簡(jiǎn)介：目的狂犬病RABIES是由狂犬病病毒RABIESVIRUS所致的以中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染為特征的急性人畜共患烈性傳染病。是迄今為止人類病死率最高的急性傳染病，一旦發(fā)病病死率幾乎為100％。帶狂犬病病毒的動(dòng)物是本病的傳染源，馴養(yǎng)動(dòng)物中以犬為主，其次是貓、豬、牛和馬等。野生動(dòng)物如蝙蝠、狐貍、浣熊、臭鼬等是發(fā)達(dá)國(guó)家和基本控制了犬狂犬病地區(qū)的主要傳染源，我國(guó)狂犬病的主要傳染源是病犬和帶毒犬。對(duì)貌似健康的犬只唾液進(jìn)行狂犬病病毒抗原檢測(cè)是發(fā)現(xiàn)傳染源的快速、準(zhǔn)確、有效的方法。目前世界衛(wèi)生組織推薦應(yīng)用的抗原檢測(cè)方法為快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷RAPIDRABIESENZYMEIMMUNODIAGNOSIS，RREID和直接熒光抗體檢測(cè)FLUESCENTANTIBODYASSAY，F(xiàn)AT。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查，全球每年死于狂犬病的患者約有40，00050，000，其中99％以上發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家，亞洲、非洲和拉丁美洲是狂犬病的主要疫源地，我國(guó)的狂犬病發(fā)病數(shù)僅次于印度，居世界第二位。我國(guó)人狂犬病流行從建國(guó)到現(xiàn)在經(jīng)歷了兩次起伏，1951年全國(guó)統(tǒng)一開(kāi)展滅犬活動(dòng)使狂犬病發(fā)病數(shù)大幅下降，但到70年代中期，疫情開(kāi)始上升，1990年狂犬病發(fā)病數(shù)又開(kāi)始下降，1998年后狂犬病發(fā)病人數(shù)開(kāi)始持續(xù)回升，2004年與2005年報(bào)告發(fā)病數(shù)分別為2651例與2571例，2006年報(bào)告發(fā)病數(shù)3279例，2007年報(bào)告發(fā)病數(shù)3311例。四川省累計(jì)報(bào)告狂犬病例數(shù)也逐年上升，2006年為全國(guó)第6位191例，2007年為全國(guó)第三位335例，疫情形勢(shì)十分嚴(yán)峻。四川省衛(wèi)生廳對(duì)此高度重視，遂要求預(yù)防和控制狂犬病辦公室對(duì)我省不同地區(qū)家犬唾液進(jìn)行狂犬病病毒抗原檢測(cè)以及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源。由于世界衛(wèi)生組織推薦應(yīng)用的快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷方法應(yīng)用方便、簡(jiǎn)單快速可用作大樣本的流行病學(xué)調(diào)查。目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中應(yīng)用滅活的固定毒株作為陽(yáng)性對(duì)照，其應(yīng)視為有潛在傳染性。本文應(yīng)用國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的人用狂犬病疫苗作為陽(yáng)性對(duì)照。比較疫苗陽(yáng)性對(duì)照與試劑盒陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性率間差異，為今后進(jìn)行更安全的抗原檢測(cè)提供借鑒。方法對(duì)2006年2007年間采集的四川省1095只家犬唾液進(jìn)行狂犬病病毒抗原檢測(cè)?？袢〔《究乖瓩z測(cè)采用快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷RAPIDRABIESENZYMEIMMUNODIAGNOSIS，RREID方法，選用武漢生物制品研究所抗原檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，人用狂犬病疫苗作為抗原陽(yáng)性對(duì)照與試劑盒中提供的陽(yáng)性對(duì)照同時(shí)進(jìn)行。操作方法嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作規(guī)程進(jìn)行，所有的試劑均在有效期內(nèi)使用，用樣本吸光率值與既定的判定值CUTOFFVALUE，COV進(jìn)行比較來(lái)判定樣本中狂犬病病毒抗原陽(yáng)性與否，資料分析采用計(jì)數(shù)資料的X2檢驗(yàn)，當(dāng)T005認(rèn)為差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。試劑盒陽(yáng)性對(duì)照與疫苗陽(yáng)性對(duì)照兩種方法選用靈敏度SENSITIVITY，SEN、特異度SPECIFICITYSPE、陰性似然比NEGATIVELIKELIHOODRATIOLR、YOUDEN指數(shù)YOUDENSINDEX、診斷粗符合率CRUDEACCURACYCA及調(diào)整一致性ADJUSTEDAGREEMENTAA描述。結(jié)果1095只家犬唾液進(jìn)行狂犬病病毒抗原檢測(cè)時(shí)，試劑盒陽(yáng)性對(duì)照符合試劑盒說(shuō)明顯色，5只家犬唾液抗原檢測(cè)呈陽(yáng)性，人用狂犬病疫苗吸光率值大于判定點(diǎn)值方可作為陽(yáng)性對(duì)照，人用狂犬病疫苗作陽(yáng)性對(duì)照時(shí)同樣5只家犬唾液抗原檢測(cè)呈陽(yáng)性，兩組陽(yáng)性率間無(wú)差異經(jīng)FISHER確切概率法，四格表，P＞005人用狂犬病疫苗作為陽(yáng)性對(duì)照靈敏度、特異度均為100％，陰性似然比為1，粗符合率為100％，調(diào)整一致性為100％。結(jié)論人用狂犬病疫苗作為狂犬病病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性對(duì)照的靈敏度、特異度高，與試劑盒陽(yáng)性對(duì)照比較粗符合率和調(diào)整一致性沒(méi)有顯著性差異，疫苗陽(yáng)性對(duì)照的陽(yáng)性率與標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照的陽(yáng)性率之間也無(wú)顯著性差異。提示人用狂犬病疫苗作為狂犬病病毒抗原檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照是安全、有效的。

簡(jiǎn)介：在現(xiàn)代電子技術(shù)的研究和應(yīng)用中，示波器是不可缺少的測(cè)量工具。隨著電子技術(shù)的發(fā)展，窄脈沖技術(shù)已經(jīng)進(jìn)入皮秒時(shí)代，要對(duì)皮秒量級(jí)的脈沖波形進(jìn)行測(cè)量，則需要帶寬達(dá)幾十吉赫茲的取樣示波器，然而寬帶取樣示波器的上升時(shí)間和帶寬校準(zhǔn)面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。因此，本文將圍繞用“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)寬帶取樣示波器上升時(shí)間和帶寬展開(kāi)研究。本文首先詳細(xì)地分析了“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)寬帶取樣示波器技術(shù)的理論，并對(duì)整個(gè)校準(zhǔn)過(guò)程進(jìn)行了仿真。分析了“KICKOUT”脈沖產(chǎn)生的原理，并用PSPICE軟件對(duì)“KICKOUT”脈沖產(chǎn)生原理以及直流偏置的大小與“KICKOUT”脈沖的關(guān)系進(jìn)行了仿真。其次對(duì)兩臺(tái)取樣示波器以及三臺(tái)取樣示波器對(duì)接進(jìn)行了“NOSETONOSE”對(duì)接實(shí)驗(yàn)，并用VISUALBASIC作為軟件開(kāi)發(fā)平臺(tái)，編寫了“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)取樣示波器的自動(dòng)控制和“KICKOUT”脈沖響應(yīng)波形的數(shù)據(jù)采集軟件。然后研究了“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)取樣示波器的數(shù)據(jù)處理方法，其中包括時(shí)基失真、時(shí)基抖動(dòng)影響、時(shí)基漂移影響、如何進(jìn)行相位解纏繞和反卷積濾波器的設(shè)計(jì)等。并用MATLAB語(yǔ)言編寫了“NOSETONOSE”方法校準(zhǔn)取樣示波器的數(shù)據(jù)處理軟件，得到了取樣示波器的上升時(shí)間和幅頻響應(yīng)。并“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)帶寬為50GHZ和70GHZ的取樣示波器的上升時(shí)間和頻響的結(jié)果進(jìn)行了分析，并與掃頻法校準(zhǔn)的頻響結(jié)果進(jìn)行了比較。同時(shí)對(duì)“NOSETONOSE”法校準(zhǔn)帶寬為50GHZ取樣示波器的上升時(shí)間結(jié)果進(jìn)行了不確定度評(píng)定。最后研究了“NOSETONOSE”方法校準(zhǔn)取樣示波器過(guò)程中數(shù)據(jù)處理方法在計(jì)量和測(cè)試中的應(yīng)用，主要分析了如何測(cè)量微波高速開(kāi)關(guān)的開(kāi)關(guān)時(shí)間和如何準(zhǔn)確測(cè)量25PS上升時(shí)間的方法。

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男ｏL(fēng)和科研作風(fēng)，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名立啻日期竺￡蘭墨幺第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期目錄英文縮寫一覽表1英文摘要3中文摘要6論文正文慢病毒介導(dǎo)BC047440基因沉默逆轉(zhuǎn)HEPG2／ADM細(xì)胞化療耐藥性機(jī)制的初步研究9前言99日U舌第一部分特異性BC047440SHRNA慢病毒對(duì)HEPG2／ADM細(xì)胞BC047440基因的沉默效應(yīng)及對(duì)HEPG2／ADM細(xì)胞化療耐藥性的影響12材料與方法12結(jié)果26J日；1CZU討念33小結(jié)34第二部分BC047440基因沉默逆轉(zhuǎn)HEPG2／ADM細(xì)胞化療耐藥性機(jī)制的探討35材料與方法35結(jié)果43討論48小結(jié)49全文結(jié)論50致謝5L參考文獻(xiàn)52文獻(xiàn)綜述肝癌的基因治療研究進(jìn)展一56參考文獻(xiàn)63在讀碩士期間發(fā)表的論文67

簡(jiǎn)介：R～～河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽名強(qiáng)嗨雌章和蛹二藪學(xué)哆領(lǐng)導(dǎo)積年月日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。太論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名弧脯哲導(dǎo)師簽章刪孜翔年月日目錄／必嬲必中文摘要1英文摘要3研究論文STATL和H2AX基因SHRNA慢病毒載體構(gòu)建及食管癌細(xì)胞體外轉(zhuǎn)染前言5一再LJ舌材料與方法7結(jié)果19附圖22附表39討論40結(jié)論44參考文獻(xiàn)45綜述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子ISTATL的研究進(jìn)展50致謝65個(gè)人簡(jiǎn)歷66

簡(jiǎn)介：戊型肝炎病毒HEV是戊型肝炎的病原體，隨著HEV流行病學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)HEV的4個(gè)主要基因型存在著明顯的易感宿主差異基因1型HEV1和基因2型HEV2僅分離于人類，能導(dǎo)致大規(guī)模的戊肝爆發(fā)流行，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物目前只成功感染非人靈長(zhǎng)類，而基因3型HEV3和基因4型HEV4人畜共患，僅見(jiàn)于小規(guī)模流行和臨床散發(fā)。將HEV分為兩類包括HEV12的HHUMAN類和包括HEV34的ZZOONOSIS類。首先通過(guò)WESTERNBLOT、體外捕獲PCR、ELISA阻斷實(shí)驗(yàn)及合成的多肽庫(kù)對(duì)實(shí)驗(yàn)室制備的多株抗HEV單抗的識(shí)別表位進(jìn)行系統(tǒng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)12株線性單抗識(shí)別的位都位于F2AA408458之間，17株構(gòu)象型單抗識(shí)別表位都定位于F2AA459606之間，其中15株的識(shí)別表位位于天然病毒表面?，F(xiàn)有研究結(jié)果表明HEV的主要中和表位區(qū)域集中于F2的AA459606之間，并且也是主要介導(dǎo)HEV與嗜性細(xì)胞吸附的區(qū)域。本研究通過(guò)比較這兩類HEVF2AA368606區(qū)段，發(fā)現(xiàn)存在4個(gè)類保守的差異位點(diǎn)，均位于HEV的主要中和表位區(qū)域，分別是SER483THR、VAL492MET、SER497THR和ALA599GLY。以能形成類病毒顆粒的HEV239F2AA368606為基礎(chǔ)，對(duì)這四個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行定點(diǎn)替換突變，并以這15株能夠捕獲HEV1和或HEV4的單克隆抗體比較各種突變體的免疫反應(yīng)性，結(jié)果表明僅AA497的差異造成了這兩類HEV中和表位構(gòu)象的部分差異，提示AA497及其相關(guān)的病毒表面結(jié)構(gòu)差異可能在H類和Z類HIEV宿主選擇中扮演重要角色。

簡(jiǎn)介：目的1、分析國(guó)家傳染病疫情報(bào)告網(wǎng)中關(guān)于病毒性肝炎報(bào)告方面存在的主要問(wèn)題。2、了解醫(yī)療機(jī)構(gòu)的病毒性肝炎診斷報(bào)告現(xiàn)狀以及影響因素。3、了解未分型肝炎的病原譜。對(duì)象與方法1、研究對(duì)象11疫情資料來(lái)源通過(guò)國(guó)家疾病監(jiān)測(cè)信息報(bào)告管理系統(tǒng)收集江蘇省泰興市、丹陽(yáng)市和張家港市2005年1月L開(kāi)～2009年12月31日?qǐng)?bào)告的病毒性肝炎報(bào)告病例資料。所有報(bào)告病例的現(xiàn)住址為本市；報(bào)告病例均通過(guò)信息邏輯檢查和重復(fù)報(bào)告等審核。12張家港、丹陽(yáng)、泰興三個(gè)縣級(jí)市的人民醫(yī)院、中醫(yī)院、婦幼保健院、五家鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院以及被調(diào)查醫(yī)院的臨床醫(yī)生。132009年1月1日12月31日在三個(gè)縣級(jí)市各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過(guò)國(guó)家疾病監(jiān)測(cè)信息報(bào)告管理系統(tǒng)報(bào)告的部分病毒性肝炎住院病歷。2、調(diào)查方法21以問(wèn)卷調(diào)查的形式在各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的感染管理科或防保科、檢驗(yàn)科、肝炎患者診治相關(guān)科室分別調(diào)查病毒性肝炎報(bào)告流程、肝炎檢測(cè)能力和醫(yī)務(wù)人員對(duì)肝炎報(bào)告知識(shí)的掌握情況反映醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)病毒性肝炎的管理現(xiàn)狀和醫(yī)務(wù)人員在診斷和報(bào)告病毒性肝炎過(guò)程中的存在問(wèn)題。22對(duì)2009年1月1日12月31日期間泰興、丹陽(yáng)、張家港傳染病網(wǎng)絡(luò)報(bào)告的病毒性肝炎部分住院病例進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查內(nèi)容包括基本情況、流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、醫(yī)院最終診斷等。3、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法采集未分型肝炎病人的血標(biāo)本及時(shí)分離血清2ML。用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測(cè)血清中下列指標(biāo)抗HAVIGM、HBSAG、、HBEAG、抗HBC、抗HBCIGM、抗HCV、抗HEVIGM、EB病毒VCAIGM抗體、庚型肝炎病毒抗體HGCIGG、單純皰疹病毒IGM抗體HERPESSIMPLEXVIRUS2IGM、巨細(xì)胞病毒IGM抗體CYTOMEGALOVIMSIGM實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。4、分析方法采用EPIDATA302軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)雙份錄入數(shù)據(jù)并進(jìn)行一致性校對(duì)運(yùn)用SPSS130軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；率的比較采用X2檢驗(yàn)、率的變化趨勢(shì)采用趨勢(shì)X2檢驗(yàn)；多因素分析用LOGISTIC回歸。結(jié)果1、2005年～2009年三個(gè)市共報(bào)告病毒性肝炎5755例其中臨床診斷病例2995例占520％、實(shí)驗(yàn)室診斷2695例占468％疑似病例48例占083％病原攜帶17例占030％；一級(jí)醫(yī)院共報(bào)告病例1134例實(shí)驗(yàn)室診斷病例占362％；二級(jí)醫(yī)院共報(bào)告病例4392例實(shí)驗(yàn)室診斷病例占506％；不同等級(jí)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室和臨床診斷存在顯著性差異X272998P2、五年間病毒性肝炎的報(bào)告發(fā)病率有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異最高為2007年4371／10萬(wàn)最低為2009年3505／10萬(wàn)X23544P3、2005～2009年報(bào)告發(fā)病率按年齡組進(jìn)行分析結(jié)果顯示5年間10歲以下年齡組報(bào)告發(fā)病率較低也較平穩(wěn)10～20～45～年齡組5年間報(bào)告發(fā)病率波動(dòng)性較大各年齡組不同年間的報(bào)告發(fā)病率均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P4、調(diào)查張家港丹陽(yáng)泰興三個(gè)縣級(jí)市不同等級(jí)醫(yī)院傳染科醫(yī)生內(nèi)科醫(yī)生128人下發(fā)問(wèn)卷128份回收問(wèn)卷128份問(wèn)卷合格率為100％。共收集三個(gè)縣級(jí)市2009年的病毒性肝炎病例332份三個(gè)縣級(jí)市乙肝診斷符合率為851％診斷存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異X2617P005；甲肝和戊肝的診斷符合率相對(duì)于乙肝較高；丙肝的診斷90％以上都屬于臨床診斷病例；同時(shí)未分型肝炎在所調(diào)查的病歷中也占有很大比重未分型肝炎的平均可分型率為421％。影響急慢性肝炎診斷的可能因素為醫(yī)院的等級(jí)以及醫(yī)生的職稱。5、23家鄉(xiāng)鎮(zhèn)級(jí)醫(yī)院的病毒性肝炎管理、檢測(cè)能力調(diào)查顯示開(kāi)展乙肝兩對(duì)半、HBCIGM、HAVIGM、抗HCV、HEVIGM的定性檢測(cè)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)分別占100％、217％、478％、739％、304％且在不同級(jí)醫(yī)院差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X2448P6、對(duì)85例未分型肝炎的疾病譜研究發(fā)現(xiàn)乙肝14例戊肝2例脂肪肝2例巨細(xì)胞病毒感染5例人類皰疹病毒3例單純皰疹病毒感染2例未分型肝炎的重新分型率為329％。結(jié)論1、國(guó)家疫情報(bào)告網(wǎng)的20052009病毒性肝炎疫情分析發(fā)現(xiàn)一級(jí)醫(yī)院362％和二級(jí)醫(yī)院506％的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告病例較低但實(shí)際的機(jī)構(gòu)調(diào)查發(fā)現(xiàn)二級(jí)醫(yī)院的肝炎檢測(cè)頻率等均高于80％；五年間乙肝的10～20～45～年齡組報(bào)告發(fā)病率波動(dòng)性較大各年齡組不同年間的報(bào)告發(fā)病率均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異同時(shí)急性乙肝和慢性乙肝的報(bào)告發(fā)病率之間的比例在同一年齡段人群中也少有一致因此疫情報(bào)告網(wǎng)上的數(shù)據(jù)很難反映其真實(shí)肝炎疫情。2、我們省現(xiàn)階段的病毒性肝炎診斷問(wèn)題主要出在急慢性乙肝上乙肝急慢性診斷符合率為530％；甲肝、戊肝以及丙肝的報(bào)告和診斷正確率較乙肝高；影響病毒性肝炎診斷的可能因素為醫(yī)生的診斷知識(shí)掌握情況以及醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施和試劑的使用情況。3、未分型肝炎的診斷報(bào)告準(zhǔn)確率較低從病例的調(diào)查再加上實(shí)驗(yàn)室的復(fù)核診斷其重新分型率為329％20052009年的疫情報(bào)告網(wǎng)中報(bào)告的未分型肝炎占所有肝炎的比例最高達(dá)1111％因此應(yīng)加強(qiáng)對(duì)未分型肝炎的管理在報(bào)告未分型肝炎的時(shí)應(yīng)在排除其他型別肝炎的前提下再報(bào)告同時(shí)保留血清有待于上一級(jí)機(jī)構(gòu)進(jìn)行復(fù)核。

簡(jiǎn)介：當(dāng)今“全球化時(shí)代”是多元文化相互交流、融合和碰撞的時(shí)代，現(xiàn)今中國(guó)社會(huì)生活的一個(gè)突出特征是多元化。護(hù)理作為維護(hù)人類健康服務(wù)的衛(wèi)生事業(yè)重要組成，為適應(yīng)社會(huì)全球化及多元化的背景，其發(fā)展趨勢(shì)是多元文化護(hù)理已成為時(shí)代的必然。護(hù)理教育是護(hù)理事業(yè)發(fā)展的最重要的基石，護(hù)理教育如何適應(yīng)多元文化護(hù)理的挑戰(zhàn)是近年來(lái)護(hù)理教育、臨床及衛(wèi)生行政部門極為關(guān)注且迫切需要解決的一個(gè)熱點(diǎn)問(wèn)題。本研究首次以護(hù)理實(shí)習(xí)生為對(duì)象，在文獻(xiàn)綜述的基礎(chǔ)上，調(diào)查護(hù)生對(duì)多元文化護(hù)理的理論知識(shí)、語(yǔ)言溝通、宗教風(fēng)俗、飲食文化的認(rèn)知水平并對(duì)影響因素進(jìn)行了分析，運(yùn)用案例教學(xué)法、主題講授法及輔導(dǎo)自學(xué)法分別進(jìn)行教學(xué)干預(yù)，并對(duì)干預(yù)前后的效果進(jìn)行了比較，從管理者角度，對(duì)多元文化護(hù)理課程建設(shè)及教學(xué)方法提出了建議，本研究可為優(yōu)化護(hù)理教學(xué)質(zhì)量與效率提供科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果護(hù)生多元文化護(hù)理認(rèn)知水平不高，表現(xiàn)在知識(shí)理論、語(yǔ)言溝通、宗教風(fēng)俗及飲食文化四個(gè)維度上；總體及格率低，尤以概念不知、預(yù)防文化休克措施不明、“朝陽(yáng)模式”未聽(tīng)說(shuō)、文化照顧保存、調(diào)整及再建不理解等為突出。影響護(hù)生多元文化護(hù)理認(rèn)知的主要因素依次為沒(méi)有要求過(guò)、沒(méi)有培訓(xùn)過(guò)、不知道有此內(nèi)容、抽象難學(xué)、因語(yǔ)言交流困難不想學(xué)。三種方法干預(yù)認(rèn)知得分結(jié)果縱向比較差異均具有顯著性，表明案例法、講授法及自學(xué)法均能提高護(hù)生多元文化護(hù)理認(rèn)知水平；三種方法干預(yù)及模擬實(shí)景服務(wù)考核的橫向比較案例法提高程度最大，主題法次之，自學(xué)法提高程度最?。话咐ㄅc主題法及自學(xué)法間的差異均具有顯著性。在上述研究的基礎(chǔ)上，本研究提出如下建議（1）大力宣傳多元文化護(hù)理，明確其在構(gòu)建和諧護(hù)理中的作用；（2）增設(shè)多元文化護(hù)理課程是護(hù)理教育應(yīng)對(duì)社會(huì)多元化的必由之路；（3）增設(shè)多元文化護(hù)理課程應(yīng)明確教學(xué)目標(biāo)及教學(xué)內(nèi)容；（4）采用案例講授法及兼顧其他教學(xué)法是進(jìn)行多元文化護(hù)理教學(xué)的有效策略；（5）建立多元文化護(hù)理學(xué)習(xí)資料庫(kù)，幫助護(hù)生理解及應(yīng)用理論；（6）編撰中英法日四語(yǔ)種護(hù)理200句，滿足護(hù)生臨床應(yīng)用的需要。

簡(jiǎn)介：徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文KI67啟動(dòng)子調(diào)控的荷載雙基因RNA干擾的條件增殖腺病毒靶向治療腎癌體外實(shí)驗(yàn)研究姓名李靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師鄭駿年201203徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文復(fù)制能力。2IMPCR檢測(cè)結(jié)果與免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示在腎癌KETR3、786O、ACHN細(xì)胞中，飚67ZD55DOUBLESIIⅢA組及鼬67ZD55Ⅺ67SIIⅢA組的Ⅺ67MIⅢA的表達(dá)和蛋白的表達(dá)均明顯降低，與其它組和對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義尸O05。3CCK8法、結(jié)晶紫染色法及A皿EXINVFITC／PI法顯示四種病毒對(duì)腎癌KETR3、786O、ACHN細(xì)胞均有殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，且CCK_8法顯示病毒對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用與病毒的濃度及感染時(shí)間存在正相關(guān)性，其中飚67ZD55DOUBLESIRNA組對(duì)腎癌細(xì)胞的殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用最強(qiáng)，尸O05；飚67一ZD55組對(duì)腎癌細(xì)胞的殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用最弱，PO05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。四種腺病毒在KETR3細(xì)胞中作用最明顯，在786O細(xì)胞中作用其次，在ACHN細(xì)胞中作用較弱；四種病毒對(duì)HK2細(xì)胞均無(wú)明顯殺傷作用、增殖抑制作用作用和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。結(jié)論成功構(gòu)建的攜帶飚67啟動(dòng)子、飚67SIRNA及HTERTSIRNA的條件增殖型腺病毒飚67ZD55、飚67ZD55飚67SIRNA、飚67ZD55HTERTSIIⅢA、Ⅺ67ZD55DOUBLESIIⅢA可在表達(dá)Ⅺ67的腎癌細(xì)胞內(nèi)大量擴(kuò)增，除了發(fā)揮自身的溶瘤作用外，還可高效表達(dá)飚67SIRNA、HTEIMSIRNA，從而進(jìn)一步增強(qiáng)了其抑制腎癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)腎癌細(xì)胞凋亡的作用；攜帶飚67啟動(dòng)子上述腺病毒，表現(xiàn)出更強(qiáng)的靶向性和生物學(xué)活性。本研究為腫瘤的生物治療提供了一個(gè)新的思路，為本實(shí)驗(yàn)的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分提供了可行性依據(jù)。4

簡(jiǎn)介：H5N1禽流感在全球各地爆發(fā)以來(lái)，到2007年底，WHO已經(jīng)證實(shí)感染禽流感致死的人數(shù)超過(guò)200人，致死率高于50％。WHO的專家預(yù)測(cè)禽流感病毒在人體的逐步適應(yīng)很可能引起一場(chǎng)全球性的流感大爆發(fā)，推薦各國(guó)開(kāi)發(fā)生產(chǎn)H5N1人用流感疫苗。目前H5N1人用流感疫苗主要是用雞胚為培養(yǎng)基質(zhì)開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，H5N1禽流感爆發(fā)時(shí)難于在短期內(nèi)提供足夠的雞胚生產(chǎn)疫苗，另外，雞胚中可能帶有的外源性因子也影響疫苗的質(zhì)量。VERO細(xì)胞是WHO推薦用于生產(chǎn)疫苗的細(xì)胞，能夠利用生物反應(yīng)器進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。與雞胚來(lái)源的疫苗比較，在VERO細(xì)胞上得到的流感疫苗可以產(chǎn)生較強(qiáng)的體液免疫反應(yīng)和細(xì)胞免疫反應(yīng)。如果研究出一種用VERO細(xì)胞培養(yǎng)的H5N1禽流感疫苗毒株，將能較好的解決現(xiàn)在禽流感疫苗生產(chǎn)存在的一些問(wèn)題，對(duì)防治禽流感有重大意義。該實(shí)驗(yàn)選用H5N1禽流感疫苗株與本實(shí)驗(yàn)室篩選的H3N2VERO適應(yīng)株同時(shí)接種雞胚，24小時(shí)后取尿囊液，加入H3N2VERO細(xì)胞適應(yīng)株的抗血清中和后在VERO細(xì)胞上傳代，獲得H5N1VERO細(xì)胞高產(chǎn)適應(yīng)株，利用空斑實(shí)驗(yàn)純化毒株連續(xù)傳代20代后，應(yīng)用血凝抑制實(shí)驗(yàn)與基因測(cè)序鑒定該毒株，并進(jìn)一步測(cè)定該H5N1VERO細(xì)胞適應(yīng)株的致病性、免疫原性等生物學(xué)特性。獲得的H5N1VERO細(xì)胞適應(yīng)株可用于H5N1禽流感人用疫苗的開(kāi)發(fā)。

簡(jiǎn)介：本文通過(guò)4～5日齡白紋伊蚊胸腔接種和經(jīng)口感染登革病毒，并使之產(chǎn)卵，收集的蚊卵27℃保存7天后一部分檢測(cè)，一部分孵化，幼蟲(chóng)飼養(yǎng)至成蚊，如此反復(fù)傳代。檢測(cè)每一代蚊卵內(nèi)登革病毒，以每一代感染登革病毒白紋伊蚊總RNA為模板進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增502BP的片段，再設(shè)計(jì)登革Ⅰ、Ⅱ型病毒型特異性引物，然后以RTPCR產(chǎn)物為模板，分別用對(duì)應(yīng)型特異性引物作套式PCR，目的產(chǎn)物經(jīng)TA克隆后測(cè)序鑒定。2用C636細(xì)胞分離各子代成蚊體內(nèi)登革病毒，并用TCID50滴定其滴度。本文通過(guò)白紋伊蚊胸腔接種登革Ⅰ、Ⅱ型病毒和經(jīng)口感染登革Ⅰ型病毒，并使之傳代，運(yùn)用RTPCR、套式PCR和C636細(xì)胞TCID50測(cè)定滴度，證實(shí)我國(guó)白紋伊蚊可以連續(xù)經(jīng)卵傳遞登革病毒，本實(shí)驗(yàn)建立的檢測(cè)方法經(jīng)進(jìn)一步完善在登革熱的流行病學(xué)調(diào)查及疾病監(jiān)測(cè)等方面將有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多益氣養(yǎng)陰、活血化瘀法對(duì)病毒性心肌疾病小鼠血清γ-IFN影響的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多重組腺病毒Ad--RUNrf2對(duì)百草柘致大鼠肺損傷的保護(hù)作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：流行性感冒簡(jiǎn)稱流感是由流感病毒INFLUENZAVIRUS引起的急性呼吸道傳染病。流感病毒是世界上研究最早的病毒之一，是能在短時(shí)間內(nèi)引起世界大流行的病毒，而且可以在各個(gè)年齡段的人群中引起發(fā)病。在20世紀(jì)，人類發(fā)生了四次全球性的大流行。目前的流感疫苗均以雞胚為基質(zhì)生產(chǎn)，國(guó)內(nèi)外使用雞胚培養(yǎng)疫苗已經(jīng)有50年歷史。但雞胚流感疫苗不易規(guī)?；?，一旦發(fā)生流感大流行，難以在短期內(nèi)提供足量疫苗。VERO細(xì)胞是WHO積極推薦用于疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)。然而流感病毒要在VERO細(xì)胞上生長(zhǎng)，必須添加胰酶才能保證有效繁殖，而培養(yǎng)液中的牛血清會(huì)使胰酶活性喪失，這就要求VERO細(xì)胞最好在低血清甚至無(wú)血清條件下進(jìn)行培養(yǎng)。本研究首先以不同低血清濃度培養(yǎng)VERO細(xì)胞，并在此基礎(chǔ)上接種流感病毒株，優(yōu)化接種條件。然后對(duì)VERO細(xì)胞進(jìn)行無(wú)血清培養(yǎng)，并用100ML攪拌瓶進(jìn)行微載體培養(yǎng)并接種流感病毒H3N2型VERO細(xì)胞適應(yīng)株。一、低血清培養(yǎng)VERO細(xì)胞和流感病毒的研究本實(shí)驗(yàn)采用SLM199為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加不同濃度的血清培養(yǎng)VERO細(xì)胞，觀察細(xì)胞連續(xù)傳代的生長(zhǎng)狀態(tài)，在10％血清濃度下培養(yǎng)的VERO細(xì)胞接種流感病毒血凝效價(jià)較高；固定血清濃度后優(yōu)化接種流感病毒條件，采用不同PH值、不同TPCK胰酶濃度和不同接種病毒量，測(cè)定其在不同病毒培養(yǎng)條件下的血凝效價(jià)，得到最佳培養(yǎng)流感病毒條件為PH值在72～75之間、TPCK胰酶含量為10ΜGML、MOI為10、病毒繁殖時(shí)間72H。二、無(wú)血清培養(yǎng)VERO細(xì)胞和流感病毒的研究采用逐步降血清法將VERO細(xì)胞適應(yīng)到以DMEMF12為基礎(chǔ)的無(wú)血清培養(yǎng)基中。首先靜止培養(yǎng)并接種流感病毒，收獲病毒量高于有血清培養(yǎng)的VERO細(xì)胞。然后采用動(dòng)態(tài)培養(yǎng)VERO細(xì)胞并接種流感病毒，初步摸索適宜的培養(yǎng)條件。

簡(jiǎn)介：目的不暇接對(duì)檢測(cè)乙型肝炎病毒HBVYMDD變異的3種方法進(jìn)行靈敏度和特異性比較，并結(jié)合患者治療前HBVDNA載量、ALL水平及免疫標(biāo)志物和YMDD變異后HBVDNA載量等臨床信息進(jìn)行結(jié)果分析。方法分別以熒光定量PCRFQPCR、通用模板信號(hào)擴(kuò)增UTPCR和聚合酶鏈反應(yīng)微板核酸雜交酶聯(lián)免疫吸附法PCRMNHEIJSA，對(duì)拉米夫定治療過(guò)程中血清出現(xiàn)HBVDNA由陰轉(zhuǎn)陽(yáng)的52例慢性乙型肝炎患者，進(jìn)行HBVYMDD變異檢測(cè)，比較3種方法的敏感性，并對(duì)3種方法檢測(cè)結(jié)果不一致的標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序，比較它們的特異性。同時(shí)將治療前HBVDNA載量、ALT水平、免疫標(biāo)志物及變異后HBVDNA載量與YMDD變異結(jié)果相結(jié)合進(jìn)行綜合分析。結(jié)果FQPCR、UTPCR和PCRMNHELISA對(duì)YMDD變異的檢出率分別為5385％、4808％、7307％，經(jīng)兩兩比較，F(xiàn)QPCR和IJTPCR均與PCRRNNHEIJSA有明顯差異P01。將檢測(cè)結(jié)果不一致的17例標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序，F(xiàn)QPCR、UTPCR、PCRMNHEIJSA與測(cè)序結(jié)果的符合率分別為941％、706％、294％，三者之間差異有顯著性P005。YVDD變異后的HBVDNA水平與YIDD變異后HBVDNA水平無(wú)顯著性差異P005。YMDD變異組治療前的ALT基礎(chǔ)水平高于YMDD野生組治療前水平P005。結(jié)論①3種方法比較，F(xiàn)QPCR檢測(cè)HBVYMDD變異具有較高的靈敏性和特異性，并能同時(shí)檢測(cè)出野生株和變異株的混合感染，與測(cè)序結(jié)果相符，是診斷IIBVYMDD變異較好的方法。UTPCR與PCRMNHELISA相比，特異性較好，且能具體檢測(cè)出YVDD、YIDD兩種變異，與測(cè)序結(jié)果符合率較高。以上結(jié)果提示，F(xiàn)QPCR和UTPCR法在檢測(cè)HBVYMDD變異方面優(yōu)于PCRMNHELISA法，值得臨床推廣應(yīng)用。②PCRMNHELJSA由于操作煩瑣和較高的假陽(yáng)性率，建議在方法學(xué)得以改進(jìn)后再考慮臨床應(yīng)用。⑨拉米夫定治療前ALT基礎(chǔ)水平高可能是YMDD變異的一個(gè)易發(fā)因素。密切監(jiān)控慢性乙肝患者的HBVDNA及ALT水平，有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)YMDD是否發(fā)生變異。⑥動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)HBVYMDD變異情況，有助于在拉米夫定治療過(guò)程中及時(shí)發(fā)現(xiàn)YMDD變異，及時(shí)調(diào)整治療方案。

簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文BCRABL逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠慢性粒細(xì)胞白血病樣模型的建立姓名張文萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師馮文莉20080501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文臟組織學(xué)觀察，RTPCR和WESTERNBLOT分別檢測(cè)BCR／ABL在MRNA和蛋白水平的表達(dá)情況，鑒定小鼠成模狀況。移植89周后，外周血白細(xì)胞達(dá)2030X1010／L為對(duì)照鼠的5～8倍，外周血涂片幼稚細(xì)胞達(dá)到LO‰20％；骨髓粒系細(xì)胞顯著增高，易見(jiàn)幼稚細(xì)胞，肝脾也可見(jiàn)白血病細(xì)胞浸潤(rùn)；移植45周后在受體鼠骨髓和脾臟檢出BCR／ABL融合基因，89周后在肝臟檢測(cè)出BCR／ABL融合基因，同時(shí)在骨髓和脾臟也檢測(cè)到BCR／ABL融合蛋白，建模成功的小鼠3～5月后相繼死亡。為了提高CML成模率，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還優(yōu)化和改進(jìn)了方法用纖維連接蛋白作基質(zhì)進(jìn)行病毒上清和骨髓細(xì)胞的共感染，使活細(xì)胞增加200／030％，且更易附著于瓶底，細(xì)胞狀態(tài)也更好；用2MGQOMG／109的5FU預(yù)處理雄性供體BALB／C小鼠，對(duì)小鼠骨髓原始細(xì)胞相對(duì)數(shù)量無(wú)明顯性影響；回輸給受體鼠感染了病毒的骨髓細(xì)胞數(shù)量分別為02X106個(gè)、04X106個(gè)、06X106個(gè)和1OXL06個(gè)時(shí)，小鼠CML成模率分別為60％、80％、90％和90％。2BCDABL逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠CML_二次移植模型的建立收集成功建模的C№小鼠模型的骨髓細(xì)胞或脾細(xì)胞，經(jīng)尾靜脈輸入經(jīng)亞致死劑量R射線450CGY照射的同種雌性受體鼠中，通過(guò)脾集落形成實(shí)驗(yàn)、骨髓形態(tài)學(xué)觀察、Y染色體及其特異性性別決定基因SRY檢測(cè)、BCR／ABL在MRNA和蛋白水平的表達(dá)情況，分析鑒定C池小鼠二次移植模型成模情況。結(jié)果顯示移植后12天，肉眼可見(jiàn)明顯的脾結(jié)節(jié)形成，連續(xù)切片可見(jiàn)成堆脾集落；移植45周后，在雌性受體小鼠骨髓中檢出相似Y染色體及Y染色體特異。I生SRY基因，骨髓和脾臟中檢L出BCR／ABL融合3