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簡(jiǎn)介:?jiǎn)挝淮a10635學(xué)號(hào)112013310000828碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文文本世界理論視角下的認(rèn)知表征與文體效果冬牧場(chǎng)的個(gè)案研究論文作者劉玉婕指導(dǎo)教師文旭教授學(xué)科專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)語(yǔ)言文學(xué)研究方向英語(yǔ)語(yǔ)言學(xué)提交論文日期2016年4月15日論文答辯日期2016年6月4日學(xué)位授予單位西南大學(xué)中國(guó)重慶2016年4月II
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簡(jiǎn)介:上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文重組腺病毒介導(dǎo)E2FSHRNA轉(zhuǎn)移抑制人視網(wǎng)膜母細(xì)胞腫瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究姓名馬家烈申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師黃倩王豐20080301IIITHESTUDYONRECOMBINANTADENOVIRUSMEDIATEDE2FSHRNAINREDUCINGTHEGROWTHOFRETINOBLASTOMAABSTRACTPURPOSETOINVESTIGATETHEEFFICACYOFADE2FSIRNAINTHEPROCESSOFREDUCINGTHEGROWTHOFRETINOBLASTOMAMETHODTHECERTAINAMOUNTOFRETINOBLASTOMAWHICHHASBEENMARKEDWITHGREENFLUESCENTPROTEINGFPCULTUREDINTHEPLATEWEREINFECTEDBYADE2FSIRNAADE2FXRESPECTIVELYTHEABOVEINFECTEDRBCELLSWILLBECOLLECTEDAFTER48HTHENCOUNTINGTHENUMBEROFCELLSDILUTINGTHEMINTHECONCENTRATIONOF1105MLINJECTINGTHEAMOUNTOF2105RBINBOTHEYESTHERBTUMCELLINJECTEDONTHELEFTSIDEWASINFECTEDWITHADE2FSIRNAASTREATMENTGROUPSIMULTANEOUSLYTHERIGHTSIDEISINFECTEDWITHADE2FXASTHECONTROLGROUPALLOFWHICHWILLBEINVESTIGATEDTAKENTHECONSECUTIVEDYNAMICPHOTOSOFTHECONDITIONOFRBTUM’SGROWTHBYTHESPECIAL
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簡(jiǎn)介:目的初步研究SH復(fù)方中藥對(duì)病毒性呼吸道炎的防治作用,并初步評(píng)價(jià)其安全性。方法1用在自然狀況下感染皰疹病毒而發(fā)生傳染性喉氣管炎INFECTIOUSLARYNGOTRACHEITIS,ILT的孔雀作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,以臨床癥狀改善、死亡率、發(fā)病率等指標(biāo)觀察SH復(fù)方中藥對(duì)孔雀?jìng)魅拘院須夤苎字委熀皖A(yù)防的作用。2用ILT孔雀和低白細(xì)胞模型和免疫抑制小鼠模型,觀察SH復(fù)方中藥對(duì)小鼠的免疫功能、造血系統(tǒng)以及ILT孔雀血液細(xì)胞和血液化學(xué)的影響。3LDSO用KM小鼠和家兔,觀察SH復(fù)方中藥對(duì)小鼠的急性毒性和對(duì)家兔亞急性毒性的作用。結(jié)果1SH復(fù)方中藥能有效控制孔雀?jìng)魅拘院須夤苎椎暮粑腊Y狀,提高ILT孔雀的生存率。對(duì)孔雀的病毒性傳染性喉氣管炎有良好的預(yù)防作用、有效率97%以上。2SH復(fù)方中藥能夠升高ILT孔雀的RBC、WBC、PLT數(shù)目,對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠外周血白細(xì)胞減少也有明顯提升作用;能促進(jìn)6CO照射小鼠骨髓有核細(xì)胞增殖及增加脾集落形成單位;并能明顯改善環(huán)磷酰胺所致小鼠的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能低下。3SH復(fù)方中藥對(duì)KM小鼠LDSO為40988G/KG,LD50的95%可信區(qū)間為35080~47891G/KG。未發(fā)現(xiàn)SH復(fù)方中藥對(duì)正常家兔有明顯的亞急性毒性。結(jié)論1SH復(fù)方中藥對(duì)病毒性呼吸道炎有良好防治效果,其機(jī)理可能與改善和提高機(jī)體造血和免疫功能,提高機(jī)體抵抗力達(dá)到扶正殺毒,鎮(zhèn)咳平喘,清熱祛痰作用有關(guān)。2SH復(fù)方中藥對(duì)KM小鼠LDSO為小鼠有效劑量的40倍,對(duì)正常家兔無(wú)明顯的亞急性毒性。
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簡(jiǎn)介:流行性感冒簡(jiǎn)稱(chēng)流感是一種古老的傳染性疾病,已為世界的廣大人民所熟悉。其病原體流感病毒屬于正粘病毒科。由流感病毒引起的流感的流行情況在2000多年前就有記載,其典型特點(diǎn)就是一種突發(fā)的呼吸道疾病,流行大約幾周,而后突然消失。流感的流行曾造成重大的損失,并給人民的健康帶來(lái)極大威脅,世界各國(guó)均投入大量的人力物力進(jìn)行流感病毒的研究,期望能夠找到預(yù)防或治療此傳染病的有效方法。牛蒡子是一種常用中藥,臨床上常用于治療流感、急性咽喉炎,皰疹等病毒性疾病。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)口服牛蒡子甙元在100ΜGKG,甚至更低劑量LOΜGKG就顯示出良好的體內(nèi)抗甲1型流感病毒治療效果。保護(hù)實(shí)驗(yàn)中,牛蒡子甙元100ΜGKG劑量口服也顯示了較好的死亡保護(hù)作用。這些都表明牛蒡子甙元是其中的抗病毒活性成分,對(duì)病毒性感冒的病因治療具有良好的前景,其抗流感病毒機(jī)理應(yīng)作進(jìn)一步研究。本論文研究著重從以下兩個(gè)方面進(jìn)行探討1研究牛蒡子NBZ甙元組成的復(fù)方抗流感病毒作用。2在確定了抗病毒活性的基礎(chǔ)上,根據(jù)中藥作用特點(diǎn),從誘生干擾素角度探討藥物抗病毒作用機(jī)制。第一部分文獻(xiàn)研究本文對(duì)國(guó)內(nèi)外關(guān)于流感的病原學(xué)、流行病學(xué)、對(duì)人類(lèi)的危害及中醫(yī)對(duì)其病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)、中西醫(yī)防治的進(jìn)展進(jìn)行了綜述與分析。文獻(xiàn)表明,自從CHRISTPHERREWS等人首次分離出A型流感病毒以來(lái),通過(guò)大量的病毒分離與研究,已基本弄清了流感病毒感染、流行的機(jī)理。但是由于缺乏控制流感的發(fā)生與流行的手段,流感病毒的研究仍是當(dāng)今病毒學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。目前臨床上所用的一些抗病毒藥物如病毒唑、金剛烷胺、金剛乙胺等藥物對(duì)于防治流感有一定的效果,但因其副作用而限制了臨床應(yīng)用,新的抗流感藥物神經(jīng)氨酸酶抑制劑正在研制與試用中。對(duì)于流感的預(yù)防,流感疫苗的研究是倍受關(guān)注的,但是由于流感抗原的病毒變異性影響了流感疫苗的應(yīng)用。近年來(lái),國(guó)內(nèi)學(xué)者在中醫(yī)藥治療流感的臨床及基礎(chǔ)研究方面,進(jìn)行了較深入的研究,并已取得令人鼓舞的進(jìn)展。因而,從中藥中尋找療效確切且副作用低的抗流感病毒藥物已受到國(guó)內(nèi)外的廣泛重視。第二部分實(shí)驗(yàn)研究目的通過(guò)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)方法對(duì)牛蒡子甙元復(fù)方體內(nèi)抗流感病毒的實(shí)驗(yàn)觀察,探討牛蒡子甙元復(fù)方抗流感病毒作用,并從誘生正常小鼠干擾素水平進(jìn)一步研究其作用機(jī)理,為臨床治療流感提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法以病毒滴鼻感染小鼠,觀察牛蒡子甙元復(fù)方對(duì)肺指數(shù)、病毒致小鼠死亡率等的影響并探討牛蒡子甙元復(fù)方誘生干擾素抗病毒作用機(jī)制。結(jié)果牛蒡子甙元復(fù)方對(duì)小鼠病毒性肺炎有抑制作用,對(duì)甲1型流感病毒感染小鼠的生命率有延長(zhǎng)作用。并能對(duì)正常小鼠有一定誘生干擾素作用。結(jié)論牛蒡子甙元復(fù)方對(duì)流感病毒的增殖有抑制作用,并且能改善流感病毒引起的小鼠肺炎癥狀,延長(zhǎng)生命率,其抗病毒作用機(jī)制之一是誘生體內(nèi)產(chǎn)生干擾素。因此,該藥可能是一種有實(shí)用價(jià)值的治療流行感冒的有效藥物。
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簡(jiǎn)介:溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)主席湛震數(shù)援答辯委員會(huì)成員黃這洼教授邵蓓教援溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文一、英文縮略詞中英文對(duì)照表縮略語(yǔ)英文全稱(chēng)中文名稱(chēng)REPEATABLEBATTERYFORTHEASSESSMENTOF重復(fù)成套神經(jīng)心理學(xué)測(cè)試RBANSNEUROPSYCHOLOGICALSTATUS量表MASTMICHIGANALCOHOLISMSCREENINGTEST密西根酒精依賴(lài)篩查量表RBCREDBLOODCELL紅細(xì)胞MCVMEANCORPUSCULARVOLUME平均紅細(xì)胞體積ADSALCOHOLDEPENDENCESYNDROME酒精依賴(lài)綜合征WEWERNICKE’SENCEPHALOPATHY威尼克腦病KSKORSAKOFFSSYNDROME科薩科夫綜合癥ADALCOHOLICDEMENTIA酒精性癡呆NMDARNMETHYLDASPARTICACIDRECEPTORN甲基D天冬氨酸受體PM丌PORTEUSMAZETEST波地厄斯迷宮測(cè)試RDTREWARDDELAYTASK延遲折扣任務(wù)VTVIGILANCETASK警覺(jué)任務(wù)LSJTLEXICALSEMANTICJUDGMENTTASK詞匯語(yǔ)義判斷任務(wù)Ⅳ眥SEMINIMENTALSTATEEXAMINATION簡(jiǎn)易智力篩查量表CPTCONTINUOUSPERFORMANCETASK持續(xù)操作任務(wù)
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簡(jiǎn)介:研究背景乙型肝炎病毒(HEPATITISBVIRUS,HBV)感染在我國(guó)依然是全國(guó)性的公共健康問(wèn)題,人群中慢性乙肝病毒攜帶率近10%,而母嬰傳播是形成慢性HBV感染的重要原因。據(jù)估計(jì)我國(guó)的慢性HBV感染約有30%50%是通過(guò)母嬰傳播發(fā)生的。雖然新生兒免疫接種已經(jīng)取得了巨大的成就,但仍有部分免疫失敗。有些嬰兒雖已產(chǎn)生抗體,但并不完全處于安全狀態(tài)。本課題組前期基于血清HBV轉(zhuǎn)錄體檢測(cè)的研究表明,既使經(jīng)過(guò)免疫治療和接種,大部分HBSAG()孕婦所生的新生兒血清中仍可檢測(cè)到頓挫型轉(zhuǎn)錄體(DRNA,TRRNA),且是新生兒出生時(shí)唯一可檢測(cè)到的HBV血清學(xué)標(biāo)志物。TRRNA是一個(gè)潛在的診斷低復(fù)制特殊HBV感染狀態(tài)的新的標(biāo)志物,但這種特殊感染狀態(tài)的穩(wěn)定性及其臨床意義尚待進(jìn)一步明確。在治療慢性HBV感染中,拉米夫定能快速、有效地抑制HBV復(fù)制,但不能完全清除病毒,停藥后易復(fù)發(fā),也有耐藥問(wèn)題。拉米夫定為核苷類(lèi)藥物,通過(guò)抑制HBV多聚酶的活性阻斷HBV復(fù)制,作用靶位是HBV聚合酶反轉(zhuǎn)錄活性區(qū)YMDD基因,長(zhǎng)期應(yīng)用可致病毒耐藥變異。拉米夫定的阻斷效果必會(huì)導(dǎo)致大量HBV復(fù)制中間體的產(chǎn)生,這些中間體是不完整不成熟的。前期拉米夫定治療對(duì)血清HBV轉(zhuǎn)錄體影響的研究中表明,XDNA檢測(cè)能更真實(shí)地反映病毒含量的變化,也可能是反映患者耐藥的早期血清學(xué)標(biāo)志物,同時(shí)發(fā)現(xiàn)在停藥時(shí)HBV血清標(biāo)志物均陰性但TRRNA始終穩(wěn)定表達(dá),提示HBV感染狀態(tài)的持續(xù),TRRNA有可能作為預(yù)測(cè)拉米夫定治療停藥后反跳的血清標(biāo)志物。目的本研究擬在前期研究的基礎(chǔ)上,對(duì)HBSAG()孕婦及其所生新生兒進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,探討TRRNA確定的早期特殊感染狀態(tài)是否穩(wěn)定,是否會(huì)引起HBV感染活動(dòng)性改變及影響因素。同時(shí)選擇隨訪拉米夫定治療出現(xiàn)停藥后反跳的慢性HBV感染病例模型,探討TRRNA的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律及其在停藥后反跳預(yù)警中的作用。方法跟蹤隨訪90例HBSAG陽(yáng)性孕婦及所生新生兒,孕婦在接受HBIG治療前和分娩前各采血1次,新生兒在出生后24H內(nèi)、1、3、6、9、12月各采血1次,檢測(cè)TRRNA、FRNA、乙肝五項(xiàng)和HBVDNA定量,按新生兒TRRNA分組比較新生兒HBV活動(dòng)性感染的發(fā)生率,按母親HBIG治療、HBEAG、HBVDNA定量分別分組比較母嬰TRRNA、FRNA的陽(yáng)性率。選擇100例拉米夫定治療停藥反跳的病例模型,從治療始每3個(gè)月采血1次,隨訪24個(gè)月,觀察分析HBVDNA、HBSAG、HBEAG、ALT、YMDD突變和HBVX區(qū)DNA、FRNATRRNA的變化規(guī)律。結(jié)果隨訪的新生兒12個(gè)月內(nèi)無(wú)HBV活動(dòng)性感染發(fā)生,新生兒FRNA均陰性。分別以母嬰是否行HBIG治療分組,比較新生兒TRRNA檢出率,差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Χ21208,P0272;Χ22225,P0136);以母親HBEAG分組,分別比較母嬰TRRNA檢出率,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Χ20008,P0928;Χ20694,P0405),而母親FRNA檢出率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Χ210565,P0001);以孕婦產(chǎn)前HBVDNA定量分組同樣分別比較母嬰TRRNA檢出率,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Χ24349,P0226;Χ23182,P0364),而母親FRNA的檢出率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Χ221193,P0000)。入選的100例拉米夫定治療的患者均成功動(dòng)態(tài)觀察24個(gè)月。所有患者在治療滿36個(gè)月期間均有程度不同的治療反應(yīng),HBVDNA和FRNA定量均迅速下降至低水平,其中78例轉(zhuǎn)陰,HBEAG血清轉(zhuǎn)換率24%(HBEAG消失±ANTIHBE),繼續(xù)鞏固治療至滿12個(gè)月后停藥。停藥時(shí)共91例HBVDNA和FRNA均陰性,余下9例也均降至低水平(結(jié)論在隨訪的12個(gè)月內(nèi),新生兒TRRNA陽(yáng)性與否不受母嬰是否行HBIG治療、HBEAG和HBVDNA定量的影響,這種特殊感染狀態(tài)是穩(wěn)定的,這可能是新生兒今后發(fā)生開(kāi)放性感染的病理學(xué)基礎(chǔ)。TRRNA是一個(gè)潛在的預(yù)測(cè)拉米夫定治療慢性HBV感染停藥反跳的血清學(xué)標(biāo)志物。
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簡(jiǎn)介:上海交通大學(xué)學(xué)位論文答辯決議書(shū)JBGS3S9研究生姓名王瑞濤學(xué)號(hào)00672492132導(dǎo)師姓名李克論文題目慢病毒轉(zhuǎn)染IPLA2基因改良移植胰島的體外實(shí)驗(yàn)研究答辯日期2009年5月11日學(xué)科專(zhuān)業(yè)外科學(xué)普通外科答辯地點(diǎn)上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院答辯委員會(huì)成員姓名單位職稱(chēng)簽名蔡端復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院主任醫(yī)師、教授蓖淄王強(qiáng)中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院主任醫(yī)師、教授乞膨尹路上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院主任醫(yī)師、教授甜℃釤吳國(guó)豪復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院主任醫(yī)師、教授川\L、№李繼坤上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院主任醫(yī)師、教授粕髟’◆。_‘’T。一‘’,∞墨疊鷲;;量幽臻;露;是㈡臻隴蹦擊’二矗王N、4,J一,該論文進(jìn)行慢病毒轉(zhuǎn)染IPLA2基因改良移植胰島的體外實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)IPLA2在人類(lèi)胰島細(xì)胞有較高水平表達(dá)并參與調(diào)節(jié)胰島素分泌;并進(jìn)一步觀察了體外長(zhǎng)期培養(yǎng)小鼠胰島的IPLA2表達(dá)和活性變化及其與胰島素分泌功能的改變,研究發(fā)現(xiàn)隨著體外培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),小鼠胰島IPLA2表達(dá)、活性以及胰島素分泌功能明顯下降。在此基礎(chǔ)上成功制備較高滴度的攜帶IPLA2基因的慢病毒載體,體外轉(zhuǎn)染小鼠胰島,發(fā)現(xiàn)重組慢病毒能夠高效轉(zhuǎn)染離體胰島,并且能夠在離體胰島穩(wěn)定表達(dá)目的基因IPLA2,通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染IPLA2基因過(guò)表達(dá)于離體小鼠胰島,能夠增強(qiáng)培養(yǎng)胰島的胰島素分泌功能,為進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供了依據(jù)和基礎(chǔ)。該研究深入探討了改進(jìn)胰島移植的途徑,為增強(qiáng)胰島移植物的功能提供了有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)依據(jù),有重要理論意義和潛在臨床價(jià)值。該課題密切結(jié)合臨床實(shí)際,有較好的創(chuàng)新性,設(shè)計(jì)合理,資料完整,數(shù)據(jù)可靠,統(tǒng)計(jì)準(zhǔn)確,結(jié)論可信,論文撰寫(xiě)規(guī)范,層次清晰,討論客觀,分析周密,文獻(xiàn)收集全面,反映該生有扎實(shí)的專(zhuān)業(yè)理論和良好的科研能力。經(jīng)答辯委員會(huì)全體成員無(wú)記名投票表決,全票通過(guò)研究生論文答辯,建議授予醫(yī)學(xué)博士學(xué)位?!粍俅?。㈣/』IFLRLFFLLFFLLTLLLLLTLLLRLTTLLLFRFLRLLLFLFFFLUFY1835695慢病毒轉(zhuǎn)染IPLA2基因改良移植胰島的體外實(shí)驗(yàn)研究THESTUDYOFLENTIVIRALMEDIATEDIPLA2GENEDELIVERYTOISLETSFORTRANSPLANTATION學(xué)號(hào)研究生指導(dǎo)教師申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別研究方向?qū)W科專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)單位論文提交日期論文答辯日期0067249232王瑞濤李克教授博士學(xué)位胰島移植外科學(xué)普通外科上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院2009年5月2009年5月關(guān)鍵詞IPLA2,胰島,胰島移植,慢病毒,轉(zhuǎn)染KEYWORDSCALCIUMINDEPENDENTPHOSPHOLIPASEA2IPLA2,ISLETSOFLANGERHANS,ISLETSTRANSPLANTATIONLENTIVIRUS,TRANSFECTION本研究課題受?chē)?guó)家教育部留學(xué)回國(guó)人員啟動(dòng)基金、上海市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)啟明星基金資助基金編號(hào)5QMXL440
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簡(jiǎn)介:目的探討異氟烷靜吸復(fù)合麻醉與丙泊酚全憑靜脈麻醉對(duì)老年冠心病患者非體外循環(huán)冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)術(shù)后認(rèn)知功能和血漿S100Β蛋白濃度的影響,為老年患者非體外循環(huán)冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)更合理的臨床麻醉用藥提供理論依據(jù)。方法選擇擇期行冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)的老年冠心病患者30例,ASAⅡⅢ級(jí),男25例,女5例,年齡6070歲,隨機(jī)分為異氟烷靜吸復(fù)合麻醉組A組,15例和丙泊酚全憑靜脈麻醉組(B組,15例)。根據(jù)術(shù)中循環(huán)情況應(yīng)用去氧腎上腺素、間羥胺和(或)多巴胺維持循環(huán)穩(wěn)定,艾司洛爾控制心率,血壓升高者加深麻醉或應(yīng)用血管擴(kuò)張藥。記錄患者術(shù)中的平均動(dòng)脈壓、心率、麻醉藥物用量、手術(shù)時(shí)間和麻醉時(shí)間等。兩組患者分別于術(shù)前1天、術(shù)后第4天測(cè)定患者簡(jiǎn)易智能狀態(tài)檢查量表MMSE評(píng)分;在術(shù)前、縫皮時(shí)、術(shù)后1天采血離心保存血清,用ELISA法檢測(cè)測(cè)定血漿S100Β蛋白濃度。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS130統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±S表示,包括組內(nèi)配對(duì)樣本T檢驗(yàn),兩組間獨(dú)立樣本T檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)。P<005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<001認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。結(jié)果A組患者術(shù)后出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙5例33%,B組3例20%。與術(shù)前比較,A組和B組患者術(shù)后第4天MMSE評(píng)分明顯降低,且A組術(shù)后第4天較B組降低更明顯P<005)。2組各時(shí)間點(diǎn)血漿S100Β蛋白濃度與術(shù)前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<001)。在縫皮和術(shù)后1天間A組患者血漿S100Β蛋白濃度明顯高于B組(P<005)結(jié)論全憑靜脈麻醉術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生率和血漿S100Β蛋白濃度變化幅度均低于異氟烷靜吸復(fù)合麻醉組,可提示丙泊酚全憑靜脈更好的適合老年患者非體外循環(huán)冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)的麻醉藥物的臨床選擇。
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簡(jiǎn)介:目的應(yīng)用ADEASY腺病毒載體系統(tǒng),構(gòu)建人LMP1基因的腺病毒重組體,感染體外培養(yǎng)的兔BMSCS,鑒定細(xì)胞對(duì)LMP1的表達(dá)情況,為進(jìn)一步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。方法采用PCR的方法以PIRES2EGFPLMP1質(zhì)粒為模板進(jìn)行擴(kuò)增,在下游引物中加入特定序列,使擴(kuò)增出的LMP1基因帶有編碼6個(gè)組氨酸即HIS標(biāo)簽的堿基序列。將得到的帶有HIS標(biāo)簽堿基序列的LMP1基因作為目的基因,通過(guò)TA克隆與PMD18T載體連接并測(cè)序。雙酶切后插入至腺病毒穿梭質(zhì)粒PADIRACKCMV內(nèi)。PMEⅠ線性化陽(yáng)性克隆PADTRACKLMP1,在BJ5183菌內(nèi)完成與骨架質(zhì)粒PADEASY1的同源重組,構(gòu)建出重組腺病毒質(zhì)粒PADLMP1。通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)在HEK293細(xì)胞內(nèi)包裝出復(fù)制缺陷的重組腺病毒ADLMP1,大量擴(kuò)增、純化并測(cè)定滴度。結(jié)合骨髓密度梯度離心法和貼壁篩選法從兔骨髓中分離培養(yǎng)BMSCS。重組腺病毒以不同的MOI感染第三代BMSCS,在顯微鏡下觀察其生長(zhǎng)情況及感染效率。然后以最佳MOI感染BMSCS,3天后收集細(xì)胞行RTPCR法檢測(cè)LMP1基因的MRNA表達(dá),再利用抗HIS標(biāo)簽的特異抗體以WESTERNBLOT的方法鑒定LMP1基因的蛋白表達(dá)。結(jié)果測(cè)序鑒定攜帶HIS標(biāo)簽的LMP1基因的重組質(zhì)粒PMD18T構(gòu)建成功。成熟的體外分離培養(yǎng)BMSCS的方法方便簡(jiǎn)單,收獲細(xì)胞數(shù)量多且增殖能力強(qiáng)。重組腺病毒以150的MOI值感染兔BMSCS可以獲得最佳的感染效率,即在3天后達(dá)到50%~70%。收集病毒感染后的BMSCS行RTPCR檢測(cè)表明存在LMP1基因的MRNA表達(dá),WESTERNBLOT亦證實(shí)LMP1基因的蛋白表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建攜帶HIS標(biāo)簽的人LIM礦化蛋白1LMP1基因的腺病毒重組體。證實(shí)重組病毒感染BMSCS后細(xì)胞能有效地表達(dá)LMP1,為L(zhǎng)MP1動(dòng)物體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)研究提供了依據(jù)。
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簡(jiǎn)介:目的了解河北省腎綜合征出血熱疫源地鼠種構(gòu)成、帶毒率及宿主動(dòng)物所攜帶漢坦病毒與遺傳特性間的關(guān)系,指導(dǎo)本病的預(yù)防和控制。方法1疫源地調(diào)查,夾夜法捕鼠,無(wú)菌取鼠肺;2用冷凍切片機(jī)切鼠肺,冷丙酮固定,間接免疫熒光法篩選漢坦病毒陽(yáng)性鼠肺;3從陽(yáng)性和陰性鼠肺中提取總RNA;4根據(jù)文獻(xiàn)以及GENBANK中已知的SNP位點(diǎn)查找特異性引物,用等位基因特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)ASPPCR進(jìn)行擴(kuò)增,并進(jìn)行電泳和觀察結(jié)果;5根據(jù)電泳結(jié)果,對(duì)SNP位點(diǎn)進(jìn)行分型,分析基因多態(tài)性特征。通過(guò)病例對(duì)照研究CASECONTROLSTUDY分析HV宿主動(dòng)物單核苷酸多態(tài)性與宿主動(dòng)物HV攜帶狀態(tài)的關(guān)系。結(jié)果1鼠間疫情資料顯示褐家鼠占總捕獲鼠種的6490%,是河北省的優(yōu)勢(shì)鼠種。河北省居民區(qū)鼠種主要為褐家鼠和小家鼠,分別占居民區(qū)總捕獲鼠種的7338%和2410%;野外鼠種主要為褐家鼠、大倉(cāng)鼠和小家鼠,分別占野外總捕獲鼠種的5472%、2075%和1321%。河北省居民區(qū)鼠密度為216%,高于野外鼠密度053%。2將527份鼠肺冷凍切片,冷丙酮固定后用間接免疫熒光法檢測(cè),陽(yáng)性鼠肺共17份陽(yáng)性率為323%。提示我省腎綜合征出血熱疫源地鼠帶毒率較低,帶毒鼠為宅區(qū)褐家鼠,野外及其它鼠種未檢出。3RS8153609位點(diǎn)等位基因和基因型頻率在各研究組中的分布根據(jù)HARDYWEINBERG平衡公式檢驗(yàn),攜帶HV與未攜帶HV兩組標(biāo)本中均存在C、T兩種等位基因,推算出CC、CT、TT三種基因型的理論頻數(shù)預(yù)期值,結(jié)果顯示Χ21339,P0512005,說(shuō)明實(shí)際基因型頻率與期望基因型頻率的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其分布符合HARDYWEINBERG平衡,有較好的群體代表性。RS8153609位點(diǎn)基因型與等位基因頻率的比較結(jié)果顯示,HV攜帶組和未攜帶組RS8153609位點(diǎn)CC基因型頻率分別為0%和2813%,TT基因型頻率分別為2174%和2500%,CT基因型頻率分別為7826%和4687%,CC、TT基因型頻率HV攜帶組低于未攜帶組,CT基因型頻率HV攜帶組明顯高于未攜帶組Χ28729,P0009005。RS8153609位點(diǎn)C和T等位基因頻率在HV攜帶組和未攜帶組中未發(fā)現(xiàn)差別。RS8153609位點(diǎn)不同基因型與HV攜帶狀態(tài)的比較結(jié)果顯示,CT基因型標(biāo)本HV的感染率為5455%,CC基因型及TT基因型標(biāo)本HV的感染率為2273%,CT基因型標(biāo)本HV的感染率明顯高于CC基因型及TT基因型標(biāo)本HV的感染率Χ25493,P0019<005。CT基因型標(biāo)本感染HV的危險(xiǎn)性是CC基因型及TT基因型標(biāo)本感染HV的408倍4080,95%CI為1217~13680。進(jìn)一步分析不同地域宿主動(dòng)物RS8153609位點(diǎn)CT基因型頻率分布是否存在差別,東北部地區(qū)張家口、承德、唐山、秦皇島和中南部地區(qū)保定、石家莊、滄州、邯鄲RS8153609位點(diǎn)CT基因型頻率分別為6429%和5556%,東北部地區(qū)CT基因型頻率較高,但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析沒(méi)有顯著性差異Χ20437,P0509005,因此本次實(shí)驗(yàn)中,尚沒(méi)有發(fā)現(xiàn)不同地域宿主動(dòng)物RS8153609位點(diǎn)CT基因型頻率分布有差別。4RS8174936位點(diǎn)等位基因頻率及基因型頻率在各研究組中的分布攜帶與未攜帶HV兩組標(biāo)本中均存在C、T兩種等位基因和CC、CT、TT三種基因型,將各實(shí)際觀察值代入HARDYWEINBERG平衡公式進(jìn)行檢驗(yàn)結(jié)果顯示Χ23988,P0136;即P值大于005,說(shuō)明實(shí)際基因型頻率與期望基因型頻率的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其分布符合HARDYWEINBERG平衡,具有群體代表性。HV攜帶組和未攜帶組RS8174936位點(diǎn)CC基因型頻率分別為2174%和2424%,TT基因型頻率分別為1304%和606%,CT基因型頻率分別為6522%和6970%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Χ20818,P0761005,基因型頻率無(wú)顯著性差異。RS8174936位點(diǎn)的三種基因型頻率在HV攜帶組和未攜帶組中的分布無(wú)差異。HV攜帶組和未攜帶組RS8174936位點(diǎn)C等位基因頻率分別為5217%和5909%,T等位基因頻率分別為4783%和4091%,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析沒(méi)有顯著性差異Χ20527,P0468005。即RS8174936位點(diǎn)的C和T等位基因頻率在HV攜帶組和未攜帶組中的分布沒(méi)有差異。RS8174936位點(diǎn)不同基因型與HV攜帶狀態(tài)的比較結(jié)果顯示,CC基因型及CT基因型標(biāo)本HV的感染率為3922%,TT基因型標(biāo)本HV的感染率為6000%,雖然TT基因型標(biāo)本HV的感染率略高于CC基因型及CT基因型標(biāo)本HV的感染率,但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無(wú)顯著性差異P0392005,F(xiàn)ISHERSEXACTTEST。本次試驗(yàn)中還不能認(rèn)為該位點(diǎn)與宿主動(dòng)物HV攜帶狀態(tài)相關(guān)。結(jié)論1褐家鼠、小家鼠是河北省居民區(qū)主要鼠種,褐家鼠、大倉(cāng)鼠和小家鼠是野外主要鼠種。褐家鼠是河北省的優(yōu)勢(shì)鼠種,并且是腎綜合征出血熱的主要傳染源。2RS8153609位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與褐家鼠HV攜帶狀態(tài)相關(guān),CT基因型可能會(huì)增加褐家鼠感染HV的危險(xiǎn),但其地域分布沒(méi)有顯著差別。3RS8174936位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與褐家鼠HV攜帶狀態(tài)無(wú)相關(guān)性。4TNFΑ基因可能與褐家鼠感染HV存在相關(guān)性。
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簡(jiǎn)介:碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)S2010035005人冠狀病毒0C43分子流行病學(xué)與種系進(jìn)化動(dòng)力學(xué)特征研究所院姓名導(dǎo)師師業(yè)向病原生物學(xué)研究所張?jiān)酵踅パ芯繂T任麗麗副研究員病原生物學(xué)呼吸道病毒病原學(xué)完成日期2014年05月31日目錄摘要1ABSTRACT,3引言7第一章HCOVOC43分子流行特點(diǎn)的研究171材料與方法172結(jié)果203討論294小結(jié)32第二章HCOVOC43種系進(jìn)化特征的研究331方法332結(jié)果353討滄484小結(jié)51在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文一81致謝一82
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簡(jiǎn)介:分類(lèi)號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文人乳頭瘤病毒人乳頭瘤病毒16型E5與IL12聯(lián)合聯(lián)合基因疫苗基因疫苗的免疫效果研究免疫效果研究研究生姓名李薇指導(dǎo)教師姓名、職稱(chēng)萬(wàn)艷平教授學(xué)科、專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)病原生物學(xué)研究方向抗感染免疫2011年5月目錄主要英文縮略語(yǔ)索引1中文摘要3英文摘要6前言8實(shí)驗(yàn)材料11實(shí)驗(yàn)方法及步驟13實(shí)驗(yàn)結(jié)果28討論36結(jié)論40參考文獻(xiàn)45附錄43綜述46讀碩期間發(fā)表或待發(fā)表文章及參與的課題52致謝57
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簡(jiǎn)介:隨著拉米夫定LAM在臨床的廣泛應(yīng)用出現(xiàn)了許多病毒變異株感染的慢性乙型肝炎患者在LMV的作用靶位HBVDNA聚合酶活性區(qū)發(fā)生變異即YMDD變異其發(fā)生率隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)而升高出現(xiàn)YMDD變異后如何處理目前尚無(wú)一致意見(jiàn)繼續(xù)服用LMV有可能選擇出更多的變異株停用LMV則可能使野生型HBV的復(fù)制重占優(yōu)勢(shì)導(dǎo)致病情反復(fù)對(duì)YMDD變異株感染者的治療成為臨床亟待解決的問(wèn)題雙環(huán)醇制劑百賽諾為化學(xué)合成的國(guó)家一類(lèi)治療肝炎新藥其抗病毒作用的靶位并非是在HBVDNA聚合酶基于此我們選擇該品種用于治療HBVYMDD變異株感染以華東地區(qū)多家醫(yī)院為參研單位于2005年9月至2006年10月進(jìn)行了多中心臨床研究評(píng)價(jià)其療效和安全性材料與方法對(duì)象慢性乙型病毒性肝炎活動(dòng)期患者12~65歲性別不限HBVYMDD變異株感染組68例未變異株感染組100例病例來(lái)自華東地區(qū)的9所大醫(yī)院方法采用多中心的隨機(jī)、開(kāi)放性臨床研究?jī)山M均予百賽諾雙環(huán)醇片口服50MG次每同三次療程24周觀察受試患者的臨床癥狀、體征變化及不良事件治療前、治療期間第12周及治療結(jié)束時(shí)第24周分別檢測(cè)血常規(guī)、肝功能、乙肝三系和HBVDNA水平數(shù)據(jù)處理研究數(shù)據(jù)通過(guò)SPSS110統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理計(jì)量資料采用T檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料采用X檢驗(yàn)結(jié)果雙環(huán)醇片能明顯改善HBVYMDD變異株感染者的臨床癥狀和肝功能24周末的ALT及AST復(fù)常率分別達(dá)794﹪和706﹪顯效率ALT復(fù)常HBVDNA陰轉(zhuǎn)為162﹪有效率ALT復(fù)常HBVDNA滴度下降大于兩個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)為206﹪治療24周末的血清HBEAG陰轉(zhuǎn)率279﹪HBEAG血清轉(zhuǎn)換率148﹪HBVDNA陰轉(zhuǎn)率176﹪療效與未變異組療效相近結(jié)論1雙環(huán)醇片能明顯改善HBVYMDD變異株感染者的肝功能2雙環(huán)醇片對(duì)HBVYMDD變異株病毒的復(fù)制有一定的抑制作用3治療作用與用藥劑量及時(shí)間的相關(guān)性值得深入研究
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