺病毒SG235TRAIL協(xié)同高三尖杉酯堿殺傷白血病細(xì)胞的研究；第三部分溶癌腺病毒SG511BECN抗白血病細(xì)胞的體內(nèi)外研究第一部分溶癌腺病毒SG235TRAIL抗白血病細(xì)胞的體內(nèi)外研究目的構(gòu)建新型溶癌腺病毒SG235，其具有5型和35型嵌合纖毛并且E1B55KDA缺失，同時(shí)可以攜帶TRAIL表達(dá)框；通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)和比較SG235及SG235TRAIL抗白血病細(xì)胞效應(yīng)，并探討其作用機(jī)制從而為白血病靶向治療提供基因治療和病毒治療相結(jié)合的手段方法構(gòu)建新型溶癌腺病毒SG235、SG235增強(qiáng)綠色熒光蛋白ENHANCEDGREENFLUORESCENCEPROTEIN，EGFP以及SG235TRAIL，通過熒光倒置顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、病毒滴度檢測(cè)和WESTERNBLOT法檢測(cè)E1A的手段，來(lái)研究SG235對(duì)白血病細(xì)胞株、淋巴瘤細(xì)胞株，多發(fā)性骨髓1留MULTIPLEMYELOMA，MM細(xì)胞株，患者原代白血病細(xì)胞和白血病細(xì)胞集落1EUKEMICCOLONYFORMINGUNIT，CFUL的感染能力及其復(fù)制活性；通過WESTERNBLOT法來(lái)明確SG235E1B55KDA是否缺失；通過四甲基偶氮唑藍(lán)34，5DIMETHYLTHIAZOL一2Y12，5DIPHEMYLTETRAZOLIUMBROMIDE，M邢法檢測(cè)各型腺病毒對(duì)白血病細(xì)胞株的細(xì)胞毒作用；通過末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末端標(biāo)記TERMINALDEOXYNUCLEOTIDYLTRANSFERASEMEDIATEDDEOXYURIDINETRIPHOSPHATE／NS／TUNICKENDLABELING，TUNEL法和磷脂酰絲氨酸PHOSPHATIDYLSERINE，PS轉(zhuǎn)位法來(lái)證實(shí)SG235、SG235TRAIL誘導(dǎo)白血病細(xì)胞株和患者原代白血病細(xì)胞發(fā)生凋亡；通過羅丹明123RHODAMINE123，RHL23染色法來(lái)檢測(cè)SG235TRAIL感染白血病細(xì)胞株后線粒體膜電位改變；采用WESTERNBLOT法來(lái)檢測(cè)各型腺病毒感染白血病細(xì)胞株和患者原代白血病細(xì)胞后CASPASE家族蛋白、B細(xì)胞白血病／淋巴瘤因子2BCELLLEUKEMIA／LYMPHOMA，BCL2

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多養(yǎng)心顆粒的制備、質(zhì)量控制及治療小鼠病毒性心肌炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：研究背景登革病毒DENGUEVIRUS，DENV是單股正鏈RNA病毒，屬于黃病毒科、黃病毒屬。DENV包含4個(gè)血清型DENV1，DENV2，DENV3和DENV4。DENV的感染可引起一系列的臨床癥狀，包括登革熱DENGUEFEVER，DF和登革出血熱DENGUEHEMRHAGICFEVER，DHF登革休克綜合征DENGUESHOCKSYNDROME，DSS。以蚊媒為主要傳播媒介的DENV廣泛流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)。近20年來(lái)，隨著全球氣候變暖和全球化帶來(lái)的人口流動(dòng)性增加，DENV的暴發(fā)和流行更為頻繁。中國(guó)的臺(tái)灣、海南、福建、廣東、廣西和浙江等沿海省份均為DENV的流行地區(qū)。廣州近幾年的登革疫情呈高發(fā)態(tài)勢(shì)。目前，世界上尚無(wú)可有效預(yù)防登革熱的疫苗和相應(yīng)的治療藥物。利用釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的HBSAG和HPV顆粒疫苗的成功上市提示開發(fā)安全高效的DENV的病毒樣顆粒VIRUSLIKEPARTICLESVLPS疫苗具有廣闊的應(yīng)用前景。以DENV為代表的黃病毒VLPS是指通過在體外表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)PRM和E蛋白而組裝成的，具有與病毒粒子類似的空間結(jié)構(gòu)且不含病毒核酸的空心顆粒。由于VLPS保留了與天然病毒粒子類似的空間構(gòu)型和誘導(dǎo)中和抗體的抗原表位，因此VLPS不但能誘導(dǎo)產(chǎn)生體液免疫，而且可以激發(fā)CD4T細(xì)胞的增殖和CTL反應(yīng)CYTOTOXICTLYMPHOCYTE。VLPS被認(rèn)為是預(yù)防黃病毒感染的有效的、潛在的亞單位疫苗候選。目的利用含GAPGLYCERALDEHYDE3PHOSPHATEDEHYDROGENASE啟動(dòng)子的畢赤酵母組成性表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)編碼DENV2PRM和E蛋白的融合基因，在成功獲得DENV2VLPS的同時(shí)實(shí)現(xiàn)VLPS在該系統(tǒng)中的連續(xù)和高效表達(dá)。最后對(duì)VLPS的免疫原性和免疫保護(hù)性進(jìn)行研究，為開發(fā)四價(jià)的DENV病毒樣顆粒疫苗奠定基礎(chǔ)。方法首先，通過分子遺傳進(jìn)化分析選擇具有代表性的DENV2流行株作為研發(fā)顆粒疫苗的候選株；利用RTPCR的方法從病毒上清中擴(kuò)增DENV2的PRM和E基因；設(shè)計(jì)并構(gòu)建含全長(zhǎng)的E蛋白的PRME與含截去E蛋白TM2跨膜域的PRME472，分析TM2的缺失對(duì)E蛋白分泌水平和VLPS組裝的影響；利用在PRM的N末端分別引入PRM信號(hào)肽和Α信號(hào)肽以探索VLPS的高水平分泌表達(dá)。然后，將構(gòu)建好的重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌，經(jīng)PCR、酶切和測(cè)序鑒定正確后，將重組載體轉(zhuǎn)化畢赤酵母；將PCR鑒定正確的酵母克隆進(jìn)行發(fā)酵表達(dá)；將發(fā)酵上清和細(xì)胞裂解液分別進(jìn)行SDSPAGE和WESTERNBLOTTING檢測(cè)；并分析目的蛋白的連續(xù)性表達(dá)情況；利用發(fā)酵上清進(jìn)行血凝實(shí)驗(yàn)檢測(cè)VLPS的分泌情況；利用蔗糖梯度離心的方法從細(xì)胞裂解液中分離純化細(xì)胞內(nèi)的VLPSINTRACELLULARVLPS，利用超濾濃縮的方法純化上清的VLPSSECRETEDVLPS。通過電子顯微鏡技術(shù)檢測(cè)VLPS的結(jié)構(gòu)以及在細(xì)胞內(nèi)的組裝特征。最后，將純化到的VLPS免疫BALBC小鼠，通過ELISA測(cè)定血清中特異性抗體的滴度；利用免疫熒光技術(shù)和體外中和試驗(yàn)檢測(cè)VLPS的免疫反應(yīng)性和中和抗體的滴度；對(duì)免疫鼠進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)VLPS能否誘導(dǎo)免疫記憶。結(jié)果1分子遺傳進(jìn)化分析結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)室分離的DENV2ZS0101株在進(jìn)化樹上與廣東省2001株的DENV2流行株，以及菲律賓19982001年的DENV2流行株比鄰，在基因分型上都屬于全球流行COSMOPOLITAN基因型。因此，選取DENV2ZS0101株作為DENV2病毒顆粒疫苗的候選株具有廣泛的代表性。2本研究成功構(gòu)建了以下3種重組表達(dá)質(zhì)粒，包括含PRM信號(hào)肽和全長(zhǎng)E蛋白的PGAPASPRME；含PRM信號(hào)肽和截去E蛋白TM2端的PGAPASPRME472；含Α信號(hào)肽和全長(zhǎng)E蛋白的PGAPΑAPRME；并將重組質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)化畢赤酵母X33，獲得了重組表達(dá)克隆。3通過SDSPAGE和WESTERNBLOTTING檢測(cè)發(fā)現(xiàn)E蛋白分別在含PRM信號(hào)肽和Α信號(hào)肽的引導(dǎo)下分泌到上清中。PRM信號(hào)肽的分泌效率高于Α信號(hào)肽。同時(shí)，與全長(zhǎng)的E蛋白相比，缺失TM2端的E蛋白的分泌水平并不沒有得到明顯的提高。研究結(jié)果還表明含GAP啟動(dòng)子的組成性表達(dá)系統(tǒng)能連續(xù)性和高效表達(dá)E蛋白。4在含PRM信號(hào)肽重組子的表達(dá)上清中檢測(cè)到了血凝活性。說(shuō)明PRM信號(hào)肽能有效的引導(dǎo)VLPS分泌到上清。且TM2端的缺失不會(huì)影響病毒顆粒的組裝。5通過蔗糖密度梯度離心，分離到了大小分別為30NM和55NM的DENVVLPS。并通過透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)這兩種VLPS在酵母細(xì)胞內(nèi)的組裝特征與DENV病毒感染細(xì)胞中類似。6通過免疫電鏡觀察，在含PRM信號(hào)肽的重組子的發(fā)酵上清濃縮液中檢測(cè)到了30NM的VLPS，說(shuō)明VLPS可以被PRM信號(hào)肽有效的引導(dǎo)分泌到上清中。7ELISA檢測(cè)抗體滴度表明VLPS能誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了高水平的的特異性抗體，最高滴度達(dá)到了110000。免疫熒光結(jié)果表明將VLPS免疫血清稀釋1280倍后，仍在DENV2感染的C636細(xì)胞漿內(nèi)檢測(cè)到了強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。8體外中和試驗(yàn)表明，VLPS免疫血清能有效的中和DENV2NGC株對(duì)C636細(xì)胞的感染，中和滴度與滅活的DENV2免疫血清相同，均為145。攻毒后VLPS免疫鼠的中和抗體滴度有了很大的提升，達(dá)到了1100。免疫結(jié)果提示VLPS能誘導(dǎo)BALBC鼠產(chǎn)生免疫記憶反應(yīng)。結(jié)論1DENV2ZS0101株屬于全球流行基因型，可作為登革病毒樣顆粒疫苗的候選株。2首次利用畢赤酵母非甲醇誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)成功的高水平表達(dá)了DENV2VLPS。并在發(fā)酵上清中檢測(cè)到了VLPS的分泌，為VLPS后續(xù)的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。3首次在酵母表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)并分離到了兩種大小分別為30NM和55NM的DENV2VLPS。并利用透射電鏡技術(shù)發(fā)現(xiàn)DENVVLPS在酵母細(xì)胞中的組裝特征與病毒感染細(xì)胞類似。研究結(jié)果提示組成型表達(dá)DENVVLPS酵母系統(tǒng)或許可以作為研究登革病毒組裝和感染的理想模型。4通過免疫實(shí)驗(yàn)證實(shí)DENV2VLPS具有良好的免疫原性，免疫反應(yīng)性和體外中和病毒的能力。免疫結(jié)果初步提示VLPS能誘導(dǎo)免疫鼠產(chǎn)生免疫記憶反應(yīng)。

簡(jiǎn)介：上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雙腺病毒介導(dǎo)的TRAIL基因治療腫瘤的體外實(shí)驗(yàn)研究姓名張萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師錢關(guān)祥20040501丘罐第唾科上學(xué)頓士學(xué)健詒盤構(gòu)建含有融合轉(zhuǎn)錄囡于GAL4／VPL6的表選載體PCDNA】GV和含有受G5E1BTATA啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因EGFP的表達(dá)載體PGL3一G5EIBTATAEGFP，應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將這兩種表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染HEPG2、HEP3B、HELA和A549等腫瘤細(xì)胞和293細(xì)胞，同時(shí)咀PGL3一G5ELBTATA，EGFP單獨(dú)轉(zhuǎn)染上述細(xì)胞作為陰洼對(duì)照，麗疆PCDNAJEGFP蕈獨(dú)轉(zhuǎn)縶固持緩懟俸為陽(yáng)蛙對(duì)照。通過獍式鲴胞儀檢測(cè)報(bào)告基因EGFP的表達(dá)，初步觀察到了GSELBTATA啟動(dòng)子的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄活性很低，這樣在腺病毒包裝階段，可以控制TRAIL基因在293細(xì)胞內(nèi)低水平表達(dá)；當(dāng)加入GAL4，VPL6融合轉(zhuǎn)錄因子后，可以擻活G5ELBTATA啟動(dòng)子活性，且GSEB／ATA被激發(fā)后的活性程度可以達(dá)到甚至超過CMV啟動(dòng)于的活性，這對(duì)于在感染殺傷階段，TRAIL基圓在腫瘤細(xì)胞內(nèi)商表達(dá)又非常有利。第三部分雙腺病毒系統(tǒng)的構(gòu)建及對(duì)腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞體外殺傷效應(yīng)研究構(gòu)建了ADPSHUTTLEGSELBTATATRAILBGHPA和ADPSHUTTLECRAVGV兩種腺病毒載體，以相同的感染復(fù)數(shù)共同感染HEPG2、HEP3B、HELA和ASA9等腫瘤細(xì)胞和CKANG“Y暑F正常緞趁。運(yùn)過RTPCR，WESTERNBLOT驗(yàn)汪TRAIL基爨在GAL4／垤6融合轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控下，在各種細(xì)胞系中有高表達(dá)后，再通過形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)等方法驗(yàn)證TRAIL分子作為～種凋亡分子可以選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞HEPG2、HEP3B、HELA和A549發(fā)生凋亡，而對(duì)正常細(xì)胞CHANGLIVER基本無(wú)影響。關(guān)鍵詞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體，GAL4／VPL6融合轉(zhuǎn)淥因子，腺病毒載體，凋亡

簡(jiǎn)介：目的1觀察不同劑量的黃芪對(duì)糖尿病大鼠血糖、血脂、血清及海馬組織超氧化物歧化酶SUPEROXIDEDISMUTASESOD丙二醛MALONYLDIALDEHYDEMDA8羥基脫氧鳥苷8HYDROXY2DEAXYGUANINE8OHDG的影響。2觀察不同劑量的黃芪對(duì)糖尿病大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。3為中藥黃芪改善糖尿病學(xué)習(xí)記憶功能提供理論依據(jù)。方法普通級(jí)健康雄性WISTAR大鼠48只體重200～250G全部大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、糖尿病對(duì)照組、西藥對(duì)照組、黃芪低劑量組、黃芪中劑量組和黃芪高劑量組每組8只。普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后觀察大鼠活動(dòng)、耳廓反射、進(jìn)食、糞便等情況均無(wú)明顯異常。全部大鼠禁食12小時(shí)糖尿病對(duì)照組、西藥對(duì)照組以及黃芪各劑量組單次腹腔注射1％鏈脲佐菌素溶液STREPTOZOTOCINSTZ60MGKG體重72H后尾靜脈取血用血糖儀OOUCHSURESTEP穩(wěn)步倍加型測(cè)定空腹血糖值≥1667MMOLL者視為造模成功進(jìn)入實(shí)驗(yàn)開始計(jì)算病程。正常對(duì)照組大鼠僅注射等量緩沖液。選用免煎型黃芪顆粒按3GKG、6GKG、12GKG劑量相當(dāng)于人類劑量30G、60G、120G加入蒸餾水制備混懸液分別給予低、中、高三劑量組灌胃每天1次。西藥對(duì)照組每日給予腦復(fù)康吡拉西坦片500MGKG加入蒸餾水混勻制備成混懸液灌胃。正常對(duì)照組和糖尿病對(duì)照組分別給予生理鹽水灌胃。并根據(jù)每周的體重變化調(diào)整給藥連續(xù)用藥12周自由飲水、飲食。并分別于治療前和治療12周后共進(jìn)行2次水迷宮實(shí)驗(yàn)。每次實(shí)驗(yàn)的第15天為定位航行試驗(yàn)第6天為空間搜索實(shí)驗(yàn)。①定位航行實(shí)驗(yàn)將平臺(tái)置于目標(biāo)象限放入25℃左右水至沒過平臺(tái)1CM。每天從4個(gè)不同入水點(diǎn)分別將大鼠面向池壁放入水中如60S內(nèi)大鼠找到平臺(tái)讓其停留15S然后將其放回籠中。用計(jì)算機(jī)跟蹤并記錄大鼠從入水至找到平臺(tái)所需的時(shí)間即潛伏期。若60S內(nèi)大鼠未找到平臺(tái)將大鼠引導(dǎo)至平臺(tái)并讓其停留15S則潛伏期記為60S。②空間探索實(shí)驗(yàn)第6天撤除平臺(tái)任選一象限將各組大鼠依次從該象限面向池壁放入水中使其自由游泳60S記錄大鼠在目標(biāo)象限停留的時(shí)間占總時(shí)間的百分比。結(jié)果1血糖變化治療后黃芪各劑量組血糖逐漸下降同糖尿病對(duì)照組和西藥組比較差異顯著均P001。2血清SOD、MDA、8OHDG及海馬組織的SOD、MDA、8OHDG指標(biāo)造模各組與正常組比較未經(jīng)治療的糖尿病模型組SOD低于其它對(duì)照組而MDA、8OHDG高于為治療組。西藥對(duì)照組與模型對(duì)照組指標(biāo)相似。黃芪治療各組均有改善但以中、高劑量改善明顯。3定位航行實(shí)驗(yàn)治療后各治療組潛伏期較模型對(duì)照組明顯縮短均P001。其中黃芪中、高劑量組潛伏期接近于正常對(duì)照組但仍有差異均P001。4空間探索實(shí)驗(yàn)治療后各治療組目標(biāo)象限時(shí)間百分比較模型對(duì)照組明顯提高均P001。其中黃芪中、高劑量組同西藥對(duì)照組無(wú)差異接近于正常對(duì)照組但較正常對(duì)照組仍有差異均P001。結(jié)論從行為學(xué)的觀察結(jié)果來(lái)看中藥黃芪可以直接有效的改善糖尿病大鼠的認(rèn)知功能和記憶功能。其機(jī)理可能是由于黃芪可以降低血糖和血脂、改善胰島素抵抗、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞以及改善氧化應(yīng)激等多個(gè)途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文廣東鼻咽癌相關(guān)EB病毒BZLF1基因的突變分析及初步的功能學(xué)研究姓名徐金芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師賈衛(wèi)華20080527廣東鼻咽癌相關(guān)EB病毒BZLFL基因的突變分析及初步的功能學(xué)研究腫瘤中，體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均表明由BZLFL或BRLFL基因啟動(dòng)的EB病毒的少量裂解復(fù)制可以通過促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR，VEGF的生成促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)；但在C18鼻咽癌腫瘤細(xì)胞中注入BZLFL或BRLFL的腺病毒表達(dá)載體誘導(dǎo)EB病毒進(jìn)行大量裂解復(fù)制時(shí)卻可以顯著抑制裸鼠腫瘤的生長(zhǎng)。BZLFL基因在鼻咽上皮細(xì)胞癌變的過程中究竟扮演什么角色目前尚不清楚，作為引發(fā)EB病毒裂解復(fù)制的必需基因，它在朗病毒與鼻咽癌的相關(guān)分子機(jī)制中可能起著極其重要的作用，對(duì)它的深入研究也是非常有意義的。為了深入研究EB病毒與鼻咽癌的關(guān)系，本課題組從廣東鼻咽癌患者中成功分離一株高致瘤朗病毒亞型GDL并完成其全基因組測(cè)序工作，GDL株與原型B958株相比，存在43個(gè)位點(diǎn)的缺失，44個(gè)位點(diǎn)的插入以及1413個(gè)位點(diǎn)的變異。GDL株來(lái)源于鼻咽癌患者且在廣東鼻咽癌患者中具有高度的代表性，它為EB病毒與鼻咽癌相關(guān)的分子機(jī)制研究提供了較好的模板。我們對(duì)GDL株髓病毒裂解期立早基因BZLFL簡(jiǎn)稱為GDL型BZLFL基因的序列比對(duì)結(jié)果顯示，相對(duì)原型B958株，GDL型BZLFL基因的3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子中共存在30個(gè)點(diǎn)突變，3個(gè)單堿基缺失和1個(gè)單堿基插入。鑒于以上研究結(jié)果，我們決定對(duì)GDL型BZLFL基因編碼區(qū)的變異位點(diǎn)進(jìn)行頻率調(diào)查，同時(shí)對(duì)多位點(diǎn)進(jìn)行連鎖變異分析，探討GDL型BZLFL基因在廣東鼻咽癌患者中是否具有代表性；另外通過對(duì)GDL型BZLFL基因初步的功能學(xué)研究分析這些變異位點(diǎn)對(duì)BZLFL基因的功能影響，進(jìn)一步探討B(tài)ZLFL基因在EB病毒與鼻咽癌相關(guān)的分子機(jī)制中可能起到的作用。2研究方法21耶病毒GDL型BZLFL基因的突變分析方法采集研究對(duì)象的漱口水標(biāo)本并提取DNA，漱口水標(biāo)本包括廣東鼻咽癌患者192例，廣東健康人群197例和河南健康人群128例，另有鼻咽癌組織DNA標(biāo)本54例，利用巢式PCR方法擴(kuò)增BZLFL基因的特定片斷每個(gè)片斷上都分布有多個(gè)突變位點(diǎn)，將PCR產(chǎn)物直接測(cè)序，用DNASTAR序列分析軟件分析校讀測(cè)序結(jié)果。分析校讀測(cè)序結(jié)果后篩選出可以得到BZLFL基因序列全長(zhǎng)的標(biāo)本。通過對(duì)BZLFL基因編碼區(qū)的18個(gè)變異位點(diǎn)在廣東鼻咽癌患者和廣東，河南健康人群中的單點(diǎn)變異及多位點(diǎn)連鎖變異分布頻率的調(diào)查分析GDL型BZLFL基因與鼻咽癌的相關(guān)關(guān)系。1L

簡(jiǎn)介：四川大學(xué)碩士學(xué)位論文逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RTPCR）法檢測(cè)住院患兒腸道星狀病毒姓名鄧建軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)兒科學(xué)指導(dǎo)教師萬(wàn)朝敏20040510THEAPPLICATIONOFREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASECHAINREACTIONRTPCRFORTHEDETECTIONOFASTROVIRUSININPATIENTCHILDRENDIAGNOSEDOFENTERITISPOSTGRADUATEDENGJIANJUNTUTORPROFESSORWANCHAOMINABSTRACTOBJECTIVETOFINDOUTALABORATORIALDIAGNOSISINTHEDETECTIONOFASTROVIRUS，TOUNDERSTANDTHECLINICALCHARACTERISTICSOFASTROVIRUSINFECTIONAMONGINPATIENTSOFDIARRHEA，ANDTOUNDERSTANDTHEEPIDEMIOLOGICALANDCLINICALDISTINCTIONBETWEENASTROVIRUSANDROTAVIRUSMETHODSUSINGTHEELISAANDRTPCRTODETECTROTAVIRUSANDASTROVIRUSRESPECTIVELYINSTOOLOFTHE117INPATIENTCHILDRENDIAGNOSEDOFENTERITISIN2003THEASTROVIRUSPOSITIVESPECIMENSTESTEDBYRTPCRFIRSTLYWERESEROTYPEDBYRTPCRSECONDLYUSINGTHESEROTYPESPECIFICPRIMERSTHEEPIDEMIOLOGICALANDCLINICALDATAINCLUDINGAGE，SEASONDISTRIBUTION，CHIEFSYMPTOMSWERECOMPAREDANDANALYSEDRESULTSROTAVIRUSANTIGENWASFOUNDPOSITIVEIN35SPECIMENSFROMTHE117CHILDREN，THEPOSITIVERATEWAS299％，ASTROVIRUSWASFOUNDPOSITIVEIN10SPECIMENSANDTHEPOSITIVERATEWAS899％WEDIDNOTFOUNDANYCASESINFECTEDWITHBOTHVIRUSESTHEAVERAGEAGEOFCHILDRENINFECTEDWITHASTROVIRUSWASLESSTHANTHATOFROTAVIRUSF660401MONTHSVS114661LMONTHS，PO05ROTAVIRUSANDASTROVIRUSINFECTIONSOCCURREDMOSTLYINCOLDSEASONTHECLINICALREPRESENTATION